加氏乳杆菌的降脂活性研究

目的:探究加氏乳杆菌是否具有降脂活性,并验证其对HepG2细胞脂质堆积和高脂血症小鼠脂质代谢活性的影响。方法:利用油酸诱导建立HepG2细胞脂质堆积模型,通过多次油红O染色定量对166株加氏乳杆菌进行降脂活性筛选,选择活性最强的一株菌通过Bodipy染色、甘油三酯含量测定进行验证。利用C57BL/6J小鼠喂食高脂饲料建立高脂血症小鼠模型,灌胃加氏乳杆菌,每周测定小鼠的体质量,4周后测定其脂肪组织质量,并检测血清和肝脏组织中脂质水平。结果:61株加氏乳杆菌能够使脂质积累降低10%以上,占比36.75%,其中加氏乳杆菌BDUP活性最强。体外结果显示,与模型组NC相比,BDUP能够显著抑制HepG2细胞脂质堆积,降低TG含量。在体内实验中,与模型组相比,BDUP可以降低高脂血症小鼠体质量、脂肪质量及血脂、肝脂水平,其降脂功效优于标准菌株ATCC 33323。结论:36.75%的加氏乳杆菌具有稳定的调节脂代谢作用,其中菌株BDUP降脂活性最强,能够降低HepG2细胞脂质堆积,改善高脂血症小鼠脂质异常,表现出良好的体外和体内的降脂功效。

DNA提取过程中混入的实验室空气微生物DNA定量

元基因组测序方法为微生物研究提供了有力的工具。但其中的DNA提取过程,会不可避免地混入实验室中的空气微生物。这些微生物DNA,是否会对一些极微量的元基因组检测(如皮肤样本等)结果造成影响,有多大影响,仍没有明确结论。本研究首先收集了实验室空气样品,用16S rRNA引物建立了基于qPCR的标准曲线,并检测了在开放环境下提取DNA过程中可掺杂的环境微生物DNA量。然后在开放环境下提取纯水DNA样品并进行元基因组分析,以确定掺杂环境微生物的种类。最后分别在生物安全柜和实验室开放环境下提取皮肤样本,并用鸟枪测序方法对样本的微生物组成进行分析,以评估掺杂环境微生物对元基因组检测结果的影响。结果显示,在实验室开放环境的DNA提取过程中,环境微生物的DNA残留可达28.9 pg,可达某些极微量样本DNA总量的30%。元基因组分析显示,样品中掺杂的环境微生物主要是痤疮杆菌Cutibacterium acnes、大肠杆菌Escherichia coli等皮肤常见细菌。与洁净皮肤样本的信息相比,开放环境下提取掺杂了数十种环境微生物,并导致主要菌种的丰度大幅降低,从而影响结果的真实性。因此,微量样品的DNA提取应在洁净环境下执行。