二甲双胍阻断乳腺癌细胞-间质细胞的交互作用:基于抑制肿瘤相关成纤维细胞缺氧诱导因子-1α的表达

目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(SDF-1)和白细胞介素-8(IL-8)等因子的表达变化以及Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用外源性SDF-1、IL-8干预后,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)shRNA或过表达质粒调节CAFs-HIF-1α的表达,以及AMPK-shRNA抑制AMPK的表达,并运用OG和2-OXO调节脯氨酸羟化酶的表达,及运用外源性TGF-β1干预后,Western blot及RT-qPCR检测CAFs中p-AMPK、HIF-1α、SDF-1、IL-8的表达,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果相较于对照组,Met干预组中CAFs的p-AMPK、SDF-1和IL-8的表达水平升高(P<0.05),HIF-1α表达水平下降(P<0.05),AMPK的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),Met组中乳腺癌细胞侵袭能力下降(P<0.05)。外源性SDF-1、IL-8干预可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用,增加乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05)。过表达HIF-1α及运用脯氨酸羟化酶抑制剂OG提高HIF-1α的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α、SDF-1及IL-8表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);运用HIF-1α-shRNA及运用脯氨酸羟化酶激活剂2-OXO抑制HIF-1α的表达后,降低乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05);运用AMPK-shRNA抑制p-AMPK的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);加入外源性TGF-β1后,可部分降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可部分降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论Met通过抑制CAFs-HIF-1α的表达进而发挥阻断乳腺癌细胞-间质细胞交互作用。

Caspase-3和Bcl-2在白血病细胞株凋亡过程中的表达及其与多药耐药的关系

目的研究Caspase-3在阿霉素(ADR)诱导的K562和K562/AO2细胞株凋亡过程中对Bcl-2蛋白表达的调控,探讨两者相互作用在白血病多药耐药中的分子机制。方法原位细胞凋亡检测法观察凋亡细胞的形态学改变;流式细胞仪测定凋亡率及Bcl-2蛋白的表达;酶显色活性分析法测定Caspase-3的活性。结果①K562细胞株的凋亡率对ADR呈时间、剂量依赖关系,K562/AO2细胞株则无此依赖关系。②未加Caspase-3抑制剂的K562细胞株Bcl-2阳性表达率和Caspase-3活性对ADR呈时间、剂量依赖关系;加入抑制剂的则无此关系,但作用48 h后Bcl-2阳性表达率下降,Caspase-3活性上升。无论加入Caspase-3抑制剂与否,K562/AO2细胞株的Caspase-3活性和Bcl-2阳性表达率均无变化。结论Caspase-3的变化能引起Bcl-2蛋白表达水平的变化,二者与凋亡关系密切,并在多药耐药中发挥重要作用。

帕米磷酸二钠治疗恶性肿瘤骨转移引起疼痛的临床研究

目的：观察帕米磷酸二钠（Ａｒｅｄｉａ阿可达）治疗骨转移引起疼痛的效果和不良反应。方法：对３１例确诊骨转移癌静脉滴注阿可达６０～９０ｍｇ，隔４周重复。结果：止痛显效１１例，有效１６例，无效４例，有效率８７．１％（２７／３１），７４．２％的患者在２周内获效，副作用为３例注药后出现发热３８～３９℃。结论：阿可达对骨转移引起的疼痛有良好的止痛效果。

进展期胃癌患者化学内分泌治疗的临床评价

目的 观察胃癌患者化学 内分泌治疗的效果。方法 检测了 95例胃癌组织的雌激素受体 (estrogenreceptor,ER )和孕酮受体 (progesteronereceptor,PgR) ,然后对 6 4例复发、转移的胃癌患者随机分为二组行化学治疗和化学 -内分泌治疗。结果 ER阳性率 34.38% ,PgR阳性率 16 .30 % ,对ER阳性患者 ,Tamoxifen EAP方案比单纯EAP方案更为有效 (P <0 .0 5 ) ,疗效与ER含量相关 (P <0 .0 5 )。结论 化学

三苯氧胺诱导乳腺癌细胞凋亡过程中ERα和SMRT的表达变化

目的:观察三苯氧胺(tamoxifen,TAM)作用前后乳腺癌细胞株T-47D和MDA-MB-231中雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)、共抑制因子SMRT的表达变化,寻找更佳的指导乳腺癌内分泌治疗指标。方法:采用四氮甲基唑蓝(MTT)观察乳腺癌细胞T-47D和MDA-MB-231的生存状况,以筛选最佳的药物作用浓度和时间。流式细胞仪法(FCM法)检测细胞凋亡。细胞免疫组化法及Western blot法观察TAM作用前后细胞中ER-α、SMRT的表达情况。结果:MTT法测得经0.10 mmol/L TAM作用48 h后T-47D和MDA-MB-231细胞增殖率下降,与对照组相比有显著性差异(P<0.05),特别对T-47D效果更强。FCM法检测两种细胞均出现低于G1期DNA含量的亚二倍体凋亡峰,与MDA-MB-231相比,T-47D细胞株凋亡率更高。细胞免疫组化法及Western blot法检测T-47D细胞,ERα、SMRT表达阳性,ERα阳性细胞比例减少,SMRT阳性细胞比例增多;MDA-MB-231细胞SMRT阴性,出现少量ER阳性及SMRT阳性细胞。结论:TAM可以通过诱导细胞凋亡途径抑制乳腺癌细胞增殖,对ERα阳性细胞T47D效果更为显著。

促凋亡蛋白Caspase-3与白血病细胞耐药的相关性

目的观察阿霉素(ADR)耐药的人慢性粒细胞白血病细胞株K562/AO2在ADR和雄黄作用下细胞活力、凋亡及加入Caspase-3抑制剂前后Caspase-3酶活性的变化,探讨促凋亡蛋白Caspase-3与白血病细胞耐药的关系。方法①四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定药物作用下细胞株的细胞活力(A值);②DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA断裂情况;③酶显色活性分析法(CAA)测定Caspase-3活性水平的变化。结果①MTT法:K562/AO2细胞的A值与雄黄呈时间、剂量依赖关系。②雄黄作用组有凋亡发生。③未加抑制剂组Caspase-3活性明显升高(P<0.05),对雄黄呈时间、剂量依赖关系,加入抑制剂后此关系消失,对ADR无此关系。结论Caspase-3酶活性水平的变化能显著影响药物诱导肿瘤细胞凋亡的能力,在肿瘤耐药的发生发展中起着重要的作用。

槲皮素诱导人白血病细胞K562的凋亡

目的：研究槲皮素对人白血病细胞株K562增殖抑制和诱导凋亡作用．方法：四氮甲唑蓝（MTT）观察细胞的生长状况，应用彗星分析法、TUNEL技术和流式细胞仪检测细胞凋亡．结果：槲皮素在（1～8）×10^-5、mol／L浓度范围内能明显抑制K562细胞的增殖，并具有时间和浓度依赖性，8×10^-5mol／L槲皮素作用72h的K562细胞株4值最低；彗星分析法显示经槲皮素作用的K562细胞出现长的彗尾条带；原位细胞凋亡可见细胞变小，核同缩为一个或多个染色质团块；流式细胞仪检测细胞凋亡主要发生在G1／S期．结论：槲皮素在体外一定浓度范围内能抑制K562细胞增殖，诱导凋亡．

雄黄诱导白血病细胞凋亡的研究

目的探讨雄黄对白血病细胞凋亡及Bc l-2表达水平的影响。方法以阿霉素作用组为阳性对照组,通过四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定药物作用下细胞株的细胞活力(OD值),采用原位细胞凋亡检测法(TUNEL)观察凋亡细胞的形态学改变,用流式细胞仪法(FCM)测定药物作用下细胞株Bc l-2蛋白阳性表达率的变化。结果与ADR相比,雄黄作用组OD值和Bc l-2阳性表达率更低(P<0.05),凋亡率更高(P<0.05)。结论雄黄诱导白血病细胞凋亡的效果较好,且Bc l-2蛋白表达水平的变化能显著改变药物诱导细胞凋亡的能力。

G4PAMAM/VEGFASODN抗乳腺癌血管生成的体外实验研究

目的:探讨G4PAMAM/VEGFASODN复合物体外对乳腺癌细胞MDA-MB-231VEGF、VEGF mRNA表达的影响及血管内皮细胞生长的抑制作用。方法:用透射电镜观测G4PAMAM/VEGFASODN的粒径,在不同的酸碱度下观察G4PAMAM/VEGFASODN的稳定性;将G4PAMAM/VEGFASODN进行体外转染,流式细胞仪测定其转染率,激光共聚焦检测转染阳性细胞,MTT法检测转染后细胞的存活率;免疫组化检测VEGF蛋白的表达,RT-PCR检测VEGFmRNA的表达,MTT法测定此复合物对血管内皮细胞生长的抑制作用。结果:G4PAMAM/VEGFASODN的直径约10nm,呈较均匀的网状排列;酸碱度在5到10的范围内具有较高的稳定性,不同电荷比的G4PAMAM/VEGFASODN均没有出现被解离的现象;48h时G4PAMAM/VEGFASODN组在1∶40的条件下转染率明显高于脂质体组;各组转染物均对细胞无明显毒性;VEGF蛋白在G4PAMAM/VEGFASODN转染后的MDA-MB-231细胞胞浆中的染色强度明显减弱,阳性表达率显著降低,VEGF mRNA的表达也受到有效的抑制。结论:G4PAMAM/VEGFASODN复合物稳定性好、转染率高,是一种有良好应用前景的新型纳米载体基因转移系统;G4PAMAM/VEGFASODN复合物能够高效特异地抑制目的基因VEGF的表达,为进一步进行体内动物实验提供了依据。

雌激素受体、雌激素受体mRNA在胃癌组织中的表达及其意义

目的 研究雌激素受体 (ER)、雌激素受体mRNA在胃癌中的表达 ,以探讨其与胃癌生物学特性的相关性。方法 采用免疫组化和原位杂交技术 ,观察ER、ERmRNA在胃癌组织的表达。结果 ①ER阳性率男性为 33.33% ,女性为 46.67% ;ERmRNA阳性率男性为 73.33% ,女性为 86.67% ;②ER阳性以低分化腺癌、印戒细胞癌多见 ;ERmRNA阳性在管状腺癌、低分化腺癌、印戒细胞癌均可见 ;③ER阳性与局部淋巴结转移、生长方式有关 ;④ERmRNA较ER有更高的阳性表达。结论 ERmRNA表达与胃癌生物学特性密切相关 ,可用于胃癌预后判定 。

Bcl-2参与的抗凋亡机制在白血病耐药中的作用

目的:肿瘤多药耐药(mu lti-drug resistance,MDR)是目前肿瘤研究的难点及热点领域.本研究以人慢性粒细胞白血病细胞株K562和阿霉素(ADR)耐药细胞株K562/AO2为研究对象,观察两细胞株在ADR作用下Bc l-2的表达水平,借此探讨其参与的抗凋亡机制在白血病多药耐药中的作用.方法:MTT法测定K562和K562/AO2在ADR作用后的细胞活力(A值);DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡情况;FCM法测定细胞凋亡率、细胞周期及Bc l-2蛋白的表达.结果:MTT法测得ADR作用的K562细胞存活数下降,1.00μmol/LADR作用48 h的K562细胞株A值最低,为0.803±0.032.DNA琼脂糖凝胶电泳及FCM法均显示ADR作用的K562细胞株有凋亡发生.FCM的结果表明,ADR作用的K562细胞株Bc l-2的阳性表达率低,1.00μmol/L ADR作用48 h的Bc l-2阳性表达率是(38.67±0.45)%.结论:耐药的主要机制是通过抑制细胞的凋亡途径完成,bcl2-是凋亡的主要调控基因,是一种耐药基因.

肿瘤基因治疗载体的研究现状和展望

随着对肿瘤发生发展分子机制认识的不断深入,肿瘤的基因治疗已成为攻克和治愈肿瘤最具希望和挑战的研究领域。如何建立安全有效的治疗基因导入系统成为研究者们首要解决的问题。目前,常用的载体主要有病毒载体和非病毒载体两类:病毒载体的转移效率高,在基础研究和临床试验中应用广泛,但近年来因存在安全性的问题,其使用受到了一定的制约;非病毒载体基因导入的效率相对较低,但具有安全性好且容易制备的特点,日益受到人们的重视。现就近年来国内外对于肿瘤基因治疗载体的研究现状及未来发展趋势作一综述。

Bcl-2反义核酸增强青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡

目的:研究bcl2反义核酸增强青蒿琥酯对人慢性粒细胞白血病K562细胞株诱导凋亡效应.方法:合成bcl2反义核酸(ASON)导入K562细胞,应用Westernblot法检测bcl2蛋白的表达,TUNEL技术、流式细胞仪法(FCM法)检测细胞凋亡.结果:bcl2反义核酸(ASON)能明显抑制bcl2蛋白的表达.青蒿琥酯在1～7mg/L浓度范围内能分别明显抑制K562细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性,7mg/L青蒿琥酯作用72h的K562细胞株A值最低.原位细胞凋亡检测可见细胞变小,核固缩为一个或多个染色质团块,与未经ASON转染的K562细胞株相比,经bcl2ASON转染的K562细胞株对青蒿琥酯的诱导凋亡作用更加明显;FCM法出现低于G1期DNA含量的亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡主要发生在G1/S期,与未经ASON转染的K562细胞株相比,经bcl2ASON转染的K562细胞凋亡率显著增加.结论:青蒿琥酯在体外一定浓度范围内可诱导K562细胞株凋亡,bcl2反义核酸可增强青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡的作用.

晚期胃癌化学——内分泌治疗的临床评价

我们测定了80例胃癌的ER及PgR,发现ER阳性率33.75%,在此基础上对复发,转移的54例胃癌随机分为二组,分别行单纯化疗和化学——内分泌治疗.结果显示;ER阳性胃癌EAP—TAM方案治疗有效率高于单纯EAP治疗(P<0.05),疗效与 ER含量正相关(P <0.05).因此可以认为:胃癌中存在ER。

肿瘤血管生成抑制剂的研究现状与展望

研究证实肿瘤生长、转移和复发过程中肿瘤血管生成均起着十分重要的作用,且其有效性已为大量研究所证实。2005年我国自主研发的世界第一个重组人血管内皮抑制素"恩度"在国内成功上市,这一治疗策略得以真正服务于临床。本文拟就目前肿瘤血管生成抑制剂的治疗的研究现状及未来发展作一综述。

胃癌患者血清性激素水平及组织性激素受体的测定

目的:探讨性激素及其受体与胃癌的关系。方法:应用双抗体放射免疫分析法(DARIA)测定了80例胃癌患者和76例健康人血清睾酮、雌二醇及孕酮水平,同时用酶联雌二醇(E_2-HRP)、酶联孕酮(Pg-HRP)亲和组化法在80例胃癌标本石蜡切片上行雌激素及孕酮受体检测,分析了ST、SE、SP与ER、PgR的关系。结果:胃癌患者ST、SE、SP明显低于正常人(P<0.05),特别在ER阳性,PgR阳性,ER和PgR阳性病人下降更为明显(P<0.05),男性病人以ST下降为主(P<0.05),女性病人以SE下降为主(P<0.05);ER阳性率33.8％,PgR阳性率16.3％,女性病人有较高的ER阳性率,尤以≤55岁组为著(P>0.05),不论男、女,ER阳性大体分型以Borrmann Ⅲ、Ⅳ型多见(P<0.05),组织学上多见于低分化(粘液)腺癌,印戒细胞癌(P<0.05),呈弥漫性生长的胃癌ER阳性率高于非弥漫性生长的胃癌(P<0.05),ER阳性率还与局部淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:ER和PgR存在于部分胃癌病人。胃癌可能是激素依赖性,它可能受激素因子的影响。

恶性肿瘤多药耐药的基础与临床研究

化学治疗在肿瘤综合治疗中的地位和作用日益重要,近年来,新的细胞毒性药物的发展使许多肿瘤治疗效果有了明显改观。尽管如此,肿瘤细胞对多种化疗药物产生交叉耐药性,仍是造成化疗失败的主要原因,90%以上的肿瘤患者死因或多或少都与耐药有关。研究肿瘤的多药耐药性及其临床逆转已成为肿瘤治疗亟待解决的问题,亦是目前肿瘤研究的难点及热点领域。现就近年来国内外肿瘤多药耐药的发生机制及临床逆转研究作一综述。

进展期胃癌根治性术后腹腔内化疗的疗效评价(英文)

目的观察全身化疗联用腹腔内化疗对II^III期胃癌患者的疗效是否优于单用全身化疗。方法2000年1月至12月,58例II^III期胃癌根治术后患者被随机分到不同治疗组(全身化疗联用腹腔内化疗作为研究组,单用全身化疗为对照组),并作随访观察。结果三年以后,研究组的复发率(17.2%)低于对照组(44.4%),而研究组的生存率(86.2%)明显高于对照组(59.3%),两组在复发率和生存率上均有明显的统计学差异(P<0.05),而两组的毒副反应无明显的统计学差异(P>0.05)。结论全身化疗联用腹腔内化疗对II^III期胃癌根治性术后患者的疗效优于单用全身化疗,而毒副反应并无明显增加。

互联网医院和线上医疗的模式探索

随着社会的发展和国家相关政策的发布,“互联网+医疗”作为一种新的医疗服务模式,将医院的管理模式推上了新的领域。本文结合笔者的实践经验,以互联网医院和线上医疗在西安交通大学第一附属医院长安区医院的应用情况为例,介绍基于“互联网+”技术开展互联网医院和线上医疗服务的应用概况。从患者、医生和管理运营者的角度分别阐述“互联网+医疗”对医院流程的优化,进一步分析开展互联网医院和线上医疗的特色及未来发展方向,为“互联网+医疗”相关的医院管理提供参考和建议。