2,2',4,4'-四溴联苯醚通过核受体介导神经毒性作用机制的初步研究

目的:探讨2,2',4,4'-四溴联苯醚(BDE-47)对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖及对RXRα、TRs、PPARs核受体表达水平的影响,为阐明多溴联苯醚化合物神经毒性作用提供科学依据。方法:采用CCK-8法检测不同浓度BDE-47处理不同时间后的SK-N-SH细胞增殖情况;再以5、10和20μmol/L BDE-47染毒细胞24 h后,分别采用DCFH-DA荧光法、WST-1法、比色法、qPCR法测定胞内ROS水平、SOD活力、GSH-Px活力及hOGG1 m RNA表达量;采用qPCR及Western blot检测BDE-47对RXRa、TRs、PPARs受体m RNA及蛋白表达水平的影响。结果:BDE-47抑制SK-N-SH细胞增殖,其抑制作用呈明显的时间和剂量效应关系(P<0.05),24 h半数抑制浓度(IC_(50))为75.94μmol/L;与溶剂对照组相比,10和20μmol/L BDE-47导致细胞内ROS水平上升、SOD活力下降、GSH-Px活力下降、hOGG1 m RNA水平上升,并可致SK-N-SH细胞氧化损伤(P<0.05或P<0.01);BDE-47可诱导RXRα、TRs及PPARs受体各亚型m RNA及蛋白表达显著上升(P<0.05或P<0.01),并且对各亚型的诱导程度不一。结论:BDE-47抑制人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的增殖,导致氧化损伤,上调RXRα、TRs、PPARs核受体的表达从而介导神经毒性作用。

重组鹅β-防御素7蛋白的原核表达及其生物学特性分析

为探讨鹅β-防御素7（Av BD7）的生物学特性,将鹅Av BD7基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体p Pro EX HTa的EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD7,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）对其菌液进行诱导表达。经N-三（羟甲基）甲基甘氨酸十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（Tricine-SDS-PAGE）分析,该重组蛋白大小为10-15 ku,与预期大小结果一致。重组鹅Av BD7蛋白纯化后,通过菌落计数的方法测定其体外抗大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其对鸡红细胞的溶血活性。结果显示,重组鹅Av BD7蛋白对所测定的5种细菌均有显著抗菌活性（P〈0.05）,且其抑菌活性随蛋白浓度的增加而增强。高浓度盐离子（150 mmol/L）显著抑制重组鹅Av BD7蛋白的抗菌活性（P〈0.05）。重组鹅Av BD7蛋白对鸡红细胞没有溶血活性（P〉0.05）。由此可见,重组鹅Av BD7蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶血活性。

同中有异 异中有同——漫谈共同美

各个阶级有各个阶级的美,与此同时,也必然会有各个阶级之间的共同美。毛主席在《矛盾论》中说:“原来矛盾着的各方面,不能孤立地存在。假如没有和它作对的矛盾的一方,它自己这一方就失去了存在的条件。……没有生,死就不见,没有死;生就不见。没有上,无所谓下;没有下,也无所谓上。……没有地主,就没有佃农;没有佃农,也就没有地主。没有资产阶级,就没有无产阶级;没有无产阶级,也就没有资产阶级。……一切对立的成份都是这样,因一定的条件,

引导提问 让学生成为课堂的主人

随着新课程改革的不断深化,新的教育观对各学科教学提出了更高的要求,特别是对小学数学来说,教师角色已经由知识的传播者,转变为学生学习的引导者、学生发展的促进者,除了要教授学生数学知识,发展学生数学思维,更要重视培养学生的提问能力,让学生在课堂上通过“问”更好地“学”。由于生问课堂教学仍处于一个发展探索期,所以在许多地方的生问课堂中也存在着一些问题。笔者立足实践,从以下几个方面对此进行简单剖析。

探究教学智慧 创设数学趣味课堂

《小学数学课程标准》(2011)指出:“义务教育阶段的数学课程应以学生的发展为本,促进学生全面、持续、和谐的发展。”其主要目标就是要满足学生要学习探究的需求。活泼有趣的教学活动才是学生喜爱的课堂,更是推动学生可持续发展的课堂。教师只有合理运用教学机智,创设活泼多样引人入胜的课堂活动,才能培养学生的求知兴趣和欲望,让学生在注意力集中的状态下探究新知,从而增进学生对知识的内化过程。

现代教育技术在小学数学教育的应用

本文对现代教育技术在小学数学的作用以及现代教育现状做出分析,运用现代教育技术优化课堂教学,创设教学情境,诱导学 生思维,激发兴趣,使被动学习转变为主动学习,对提高教学的有效性起到了积极的推动作用,并指出了现代教育技术在小学数学教学应用 中存在的问题。

大麦粉替代不同比例玉米对奶牛生产性能的影响

选取泌乳天数、体重、产奶量相近的荷斯坦高产泌乳牛340头,随机分为试验组和对照组两组,每组170头。试验时间共28d,对照组全期饲喂全混合配方日粮(TMR),试验组分四阶段进行,每阶段7d,分别饲喂以10%、20%、30%、40%粉碎大麦粉替代玉米的TMR。结果发现:随着大麦粉替代玉米比例的增加,试验组采食量呈现下降趋势,其中30%、40%替代期采食量极显著低于对照组(P<0.01);与对照组相比,大麦粉替代不同比例玉米对奶牛产奶量影响不一致,20%、30%替代期产奶量增加0.4、0.3kg/d,10%、40%替代期分别下降0.6、0.7kg/d,但差异均不显著(P>0.05);试验组10%、40%替代期乳脂率极显著高于对照组(P<0.01),而20%、30%替代期乳脂率与对照组差异不显著(P>0.05);试验组10%替代期乳蛋白率极显著高于对照组(P<0.01),而30%、40%替代期显著低于对照组(P<0.05),20%替代期乳蛋白率较对照组下降0.012个百分点,但差异不显著(P>0.05)。综上所述,饲粮中用大麦粉替代20%比例的玉米饲喂奶牛,在不影响采食量、乳脂率、乳蛋白率情况下可提升产奶量并降低饲养成本,从而提高经济效益,为最佳替代比例。

珠海市某中职院校学生肺结核“知信行”现况研究

目的了解珠海市某中职院校学生的肺结核知识、信念、行为(简称“知信行”)水平,为开展结核病健康教育和干预提供科学依据。方法2021年1—3月采取整群抽样法,以班级为单位,用随机数字表法抽取珠海市某中职院校一年级和二年级在校学生各10个班级学生为研究对象,使用统一问卷对研究对象进行结核病相关知识、信念和行为的调查,共调查学生843名,有效问卷843份,有效率100.00%。结果珠海市某中职院校843名学生结核病总知晓率为48.99%(2891/5901),其中肺结核能传染知晓率最高[81.73%(689/843)],肺结核休学政策知晓率最低[23.01%(194/843)]。女生知识、信念、行为得分[中位数(四分位数)]分别为8(6,10)、13(12,13)和11(8,14)分,高于男生的相应得分[6(4,8)、12(11,13)和10(8,12)分](Z值分别为-6.97,-4.37,-4.20,P值均<0.01)。一年级的知识、信念得分[中位数(四分位数)]分别为8(4,10)和13(11,13)分,高于二年级的相应得分6(4,8)和12(10,13)分(Z=-4.02,-3.05,P值均<0.01)。结论珠海市某中职院校学生肺结核知晓率较低,信念和行为仍需提升,学校和当地健康教育部门应通过加强健康教育促进中职院校学生形成肺结核知识-信念-行为良性循环链,提高学生整体健康素养。

高能量水平日粮对泌乳中后期奶牛生产性能及饲料效率的影响

试验旨在研究泌乳中后期奶牛饲喂高能量水平日粮对其生产性能和饲料效率的影响。选取泌乳(220±10)d、妊娠(100±5)d、产奶量(20±5)kg的健康荷斯坦中产奶牛120头,随机分为2组,每组60头牛,对照组饲喂低能量(6.51 MJ/kg DM)全混合日粮(TMR),试验组饲喂高能量(7.26 MJ/kg DM)TMR,预试期7d,正试期20d。结果表明:试验组的干物质采食量(DMI)、4%标准乳(FCM)产量较对照组分别增加2.26、1.55 kg/d(P<0.01);试验组乳蛋白含量高于对照组(P<0.01),而饲料效率(FE)和乳脂率呈下降趋势(P>0.05);试验组奶牛饲料消化率(表观消化率、淀粉消化率)、淀粉降解速率、微生物产气量均高于对照组(P<0.01),而挥发性脂肪酸(VFA)、乙酸+丁酸含量低于对照组(P>0.05);试验组千克奶饲料成本较对照组增加0.83元/(头·d)、经济效益减少16.2元/(头·d)。由此可见,泌乳中后期奶牛仍然饲喂高能量水平日粮会降低奶牛饲料效率,提高饲喂成本,应按照泌乳天数科学配制奶牛日粮。

珠海市基层医疗机构对结核病健康管理服务项目执行情况的调查分析

目的了解珠海市基层医疗机构对结核病健康管理服务项目的执行情况,为加强结核病基本公共卫生服务提供科学依据。方法对基层医疗机构实施结核病健康管理服务项目的医务人员开展问卷调查和定性访谈,主要包括结核病防治知识知晓情况、项目执行现状、存在问题及建议。结果珠海市共72名项目医务人员,基本按规范实施结核病健康管理项目,但仍有22.2%的项目人员未协助患者追踪, 13.9%的项目人员未进行入户随访。项目的实施有利于提高患者的遵医行为和治疗依从性,但项目人员普遍存在结核病临床知识欠缺、工作任务繁重、首次入户随访困难等问题。结论结核病健康管理服务项目的实施离不开政府主导和结防机构的技术指导,基层医疗卫生机构需加强项目管理,引入绩效机制,注重人才培训,提升项目服务质量。

初乳饲喂次数对娟姗犊牛生产性能的影响

为研究探讨初乳饲喂次数对娟姗犊牛生产性能的影响,试验选取初生重接近的健康娟姗犊牛20头,随机分为4组,分别为对照组、试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组,每组5头犊牛,试验期为60天。4组犊牛出生当日饲喂两次初乳,首次初乳量按照体重的10.0%进行灌服,第2次初乳于出生后6~8 h按照体重的5.0%进行饲喂。4组犊牛出生当日在产房饲养,2日龄时均转为室外犊牛岛单栏饲养。2日龄后,对照组每天上午06:00和下午16:00时各饲喂常乳1次,2~6日龄每次饲喂1.50 L,7~20日龄每次饲喂1.80 L,21~35日龄每次饲喂2.50L,36~60日龄每次饲喂3.00 L,自7日龄开始犊牛自由采食颗粒料。试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别继续饲喂初乳至犊牛2日龄、4日龄、6日龄后再饲喂常乳,饲喂时间和饲喂量与对照组一致。结果表明:(1)在饲喂初乳后48 h、72 h、96 h,试验组与对照组犊牛血清免疫球蛋白g(IgG)均差异显著(p<0.05),120 h、144h、168 h,试验Ⅰ组与对照组比较,犊牛血清Ig G含量差异不显著(p>0.05),试验Ⅱ组、Ⅲ组血清Ig G含量与对照组相比,差异极显著(p<0.01)。(2)随着初乳饲喂次数的增加,可有效降低犊牛20日龄内腹泻发生率,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组较对照组比较犊牛腹泻发生率分别降低9.5%、22.5%、36.5%,治疗犊牛腹泻总成本较对照组分别下降12.0元、43.2元、76.8元,3组试验组犊牛成活率为100.0%。(3)初乳饲喂次数的增加,使0~60日龄娟姗犊牛平均日增重(ADG)升高,试验组与对照组相比较,日增重均差异极显著(p<0.01),分别增加16.7 g、33.3 g、80.0 g。试验Ⅱ组、Ⅲ组较试验Ⅰ组ADG差异也极显著(p<0.01)。综合考虑,建议娟姗犊牛饲喂初乳至6日龄,可降低犊牛腹泻发生率、减少治疗费用,提高犊牛成活率及ADG。

重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达及生物学特性

【目的】研究重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达并探究其生物学特性。【方法】采用His标签蛋白原核表达系统,将鹅防御素12(Av BD12)基因亚克隆到表达载体p Pro EX-HTa上,构建重组表达质粒。将重组表达质粒转化到大肠杆菌Rosseta感受态中,用IPTG进行诱导表达,并对该重组蛋白进行纯化。进一步采用菌落计数法测定其体外抗菌活性和盐离子稳定性。【结果】经Tricine-SDS-PAGE电泳分析,诱导表达的鹅Av BD12重组蛋白分子量约为12 k D,大部分以包涵体形式存在。该重组蛋白对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌均具有抗菌活性,高浓度盐离子显著抑制重组蛋白的抗菌活性。此外,该重组蛋白对鸡红细胞没有溶血活性。【结论】该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶解鸡红细胞的活性。

HN蛋白携带TC标签的重组新城疫病毒的构建及鉴定

新城疫病毒(NDV)是在世界范围内引发家禽发病和死亡的主要病因。HN作为重要的囊膜蛋白,在NDV吸附入侵过程中发挥重要作用。本研究利用反向遗传技术,在HN编码区的N端插入由6个氨基酸组成的TC标签(tetracysteine),成功转染细胞拯救获得TC标记的重组病毒La Sota-HN-NTC,经鉴定La Sota-HN-NTC能够在鸡胚中有效复制,生长曲线与亲本病毒La Sota相似。Western-blot结果显示,La Sota-HN-NTC中HN蛋白的表达量与La Sota相比无明显变化。La Sota-HN-NTC的毒力稍低于La Sota,并且TC标签能够在重组病毒中稳定存在。La Sota-HN-NTC感染的细胞中能够观察到明显的绿色荧光,表明TC标记的HN蛋白能够正常表达并被双砷染料特异性染色。NDV吸附试验表明,La Sota-HN-NTC吸附细胞受体的能力没有因为TC标签发生改变。激光共聚焦监测到了La Sota-HN-NTC感染细胞中HN蛋白的动态分布。本研究为监测HN蛋白在NDV感染过程中的动态分布,阐明HN蛋白在NDV感染中的作用机制提供了工具和基础。

珠海市实施结核病患者健康管理服务的SWOT分析

目的分析珠海市实施结核病患者健康管理服务现况,为提升服务质量提供科学依据。方法利用态势分析法(SWOT分析),综合评价珠海市实施结核病患者健康管理服务项目的优势、劣势、机遇和威胁。结果结核病健康管理服务项目实施前后珠海市活动性肺结核患者登记发病率、新涂阳肺结核登记发病率、治疗成功率、患者丢失率比较差异无统计学意义(χ~2值分别为0.66、0.75、3.43、3.13,P值均>0.05)。态势分析可知,优势:项目开展利于结核病防治资源整合,增加服务可及性;劣势:基层医疗机构服务能力和居民认可度不足制约项目发展;机遇:政策支持经费保障,医联体形成促进项目推动;威胁:结核病防治难度加大,医防协作机制不明确。结论基层医疗机构应争取政府支持,加强资源配备和部门协作,完善内部管理,提升服务质量。

农田水利工程中节水灌溉技术的应用

随着优质农业的发展,农田水利工程逐渐成为农业结构升级和现代化的关键,特别是通过灌溉技术的创新应用,为节约、高效利用水资源创造了有利条件。灌溉技术对农业发展非常重要,开发农业土地节水灌溉技术的项目可以为农业带来更多收益。我国自古农田面积就比较大,而且水资源比较充足,有了好的节水工程,我们就可以更好地发挥地区优势,为农业生产提供所需的水资源。我国面积也比较大,部分地方会受不同地理位置、气候的影响,存在降雨量稀少、干旱等问题,所以急需发展节水灌溉工程。

珠海市2015—2017年结核病耐药状况分析

目的了解珠海市2015―2017年结核病的耐药现状及特点,为制定和完善该市结核病防控策略提供依据。方法收集珠海市慢性病防治中心2015―2017年门诊肺结核患者样本,对培养阳性的755株结核菌菌株进行8种药物敏感性试验。结果 755例结核病患者中,产生耐药患者149例,总耐药率为19.74%,其中初治患者耐药率为17.27%(115/666),复治患者耐药率为38.20%(34/89),复治患者的耐药率高于初治患者(P<0.01)。单因素logistic回归分析结果显示,复治患者发生耐药的可能性是初治患者的2.96倍(OR=2.96,95%CI为1.85~4.75)。结论珠海市结核病耐药情况不容乐观,尤其是复治患者耐药情况较为严重,今后应加强对复治患者的监测与管理,根据药敏结果选择合适的治疗方案。