紫果西番莲愈伤组织诱导分化及不定芽增殖研究

以紫果西番莲离体培养的子叶为实验材料,对其愈伤组织进行诱导、分化及不定芽增殖。结果表明:在愈伤组织诱导中,以MS培养基+2,4-D 1.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L+琼脂3.8 g/L+蔗糖30 g/L的诱导效果最好,其诱导率为73.33%。在愈伤组织不定芽诱导中,以MS培养基+2,4-D 0.5 mg/L+TDZ 2.0 mg/L+琼脂3.8 g/L+蔗糖30 g/L的诱导率最佳,为46.67%。对不定芽继续进行增殖培养,以MS培养基+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖30 g/L最佳,增殖倍数为2.97。从而建立了西番莲植株再生体系,可进行优良材料的离体快繁。

紫果西番莲子叶再生植株体系的建立

建立高效稳定的紫果西番莲植株再生体系,可为其离体快繁、倍性育种及基因工程等提供前期基础,因此以紫果西番莲的子叶为材料,基于组织培养以直接和间接的方式诱导紫果西番莲器官发生,并对得到的不定芽进行增殖、生根、炼苗移栽。结果显示:由子叶诱导得到的愈伤组织在1 mg/L 2,4-D+1 mg/L TDZ的MS培养基中通过间接器官发生途径诱导出不定芽,分化率为66.7%;子叶在1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA的MS培养基中能通过直接器官发生途径分化出不定芽,分化率为83.3%;最适合不定芽生根的配方为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA+0.2 g/L碳粉,生根率达83.3%;将生根苗于室内炼苗15 d后移栽,其中以红土︰腐殖土︰珍珠岩=1︰2︰1的基质配比效果最好,成活率为93.3%。根据研究结果建立紫果西番莲不定芽发生的2种途径,进一步完善了紫果西番莲的植株再生体系,可为紫果西番莲的优质种苗快繁、种质创新、遗传转化等相关研究提供技术支撑。

紫果西番莲根尖染色体制片技术研究

[目的]染色体作为特定遗传信息的载体,是研究细胞遗传学工作的基础,通过研究紫果西番莲根尖染色体的制片技术,可为今后其染色体倍性鉴定和核型分析等工作提供技术支撑。[方法]以紫果西番莲的组培苗和田间植株的根尖为研究材料,采用常规压片法比较了不同取材时间和取材来源、预处理液和预处理时间、解离时间和温度以及染色时间等条件对紫果西番莲根尖染色体制片效果的影响。[结果]在上午10:00~11:00取紫果西番莲组培生根苗植株根尖,室温下用0.1%秋水仙素溶液与0.002 mol·L^(-1)8-羟基喹啉等体积混合液预处理3 h,卡诺固定液固定10 min,1 mol·L^(-1)盐酸60℃下解离25 min,卡宝品红溶液染色10 min所得到的制片效果最佳。[结论]本研究获得了良好的紫果西番莲根尖染色体制片体系,以期为西番莲细胞遗传学研究的深入开展提供一定的理论基础。