九龙藏黄牛和九龙牦牛β-酪蛋白基因型分析

为比较九龙藏黄牛和九龙牦牛β-酪蛋白(β-CN)的遗传变异体,试验采用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了九龙藏黄牛(n=42)和九龙牦牛(n=17)β-CN的基因型。结果表明,在九龙藏黄牛、九龙牦牛的β-CN中共检测到4种等位基因,包括A1、A2、B、C,其中在九龙藏黄牛中有7种基因型:A1A1、A1A2、BB、A1B、A2B、A1C、BC,优势等位基因为A1(频率0.7024),优势基因型为A1A1(频率0.5476);在九龙牦牛样本中有2种基因型:A1A2、A2A2,优势等位基因为A2(频率0.7647)。试验表明,九龙藏黄牛与九龙牦牛β-CN均表现出多态性,但优势等位基因明显不同。

DNA甲基转移酶1基因的克隆测序及其在牦牛和犏牛睾丸组织中的表达

为了研究牦牛DNA甲基化转移酶1(DNA Methyltransferase 1,DNMT1)基因,并比较其在牦牛、犏牛睾丸组织中的mRNA水平,试验以成年麦洼牦牛睾丸组织cDNA为模板,利用RT-PCR扩增DNMT1基因,通过连接、转化等过程克隆出牦牛DNMT1基因CDS序列;并对其编码的蛋白质进行生物信息学分析、蛋白质相互作用网络预测分析;采用实时荧光定量PCR方法检测在牦牛(n=10)、犏牛(n=10)睾丸组织中DNMT1 mRNA的相对表达量。结果表明:牦牛DNMT1基因CDS全长为4836 bp,编码1610个氨基酸;牦牛DNMT1基因CDS序列与多胃反刍动物的同源性较高(>96%)。牦牛DNMT1蛋白分子质量为182.7 ku,无跨膜结构,无信号肽,为带正电荷的亲水性非分泌蛋白;DNMT1蛋白的二级结构主要由无规则卷曲和α-螺旋构成;STRING相互作用网络显示其与DNMT3A、DNMT3B、组蛋白H3蛋白共表达;在犏牛睾丸组织中DNMT1 mRNA的表达极显著低于牦牛(P<0.01)。说明DNMT1基因可能会影响犏牛雄性不育。