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领导生命周期理论下高职课堂学习积极性的调动
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作者 赵晓瑜 《现代商贸工业》 2024年第7期151-152,共2页
高职课堂教学中存在学生生源多样、学习水平参差不齐等问题,学生上课看手机、玩游戏居多,以及教师理论课程授课人数偏多、学生对理论学习不感兴趣、学习积极性不高等特点。为了有效解决这些问题,本文从领导生命周期理论视角谈教师在授... 高职课堂教学中存在学生生源多样、学习水平参差不齐等问题,学生上课看手机、玩游戏居多,以及教师理论课程授课人数偏多、学生对理论学习不感兴趣、学习积极性不高等特点。为了有效解决这些问题,本文从领导生命周期理论视角谈教师在授课过程中对学生管理的具体策略。依据学生学习的意愿与完成工作任务的能力水平,将学生学习成熟度由低到高依次分为:学习成熟度1(低意愿,低能力),学习成熟度2(高意愿,低能力),学习成熟度3(低意愿,高能力),学习成熟度4(高意愿,高能力)。分别对应的管理策略为命令式、说服式、参与式和授权式。教师可以根据不同学生采用不同的领导策略进行管理,以保证课堂中每位学生都能够真正掌握教师所教授的各个知识点,提高对知识和技能的理解与应用能力,达到增进学生学习兴趣,激发其内在学习动力的目的。 展开更多
关键词 领导生命周期理论 高职学生 课堂学习
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IDD-YOLOv7:一种用于输电线路绝缘子多缺陷的轻量化检测方法
2
作者 翟永杰 赵晓瑜 +3 位作者 王璐瑶 王亚茹 宋晓轲 朱浩硕 《图学学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期90-101,共12页
YOLO目标检测算法是当前基于图像的输电线路绝缘子缺陷检测的主流方法,然而现有模型复杂度较大,亟需合理有效的参数压缩方法作为前提条件,来为解决无人机边缘设备部署的困境问题奠定基础;同时,无人机航拍的绝缘子缺陷图像背景复杂、缺... YOLO目标检测算法是当前基于图像的输电线路绝缘子缺陷检测的主流方法,然而现有模型复杂度较大,亟需合理有效的参数压缩方法作为前提条件,来为解决无人机边缘设备部署的困境问题奠定基础;同时,无人机航拍的绝缘子缺陷图像背景复杂、缺陷尺寸较小,容易出现误检、漏检等问题。为此,提出了一种用于输电线路绝缘子多缺陷检测的Insulator Defect Detection-YOLOv7(IDD-YOLOv7)模型,以降低模型复杂度,提高模型鲁棒性。首先,在多尺度特征融合的过程中加入坐标注意力(Coordinate Attention)机制,抑制复杂背景的干扰,提升模型对小目标的全局感知能力;之后,设计C3GhostNetV2模块,用于捕获不同空间像素之间的远程依赖性,在增强模型表达能力的同时降低模型的参数量和浮点运算量;最后,提出Focal-CIoU损失函数,提高模型高质量anchor的贡献,加快模型的收敛速度。实验结果表明,本文方法与基线模型相比mAP^(50)提升了3.8%,查准率和召回率分别提升了1.7%和7.6%,参数量和浮点运算量分别下降了18.3%和14.0%,绝缘子自爆、破损、闪络缺陷的AP^(50)分别提升了0.8%、4.5%、6.3%。 展开更多
关键词 YOLOv7 绝缘子缺陷检测 注意力机制 模型复杂度 轻量化 损失函数
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新-旧沥青混融行为机制分析及融合程度量化表征
3
作者 邱欣 陈舒琪 +4 位作者 项震宇 童晓勇 金钟声 赵晓瑜 吕会军 《浙江师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第2期133-142,共10页
为促进新沥青与老化沥青(新-旧沥青)的有效融合,提升再生沥青混合料的路用性能,从新-旧沥青混融行为理论解析、老化沥青转移特性、混融程度表征等方面,系统地回顾与梳理了混融过程的理论模型、影响要素、测试手段及评价方法.新-旧沥青... 为促进新沥青与老化沥青(新-旧沥青)的有效融合,提升再生沥青混合料的路用性能,从新-旧沥青混融行为理论解析、老化沥青转移特性、混融程度表征等方面,系统地回顾与梳理了混融过程的理论模型、影响要素、测试手段及评价方法.新-旧沥青混融行为理论方面,归纳了Fick定律、对流传质理论、分子动力学理论的分析原理、模型构建及应用实效;老化沥青转移特性方面,凝练了老化沥青在不同拌合条件下的转移特性及变化规律,阐明了间接评价老化沥青转移程度的分析方法;新-旧沥青混融程度量化表征方面,探讨了利用微宏观性能测试指标揭示混融扩散影响区域和扩散途径的适用性,阐述了基于不同测试方法对融合程度的量化表达过程.实践表明:形成完整的新-旧沥青混融行为理论体系,揭示混融扩散全过程的演化机制,构建混融程度的多尺度表征方法,有助于强化对新-旧沥青混融行为的理解与表达,为有效提升再生沥青混合料路用性能提供理论支撑和实践依据. 展开更多
关键词 新-旧沥青 混融行为 转移特性 融合效率 微宏观性能
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集束化护理对骨肿瘤患者术后生活质量及心理状态的影响 被引量:3
4
作者 吴仕强 王艳 +1 位作者 耿妍 赵晓瑜 《齐鲁护理杂志》 2023年第8期62-64,共3页
目的:探讨集束化护理对骨肿瘤患者术后生活质量及心理状态的影响。方法:纳入2020年6月1日~2022年3月1日就诊于山东省某三甲医院的骨肿瘤患者112例,随机分为对照组和观察组各56例;对照组给予患者常规护理方法,观察组给予患者集束化护理... 目的:探讨集束化护理对骨肿瘤患者术后生活质量及心理状态的影响。方法:纳入2020年6月1日~2022年3月1日就诊于山东省某三甲医院的骨肿瘤患者112例,随机分为对照组和观察组各56例;对照组给予患者常规护理方法,观察组给予患者集束化护理模式。分析比较两组并发症发生率、护理满意度、生活质量及心理状态。结果:护理后,观察组并发症发生率低于对照组(P<0.05),护理满意度高于对照组(P<0.01),焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)评分均低于对照组(P<0.05,P<0.01),生活质量各维度得分均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:集束化护理对骨肿瘤患者术后生活质量及心理状态具有积极改善作用。 展开更多
关键词 集束化护理 骨肿瘤 生活质量 心理状态 并发症 护理满意度
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基于建构主义的AR教学在骨科护生带教中的应用
5
作者 王瑞雪 付玲玲 赵晓瑜 《齐鲁护理杂志》 2023年第24期69-72,共4页
目的:探讨基于建构主义的增强现实(AR)教学模式在骨科临床护理实践教学中的应用效果。方法:选择2022年7月1日~2023年4月30日骨外科病房实习本科护生作为研究对象,其中单数月入科护生作为对照组(n=34),给予常规教学;双数月入科护生作为... 目的:探讨基于建构主义的增强现实(AR)教学模式在骨科临床护理实践教学中的应用效果。方法:选择2022年7月1日~2023年4月30日骨外科病房实习本科护生作为研究对象,其中单数月入科护生作为对照组(n=34),给予常规教学;双数月入科护生作为观察组(n=33),给予AR教学。观察两组护生理论、Nursing-Mini-CEX考核成绩和护生对教学模式的评价。结果:观察组护生理论、Nursing-Mini-CEX考核成绩和护生对教学模式的评价均高于对照组(P<0.01)。结论:基于建构主义的AR教学模式在骨科临床护理实践教学中可有效提升护生专科能力及整体教学质量。 展开更多
关键词 建构主义 AR 骨科 护理教育 实习护生
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一种体内溶栓活性优于总蚯蚓纤溶酶的组分 被引量:12
6
作者 赵晓瑜 刘泽民 +2 位作者 静天玉 武金霞 赵专友 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1068-1073,共6页
目的筛选高效低毒的蚯蚓纤溶酶单一组分。方法通过亲和色谱从赤子爱胜蚓获得含多组分的总蚯蚓纤溶酶(EFE),经离子交换分离得到3个主要溶栓组分EfP-0-2,EfP-I-1和EfP-I-2,与EFE比较体内外溶栓效果和毒副作用。结果与其他组分比较,EfP-I-... 目的筛选高效低毒的蚯蚓纤溶酶单一组分。方法通过亲和色谱从赤子爱胜蚓获得含多组分的总蚯蚓纤溶酶(EFE),经离子交换分离得到3个主要溶栓组分EfP-0-2,EfP-I-1和EfP-I-2,与EFE比较体内外溶栓效果和毒副作用。结果与其他组分比较,EfP-I-1的体外溶栓作用较强;当静脉注射4.5 mg.kg-1时,各组分对纤维蛋白原的影响均不明显,只有EfP-I-1能显著溶解动静脉旁路血栓;当静脉注射达6 mg.kg-1时,只有该组分对延长出血时间的影响不明显;急性毒性实验表明,该组分的LD50是EFE的2.17倍。结论EfP-I-1有较高的体内外溶栓活性和较低的毒副作用。由于该组分在总EFE中所占比例较高,并易于分离纯化,故适于作为单一组分的溶栓药物进行开发。 展开更多
关键词 蚯蚓(Eisenia fetida) 纤溶酶 溶栓 毒性
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蚯蚓纤溶酶在大肠杆菌中的克隆与表达 被引量:12
7
作者 赵晓瑜 静天玉 +2 位作者 王彦芳 王会文 李亚东 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 2002年第4期392-395,共4页
根据蚯蚓纤溶酶最佳组分的N -末端氨基酸序列设计简并引物 ,以蚯蚓cDNA为模板 ,获得该组分蛋白质的部分编码序列 (AF4 32 2 2 4 ,GenBank登陆号 ) .BLAST相似性分析表明 ,该序列与U 2 5 6 43和U2 5 6 48的部分序列相似性达 91% ,根据 5... 根据蚯蚓纤溶酶最佳组分的N -末端氨基酸序列设计简并引物 ,以蚯蚓cDNA为模板 ,获得该组分蛋白质的部分编码序列 (AF4 32 2 2 4 ,GenBank登陆号 ) .BLAST相似性分析表明 ,该序列与U 2 5 6 43和U2 5 6 48的部分序列相似性达 91% ,根据 5’和 3’末端保守序列设计引物 ,经PCR获得全长cDNA编码序列 .将该序列插入 pTBY - 11质粒 ,转化大肠杆菌 ,表达蛋白以包含体形式存在 . 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 分子克隆 基因表达 大肠杆菌 编码序列 基因克隆 表达载体
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蚯蚓纤溶酶组分的抗原性 被引量:13
8
作者 赵晓瑜 静天玉 +2 位作者 姜晓燕 段明星 郑昌学 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期209-212,共4页
以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基 ,通过亲和层析制备出的蚯蚓纤溶酶 (EFE)含有 11~ 13个组分 .为了了解这些组分的相互关系 ,用EFE免疫家兔获得了抗血清 .利用该抗血清与已纯化的 10个组分进行免疫双扩散 ,根据形成沉淀线的形状可以将上述... 以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基 ,通过亲和层析制备出的蚯蚓纤溶酶 (EFE)含有 11~ 13个组分 .为了了解这些组分的相互关系 ,用EFE免疫家兔获得了抗血清 .利用该抗血清与已纯化的 10个组分进行免疫双扩散 ,根据形成沉淀线的形状可以将上述 10个组分分为 4大组 .各组内组分之间的沉淀线完全融合 (免疫反应同一性 ) ;组间沉淀线交叉 (免疫反应非同一性 )或为支线 (免疫反应部分同一性 ) .这种按免疫学性质分组与根据分子量大小、氨基酸组成和N端氨基酸序列分组基本吻合 .上述结果为EFE的分类提供了依据 . 展开更多
关键词 蚯蚓 纤溶酶组分 抗原性 免疫反应同一性
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内蒙古河套灌区湖泊湿地生态环境需水量研究 被引量:18
9
作者 赵晓瑜 杨培岭 +1 位作者 任树梅 许廷武 《灌溉排水学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期126-129,共4页
采用生态功能法分别对河套灌区内大型湖泊湿地——乌梁素海和中小型湖泊湿地的生态环境需水量进行计算,并按照其生态系统的组成结构和功能划分需水等级。灌区湖泊湿地的最小和适宜生态环境需水量分别为6.44亿m3和10.12亿m3。
关键词 河套灌区 乌梁素海 湖泊湿地 生态环境需水量 生态功能法
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蚯蚓纤溶酶的成分分析 被引量:52
10
作者 赵晓瑜 静天玉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期407-411,共5页
蚯蚓纤溶酶(earthwormfibrinolyticenzymes,EFE)是从蚯蚓体内提取的一类纤维蛋白水解酶,是一种新的溶栓药.利用亲和层析技术,自蚯蚓匀浆液一步提取蚯蚓纤溶酶,并对该酶的成分进行了分析.实验表... 蚯蚓纤溶酶(earthwormfibrinolyticenzymes,EFE)是从蚯蚓体内提取的一类纤维蛋白水解酶,是一种新的溶栓药.利用亲和层析技术,自蚯蚓匀浆液一步提取蚯蚓纤溶酶,并对该酶的成分进行了分析.实验表明,蚯蚓纤溶酶是一组非均一的糖蛋白,含糖量为5%左右,以中性已糖为主;等电点(pI)在4.0以下;富含Asp,而Met、Trp和Lys含量很少;lmg蚯蚓纤溶酶相当于250~300尿激酶单位. 展开更多
关键词 蚯蚓 纤溶酶 成分分析 糖蛋白 亲和层析
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蚯蚓纤溶酶组分的分离纯化和分析 被引量:17
11
作者 赵晓瑜 静天玉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期218-221,共4页
通过以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基的亲和层析 ,从蚯蚓 (大平二号 ,即赤子爱胜蚓 )纯化出的纤溶酶是一组非均一的纤维蛋白水解酶 .经DEAE 纤维素离子交换和制备电泳进一步分离纯化 ,得到 12个单一组分 .这些组分的等电点 (pI)按照它们在... 通过以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基的亲和层析 ,从蚯蚓 (大平二号 ,即赤子爱胜蚓 )纯化出的纤溶酶是一组非均一的纤维蛋白水解酶 .经DEAE 纤维素离子交换和制备电泳进一步分离纯化 ,得到 12个单一组分 .这些组分的等电点 (pI)按照它们在聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)图谱上的顺序从 4 0开始依次降低 ;SDS PAGE证明 ,除3、 4外 ,其余组分均只含一种多肽链 ,分子质量在 2 2~ 34ku之间 ;用shiff试剂和酚 硫酸染色 ,显示 1、 2、 6 5和 7是糖蛋白 ,其中 7的糖含量最高 ;以BAEE、ChromozymUK和ChromozymPL为底物测定 ,7的纤溶酶活性最高 . 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 组分 分离 纯化 酶活
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蚯蚓纤溶酶新基因EfP-0的电子克隆及其编码区序列RT-PCR验证 被引量:6
12
作者 赵晓瑜 高珊 +1 位作者 崔大岺 耿风廷 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期897-901,共5页
利用生物信息学手段,以期获得蚯蚓纤溶酶F-Ⅰ-0组分的基因。根据从粉正蚓(Lumbricusrubellus)中分离的F-Ⅰ-0组分的N端氨基酸序列VVGGSDTTIGQYPHQL,利用DNAMAN软件通过电子克隆方法,从Lumbricidae的dbEST中获得该组分的核酸序列信息,设... 利用生物信息学手段,以期获得蚯蚓纤溶酶F-Ⅰ-0组分的基因。根据从粉正蚓(Lumbricusrubellus)中分离的F-Ⅰ-0组分的N端氨基酸序列VVGGSDTTIGQYPHQL,利用DNAMAN软件通过电子克隆方法,从Lumbricidae的dbEST中获得该组分的核酸序列信息,设计特异引物,经过RT-PCR,成功地从赤子爱胜蚓(Eiseniafoetida)中克隆到一条蚯蚓纤溶酶新基因,命名为EfP-0。EfP-0基因全长678bp,编码225个氨基酸的成熟肽,属丝氨酸蛋白酶,胰蛋白酶家族,与F-Ⅰ-0组分的氨基酸组成非常接近。BLAST证明,EfP-0与已报道的蚯蚓纤溶酶基因之间的相似性均低于40%,因此为蚯蚓纤溶酶中的一个新基因,GenBank登录号为DQ836917。构建的pMAL-c2x-EfP-0重组质粒,在大肠杆菌TB1中获得融合蛋白MBP-EfP-0的可溶性表达,表达产物有酪蛋白平板溶解活性。 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 电子克隆 Efp-0
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终止剂法测定胆红素氧化酶活性 被引量:5
13
作者 赵晓瑜 刘彬彬 +3 位作者 杨茂华 刘泽民 曾伟 崔大岭 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第5期520-523,共4页
以L-抗坏血酸(Vc)为终止剂改进的经典胆红素氧化酶(BOD)酶活测定方法.反应体系:0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液,含50 mmol/L甘露醇,pH 8.1,总体积3 mL,30μL胆红素贮存液,10μL酶液.25℃反应3 min,加入50μL 50 g/L的Vc,终止酶催化反应,440 n... 以L-抗坏血酸(Vc)为终止剂改进的经典胆红素氧化酶(BOD)酶活测定方法.反应体系:0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液,含50 mmol/L甘露醇,pH 8.1,总体积3 mL,30μL胆红素贮存液,10μL酶液.25℃反应3 min,加入50μL 50 g/L的Vc,终止酶催化反应,440 nm测定光吸收.同时加入空白对照组.终止剂法只需一般的分光光度计,操作方便,数据重复性更高,可以同时测定多个样品. 展开更多
关键词 胆红素氧化酶(BOD) 胆红素 终止剂(Vc)
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基于生态水位差比法的高海拔湿地生态环境需水量研究——以乌梁素海湿地为例 被引量:10
14
作者 赵晓瑜 杨培岭 +1 位作者 任树梅 张振林 《灌溉排水学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期59-65,共7页
【目的】估算高海拔湿地生态环境需水量。【方法】采用生态水位差比法对乌梁素海湿地生态环境需水量进行了计算,并对乌梁素海生态补水量进行了分析。【结果】乌梁素海湿地最小和适宜生态水位差比系数分别为0.786和1.231,最小和适宜生态... 【目的】估算高海拔湿地生态环境需水量。【方法】采用生态水位差比法对乌梁素海湿地生态环境需水量进行了计算,并对乌梁素海生态补水量进行了分析。【结果】乌梁素海湿地最小和适宜生态水位差比系数分别为0.786和1.231,最小和适宜生态环境需水总量分别为5.645亿m3和7.580亿m3;乌梁素海湿地生态补水量为4.68~6.85亿m3。【结论】新提出的生态水位差比法模型是对原生态水位法的改进,此模型更适合应用于高海拔湖泊湿地生态需水量计算,并且此模型可满足湿地净化污染物要求。当某湿地的水文和生态状况与乌梁素海湿地相似时,可用生态水位差比系数进行最小和适宜需水量估算。 展开更多
关键词 乌梁素海 生态水位差比法 生态环境需水量 生态补水量
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蚯蚓纤溶酶7#组分基因在甲醇酵母中的克隆与表达 被引量:5
15
作者 赵晓瑜 张冬 李亚东 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2005年第6期633-638,共6页
为了使蚯蚓纤溶酶(EFE)最佳活性组分EFE_7#基因在甲醇酵母(Pichiapastoris)中获得表达,构建了表达载体pPIC9K_EFE,通过对电击条件的优化,转化率达到5×103个/μgDNA.为了便于筛选阳性克隆,以该基因的原核表达产物为抗原免疫动物,获... 为了使蚯蚓纤溶酶(EFE)最佳活性组分EFE_7#基因在甲醇酵母(Pichiapastoris)中获得表达,构建了表达载体pPIC9K_EFE,通过对电击条件的优化,转化率达到5×103个/μgDNA.为了便于筛选阳性克隆,以该基因的原核表达产物为抗原免疫动物,获得了与天然EFE_7#组分具有相同免疫特异性的抗体.用该抗体为探针对上述转化子进行筛选,得到了上百株阳性重组子.RT_PCR和westernblotting证明,EFE_7#基因在这些重组子中获得了表达,表达产物相对分子质量高于天然产物. 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 甲醇酵母 表达 抗体 筛选
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蚯蚓抗菌肽40 kD Fetidin基因的原核表达与复性 被引量:4
16
作者 赵晓瑜 柳伟强 李晓霞 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2007年第4期395-400,406,共7页
40 kD的fetidin是存在于蚯蚓体腔液中的一种具有较好抗菌活性的蛋白.为了获得大量fe-tidin,从蚯蚓(Eisenia fetida)中调取fetidin的基因,分别克隆到pKW32和pMXB10中,构建了融合和非融合表达载体,并转化大肠杆菌进行诱导表达.结果无论是... 40 kD的fetidin是存在于蚯蚓体腔液中的一种具有较好抗菌活性的蛋白.为了获得大量fe-tidin,从蚯蚓(Eisenia fetida)中调取fetidin的基因,分别克隆到pKW32和pMXB10中,构建了融合和非融合表达载体,并转化大肠杆菌进行诱导表达.结果无论是融合还是非融合表达,产物均以包含体形式存在.融合表达产物通过亲和层析获得复性,复性产物对粘质沙雷氏菌具有抗菌活性. 展开更多
关键词 蚯蚓(Eisenia fetida) 抗菌肽 fetidin 基因 表达 包含体
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人工合成蚯蚓29肽的特性 被引量:3
17
作者 赵晓瑜 李国建 +1 位作者 倪志华 李晓霞 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2009年第1期76-80,84,共6页
为了解蚯蚓抗菌29肽的特性,采用菌落计数法对其抗菌谱、热稳定性、作用时间,以及最低抑制浓度等性质进行了研究.结果证实:该抗菌肽1)具有广谱性,即不仅有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等常见细菌,而且还能够抑制酿酒酵母、露湿漆斑菌... 为了解蚯蚓抗菌29肽的特性,采用菌落计数法对其抗菌谱、热稳定性、作用时间,以及最低抑制浓度等性质进行了研究.结果证实:该抗菌肽1)具有广谱性,即不仅有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等常见细菌,而且还能够抑制酿酒酵母、露湿漆斑菌、总状毛霉等真菌;2)活力高,当质量浓度为0.009 g/L时对大肠杆菌就有明显抑制效果;3)稳定性强,在pH为2.2或11的环境中抑菌活性不变,而且在煮沸10 min后仍能保留80%以上的活性. 展开更多
关键词 蚯蚓 抗菌肽 抗菌谱 最低抑菌质量浓度
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人La多肽融合蛋白在E.coli中的表达 被引量:2
18
作者 赵晓瑜 刘建荣 +3 位作者 静天玉 王会文 王彦芳 王锡民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期207-210,共4页
目的 构建在E .coli中表达人La多肽的质粒。方法以人脾cDNA为模板 ,通过PCR获得La多肽 (全长 )的DNA片段。将此片段利用双酶切定向克隆到MBP(麦芽糖结合蛋白 )融合系统的载体pMALTM c中 ,表达可溶性融合蛋白 ,并通过亲和层析予以纯化... 目的 构建在E .coli中表达人La多肽的质粒。方法以人脾cDNA为模板 ,通过PCR获得La多肽 (全长 )的DNA片段。将此片段利用双酶切定向克隆到MBP(麦芽糖结合蛋白 )融合系统的载体pMALTM c中 ,表达可溶性融合蛋白 ,并通过亲和层析予以纯化。结果免疫印迹实验 (IBT)证明 ,表达的融合蛋白具有La抗原多肽的特异性 ,而敏感性超过生化制备的ENA制品。 展开更多
关键词 La抗原 克隆 表达 融合蛋白 聚合酶链反应
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玉米Mn-SOD的分离纯化与性质分析 被引量:3
19
作者 赵晓瑜 宋小青 刘建荣 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2009年第3期324-328,共5页
利用金属螯合亲和层析,结合DEAE-纤维素离子交换层析,从玉米匀浆液中分离纯化到电泳纯的Mn-SOD组分.双向电泳和SDS-PAGE分析表明:玉米Mn-SOD的亚基分子质量为26.2 kD,等电点为5.3;热稳定性、酸碱稳定性高于玉米Cu/Zn-SOD.
关键词 玉米Mn-SOD 金属螯合亲和层析 纯化
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蚯蚓纤溶酶基因(Efp-Ⅰ)在大肠杆菌中的克隆、表达及活性分析 被引量:1
20
作者 赵晓瑜 李晓霞 +1 位作者 侯艳 静天玉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期452-456,共5页
从GenBank查询到的蚯蚓纤溶酶(earthworm fibrinolyti cenzyme,EFE)基因序列中,只有AY438624翻译的蛋白质序列与天然EfP-Ⅰ在N-端具有较高的相似性。根据该基因的5′与3′序列设计引物,通过RT-PCR从赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)获得一个... 从GenBank查询到的蚯蚓纤溶酶(earthworm fibrinolyti cenzyme,EFE)基因序列中,只有AY438624翻译的蛋白质序列与天然EfP-Ⅰ在N-端具有较高的相似性。根据该基因的5′与3′序列设计引物,通过RT-PCR从赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)获得一个完整的基因(GenBank,DQ418454)。序列分析证明,由该基因编码蛋白质的N-末端与天然EfP-Ⅰ的N-末端的氨基酸顺序完全相同。ScanProsite prediction programs分析显示,该基因与AY438624相似性极高,二者均属于胰蛋白酶家族;不同的是,该基因编码蛋白质的序列中含有N-糖苷键的结构域,所以DQ418454是EfP-Ⅰ中的一个新基因。在此基础上,构建了该基因的原核表达载体pMAL-c2X-Efp-Ⅰ,并进行了转化、诱导和表达。Western blotting证明,表达产物同时具有MBP和EfP-Ⅰ的抗原特异性,是MBP和EfP-Ⅰ的融合蛋白(MBP-EfP-Ⅰ)。经亲和层析分离纯化的MBP-EfP-Ⅰ,在酪蛋白平板和纤维蛋白平板上表现出明显的纤溶酶活性。 展开更多
关键词 赤子爱胜蚓 蚯蚓纤溶酶 基因克隆 融合表达 纤溶酶活性
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