目的研究miR-92a对血管平滑肌细胞增殖的影响,并探讨miR-92a在血管平滑肌细胞异常增殖相关的心血管疾病中的作用。方法采用实时定量PCR检测miR-92a和Phosphatase and tensin homolog(PTEN)mRNA的表达水平;用western blot检测PTEN蛋白水...目的研究miR-92a对血管平滑肌细胞增殖的影响,并探讨miR-92a在血管平滑肌细胞异常增殖相关的心血管疾病中的作用。方法采用实时定量PCR检测miR-92a和Phosphatase and tensin homolog(PTEN)mRNA的表达水平;用western blot检测PTEN蛋白水平;用CCK-8试验检测细胞增殖;利用Transwell迁移试验检测细胞迁移;miR-92a与PTEN的作用利用双萤光素酶试验检测。结果血小板衍生生长因子-bb(20ng/mL)能够促进血管平滑肌细胞的增殖(P<0.05),同时增加miR-92a的表达(P<0.05)。MiR-92a过表达可以促进血管平滑肌细胞的增殖以及迁移(P<0.05);而miR-92a的低表达则抑制血管平滑肌细胞的增殖以及迁移(P<0.05)。生物信息学预测PTEN为miR-92a的一个下游靶点;进一步的机理研究发现miR-92a通过与PTEN的3'非翻译区域结合从而来负向调控PTEN在血管平滑肌细胞中的表达(P<0.05)。PTEN的沉默抑制能够促进血管平滑肌细胞的增殖以及迁移(P<0.05)。结论本研究的结果提示miR-92a通过靶向抑制PTEN的表达从而来促进血管平滑肌细胞的增殖以及迁移。展开更多
文摘目的研究miR-92a对血管平滑肌细胞增殖的影响,并探讨miR-92a在血管平滑肌细胞异常增殖相关的心血管疾病中的作用。方法采用实时定量PCR检测miR-92a和Phosphatase and tensin homolog(PTEN)mRNA的表达水平;用western blot检测PTEN蛋白水平;用CCK-8试验检测细胞增殖;利用Transwell迁移试验检测细胞迁移;miR-92a与PTEN的作用利用双萤光素酶试验检测。结果血小板衍生生长因子-bb(20ng/mL)能够促进血管平滑肌细胞的增殖(P<0.05),同时增加miR-92a的表达(P<0.05)。MiR-92a过表达可以促进血管平滑肌细胞的增殖以及迁移(P<0.05);而miR-92a的低表达则抑制血管平滑肌细胞的增殖以及迁移(P<0.05)。生物信息学预测PTEN为miR-92a的一个下游靶点;进一步的机理研究发现miR-92a通过与PTEN的3'非翻译区域结合从而来负向调控PTEN在血管平滑肌细胞中的表达(P<0.05)。PTEN的沉默抑制能够促进血管平滑肌细胞的增殖以及迁移(P<0.05)。结论本研究的结果提示miR-92a通过靶向抑制PTEN的表达从而来促进血管平滑肌细胞的增殖以及迁移。