流式细胞术用于鲍曼不动杆菌体外药敏试验的研究

目的探讨流式细胞术(FCM)方法快速检测鲍曼不动杆菌体外药敏试验的临床应用价值。方法选用碘化丙啶(PI)作为荧光染料,用FCM检测大肠埃希菌标准菌株和66株鲍曼不动杆菌临床菌株对舒氨西林、左氧氟沙星、美罗培南、头孢噻肟钠的敏感性。根据细菌培养物在不同浓度药物作用后所检测到的荧光强度来判断细菌存活率,从而推断MIC值。并与微量稀释法和VITEK仪检测结果进行比较。结果 66株鲍曼不动杆菌流式细胞荧光法抗菌药物敏感试验(FCST)结果测得舒氨西林耐药35株,左氧氟沙星耐药30株,美罗培南耐药13株,头孢噻肟钠耐药38株。采用χ2检验,分别比较与微量稀释法、VITEK仪检测判断的敏感性结果,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论鲍曼不动杆菌流式细胞荧光法药敏试验与常规方法检测结果具有一致性,并且更快速、灵敏、客观。

398例服用抗血小板药物患者血栓弹力图分析

目的分析服用抗血小板药物患者血栓弹力图(TEG)结果,为临床抗凝治疗提供参考。方法采用TEG@5000型凝血分析仪对398例服用抗血小板药物患者凝血全过程进行检测,其中≥65岁高龄患者259例,<65岁普通患者139例,分析二者检测结果的差异,总结其中38例高凝状态的3种常见情形。结果高龄患者较普通患者TEG主要数据检测水平差异有统计学意义(P<0.05)。TEG高凝状态有38例,均为高龄患者,其中酶动力型高凝状态23例(60.53%),血小板型高凝状态9例(23.68%),酶动力型和血小板型高凝状态6例(15.79%)。结论服用抗血小板药物的老年患者较普通患者高凝倾向更明显,出现高凝状态时,应正确分析原因,使用有针对性的药物,使临床抗凝治疗更安全,减少血栓的形成。

创伤弧菌溶细胞素细胞毒性机制的研究进展

创伤弧菌（Vibrio vulnificus）是一种有荚膜的革兰阴性嗜盐弧菌，存在于海水及海产品中。该菌主要引起原发性败血症和严重的创口感染。原发性败血症病人多发生低血容量性休克伴多脏器功能衰竭，病死率高。创伤弧菌感染的致病机制至今尚未完全阐明。动物实验发现该菌的毒力可能包含诸多因素，如胞外溶细胞素（WC）、金属蛋白酶（弹性蛋白分解酶）、荚膜多糖（CPS）等。VVC是由结构基因vvhA编码的一种相对分子质量（Mr）为50851的细胞外蛋白质，

多通道实时荧光定量PCR检测HPV DNA结果分析

目的探讨多通道实时荧光定量PCR检测HPVDNA的效果，并应用于日常检测工作。方法对临床1100例宫颈分泌物标本采用多通道实时荧光定量PCR仪进行8种高危HPVDNA分型及定量检测。8种高危HPV型别为主要高危型HPV16、18、45、31和次要高危型HPV33、52、58、67。结果在1100例标本中排除了14例B球蛋白为阴性的标本，剩余1086例标本总体的内标平均值为3．71×10^6IU／ml。随机重复性试验和对每个型别的各浓度标本进行的重复性试验每次扩增均为阳性，型别符合率为100％。共检测出阳性标本287例，HPV16、HPV18／45、HPV31、次要高危型和合并感染各有46、17、14、146和64例，分别占总阳性标本的16％、6％、5％、51％和22％。所有标本绝对定量值的分布近似于正态分布。结论多通道荧光定量PCR检测HPVDNA灵敏度高、复性好，可用于临床HPV感染的筛查与宫颈病变程度预测以及患者术后疗效观察。

不同年龄段女性人乳头瘤病毒感染状况分析

目的 了解不同年龄段女性人乳头瘤病毒（HPV）感染状况,为宫颈癌防治提供理论依据。方法 对临床3426例宫颈分泌物标本采用多通道实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）仪检测8种高危型HPVDNA亚型（HPV16、18、45、31、33、52、58、67）,分析不同年龄段受检者HPV感染状况。结果 3426例标本中共检出HPV阳性583例,阳性率为17.02%。HPV感染人群分布以19～40岁组为主,以19～30岁人群中感染率最高,达到20.37%,明显高于其余的年龄组（P〈0.05）。在检出类型中有单一亚型感染,也有多亚型的多重感染,其中比例最高的亚型是HPV33/52/58/67（59.01%）,明显高于其它HPV亚型（P〈0.05）;居第2位和第3位的分别为HPV16（14.92%）、HPV18/45（9.43%）。结论 19～30岁是女性感染HPV的高峰期,HPV感染有年轻化趋势,但中老年女性群体中HPV感染率依然居高不下。常见的HPV感染基因型为33/52/58/67、16和18/45,提示有一定人群特点。

PL-11血小板分析仪检测血小板计数及聚集功能的性能评价

目的：探讨PL-11血小板分析仪在检测血小板数量及聚集功能方面的性能。方法按照美国临床实验室标准化协会（ CLSI）制定的仪器性能验证标准及我国卫生行业标准 WS／T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》对PL-11血小板分析仪进行血小板计数及聚集功能的性能评价。采用PL-11血小板分析仪、LBY-NJ4血小板聚集仪及TEG-5000血栓弹力图仪检测健康人群血小板聚集率，分析各仪器检测结果间的相关性。结果 PL-11血小板分析仪的批内及日间精密度均＜1／3总误差（7％）；携带污染率为0．32％；在（4．12～1380．4）×109／L线性范围内回归方程斜率为1．03，R2＝0．993；血小板计数结果与血小板参考方法的结果符合率为84％，均符合行业标准要求。分别采用PL-11血小板分析仪、LBY-NJ4血小板聚集仪及TEG-5000血栓弹力图仪检测79例2型糖尿病患者单服用氯匹格雷前、后血小板聚集率，3种仪器之间差异均无统计学意义（ P＞0．05），患者服药前、后血小板聚集率差异有统计学意义（P＜0．01）。结论 PL-11血小板分析仪可为临床提供准确、可靠的血小板计数及聚集功能的检测结果。

以疾病为中心探索实验诊断学继续教育模式

目的在五年制临床实习生中实施以疾病为中心的实验诊断学继续教育,探索此种教学方法在医学继续教育模式中的成效。方法对实习生进行实验诊断学继续教育。(1)教学内容改革:以疾病为中心,突出病例分析,互动答疑来培养学生对各种实验项目实用性的理解,对结果的综合分析判断能力,明白实验结果的局限性及其各种影响因素。(2)教学方式改革:高学历高年资实验室人员采取多媒体教学,双语授课,学生进入临床实验室亲手体验操作等形式,将教学形象化,使学生对实验诊断学有直观认识,增加学生的学习兴趣。(3)教学评价:初次调查问卷了解实习生对实验诊断学的知识积累和认知。每次授课结束后了解授课效果。末次调查问卷比较以疾病为中心的实验诊断学继续教育实施与否对实习生的实验诊断学理论和实践的提高效果。结果通过问卷调查分析得出,以疾病为中心的实验诊断学教育方式可充分调动学生学习的主观能动性,初步培养医学生临床思维能力。结论以疾病为中心的实验诊断学继续教育方式是提高实验诊断学继续教育可行和有效的方法。

乙肝五项、HBV-DNA定量及乙肝前S1抗原联合检测用于诊断乙肝的临床价值分析

目的分析乙肝五项与病毒(HBV)前S1抗原及病毒DNA的相关性,并探讨联合检测对乙肝诊断的临床价值。方法选取本院门诊部和住院部2013年10月至2015年10月期间收治的患者作为研究对象,收集其HBsAg阳性血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其前S1抗原和乙肝五项,采用荧光定量PCR法检测其HBV-DNA水平,对比分析不同模式下前S1抗原的表达水平和HBV-DNA的水平,并分析其相关性。结果乙肝前S1抗原阳性率与HBV-DNA阳性率在不同HBV-M模式下比较,差异无统计学意义(P>0.05)。此外1+3+5+组中HBV-DNA阳性拷贝数较高,多数高于105copies/m L;而1+4+5+、1+2+、1+3+、1+4+和1+5+组的前S1+与前S1-组相比,其HBV-DNA阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。HBsAg阳性血清标本中前S1抗原在HBe Ag+组中阳性率明显高于HBe Ag-组,差异具有统计学意义(P<0.05),HBsAg阳性血清标本中前S1抗原与HBe Ag具有一定的相关性。HBsAg阳性血清标本中前S1抗原在HBV-DNA+组中阳性率明显高于在HBV-DNA-组,差异具有统计学意义(P<0.05),HBsAg阳性血清标本中前S1抗原与HBV-DNA具有一定的相关性。结论前S1抗原可较好反映乙肝病毒存在和复制的情况,将前S1与乙肝五项和HBV-DNA进行联合检测可较早发现较低水平病毒的感染,其可作为抗病毒疗效的评判指标,对乙肝的临床诊断和疗效评价均具有较好的应用价值。

骶管注药阻滞联合左旋氧氟沙星治疗慢性前列腺炎358例

目的探讨慢性前列腺炎的治疗方法及临床疗效。方法358例慢性前列腺炎患者,按照美国国立卫生研究所(NIH)制定的前列腺炎症评分标准(CPSI)和前列腺液(EPS)指标变化及细菌学检查结果评估疗效,应用骶管注药阻滞联合左旋氧氟沙星治疗。结果358例平均随访10.2个月,依据CPSI进行疗效判定,临床治愈180例、显效79例、有效73例、无效26例。结论CPSI是一种较好的疗效评价方法,骶管注药阻滞联合左旋氧氟沙星治疗慢性前列腺炎有较好疗效。

女性腺性膀胱炎36例疗效观察

目的:探讨女性腺性膀胱炎的诊治方法。方法:对36例女性腺性膀胱炎患者行经尿道膀胱粘膜电灼加颈口电切,膀胱药物灌注等治疗。结果:随诊6至48月,其中治愈29例,好转5例,复发2例。结论:经尿道膀胱粘膜电灼加颈口电切,膀胱药物灌注是女性腺性膀胱炎的有效治疗方法。

新形势下军民融合产业集群协同创新建设

对于我国而言,在当前国防科技工业领域实践中,借助于军民融合产业集群推动发展的作用范围更广,作用程度也更深,这对于我国国防科技创新能力的提升是非常关键的,更突出了国防科技工业领域中军民融合式发展的本质,对于新经济发展时期生产方式、战斗力生成模式的转变也有重要意义。作为军民融合国防科技创新的重要动力与依托,军民融合产业集群协同创新模式及其建设发展备受业内人士的关注与重视。本文即在分析军民溶液产业集群协同创新主体间关系的基础之上,对协同创新的主要模式进行概述,望引起重视。

流式细胞术测12项细胞因子性能验证及评价

目的对流式细胞术同时测12项细胞因子包括白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12P70、IL-17、干扰素α(IFN-α)、IFN-γ、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的性能进行验证及评价。方法参照WS/T492-2016《临床检验定量测定项目精度和正确度性能验证》、WS/T 402-2012《临床实验室检验项目参考区间的制定》,使用BD FACS CantoⅡ流式细胞仪对青岛瑞斯凯尔生物科技有限公司12项细胞因子检测试剂盒进行线性及范围、精密度、准确性、参考区间进行验证。结果IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12P70、IL-17、IFN-α、IFN-γ、TNF-α在BD CantoⅡ流式细胞仪上检测结果在2.44~10000 pg/mL范围内呈线性。最低检测限浓度2.44 pg/mL下能良好检出,变异系数符合要求;批内精密度和批间精密度变异系数均≤15%;准确性验证相对偏差均在±15%以内,参考区间可直接使用。结论12细胞因子检测试剂盒(多重微球流式免疫荧光发光法)在BD CantoⅡ流式细胞仪的线性及范围、最低检测限、精密度、准确性及参考范围通过验证,可以满足临床检测需求。

1例蓝氏贾第鞭毛虫感染的诊断

患者,男,40岁,上海市居民。2018年7月因“急性腹泻”就诊于同济大学附属杨浦医院急诊内科。患者自述水样便腹泻1 d。患者发病前1个月有巴拿马旅行史,无饮生水和食生肉史。血常规检查结果C反应蛋白升高(16.17 mg/L),其余指标正常,提示感染。患者粪样涂片镜检查见蓝氏贾第鞭毛虫包囊和滋养体。间接免疫荧光试验检测结果显示,蓝氏贾第鞭毛虫滋养体被患者血清(1∶50)识别,虫体表面有较强的荧光染色。提取患者粪样DNA,PCR扩增出147 bp的蓝氏贾第鞭毛虫特异性18S核糖体基因片段,该片段序列与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A(GenBank登录号:KY706490)的序列一致性为100%,在邻接法构建的系统进化树上与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A聚在同一分支上。结合患者临床表现和相关检查结果,诊断患者为蓝氏贾第鞭毛虫感染。临床给予患者甲硝唑(每日20 mg/kg,分3次口服,连服7 d)治疗。2周后复查血常规和粪便常规,均恢复正常,患者病情好转。

侵袭性非霍奇金淋巴瘤患者化疗后感染的临床免疫因素分析

目的：探讨侵袭性非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者化疗后感染的临床免疫影响因素。方法：选取2008—01—2013—12接受CHOP样方案化疗的98例侵袭性NHL患者，于化疗前检测T淋巴细胞亚群，NK细胞，免疫球蛋白（IgG，IgA，IgM）及补体（C3，C4），调查化疗后（31d内）感染情况。通过单因素与多因素分析了解化疗后感染与临床免疫因素等的关系。结果：98例患者中发生感染29例，占29．6％。感染部位主要为呼吸道，感染程度以CTCAE3级最多见，病原菌以革兰氏阴性菌为主。单因素分析显示，感染者化疗前CD4＋T细胞计数，CD8＋T细胞计数，以及IgM均显著小于未感染者[（0．24±0．14）×10^9／L,（0．44±0．21）×10^9／L，（0．29±0．20）×10^9／L：（0．43±0．20）×10^9／L，0．50g／L,0．70g／L，P〈0．05]。二元Logistic回归分析显示，化疗前CD4＋T细胞计数与化疗后感染有关（P=0．002，0R0．001，95％C10．000～0．060）。结论：化疗前CD4＋T细胞计数是侵袭性NHL患者化疗后感染的重要影响因素，CD4＋T细胞计数越低，化疗后感染风险越大。

创伤弧菌溶细胞素体外诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及其在细胞中的定位

目的了解创伤弧菌溶细胞素（Vibrio vulnificus cytolysin，VVC）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）凋亡作用及其机制。方法采用PCR扩增创伤弧菌GTC333株VVC编码基因whA，T—A克隆后测序并构建whA基因原核表达系统E．coli BL21DE3^pET-42a-vvhA。采用Ni—NTA亲和层析法提纯目的重组蛋白rVVC，SDS-PAGE联合Bio—Rad凝胶图像分析系统确定rVVC表达量及提取物纯度。采用溶血试验检测rVVC溶解兔红细胞的活性。2，4-二硝基苯肼比色法和四苯硼钠比色法分别测定rVVC作用的HUVEC培养物上清中乳酸脱氢酶（LDH）和K^＋含量。采用流式细胞术检测rVVC诱导HUVEC凋亡的作用。将FITC标记rVVC，采用激光共聚焦技术对HUVEC中的FITC标记rVVC进行定位。结果与GenBank中相关序列比较，所克隆的whA基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为96．09％和98．26％。1μg／ml的rVVC即可溶解兔红细胞（P〈0．01）。10μg／ml的rVVC可引起HUVEC培养物上清中K^＋含量明显增高（P〈0．01），但LDH含量无明显改变（P〉0．05）。1～100μg／ml的rVVC作用2h可使HUVEC凋亡。在FITC标记rVVC作用HUVEC5—240min内，rVVC逐渐从细胞膜表面向膜内侧和胞浆内移行，作用30min时多数rVVC进入细胞。结论rVVC具有溶细胞素活性。VVC可进入HUVEC，诱导细胞凋亡是其损伤HUVEC的主要机制。

科研院所在区域创新发展中的引领作用研究

在新常态下,创新驱动发展是我国经济社会发展的重要理念与战略,这不仅对于全国,而且对于一个区域,都是如此。一个区域的创新能力乃至经济社会发展水平很大程度上取决于其所拥有的创新要素的数量和质量。基于对新常态下科研院所与区域创新体系构建的基础上,本文对影响区域创新效率的要因进行了分析,提出了区域创新的路径选择和创新对策,将为区域创新体系的搭建和区域创新能力的提升提供参考。