黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及机制研究进展

缺血性卒中(cerebral ischemic stroke, CIS)又称脑梗死(cerebral infarction, CI)是由于脑动脉血流供应障碍导致局部脑组织缺血、缺氧性损伤及梗死,从而出现相应的神经功能缺损症状,其病理生理机制复杂,涉及能量供应不足、线粒体损伤、兴奋性氨基酸毒性、炎症反应、氧化应激和自噬等,最终导致细胞坏死或凋亡[1-2]。因此,即使能够在时间窗内行静脉溶栓、动脉取栓等再灌注治疗使缺血脑组织快速恢复血液供应。

小鼠诺如病毒巢式PCR检测方法的建立及应用

为了建立一种高敏感性和特异性的检测方法,突破目前小鼠诺如病毒(MNV)检测局限,根据MNV保守区基因组序列设计合成内、外2对引物,通过PCR反应条件的优化,建立MNV的巢式PCR检测方法。结果表明,该方法仅能特异的扩增MNV目的基因而不能扩增其他病毒,且敏感度达到500个拷贝,比普通PCR提高1000倍。说明本研究建立的巢式PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速的用于小鼠诺如病毒的病原检测。

小鼠诺如病毒分子生物学研究进展

本文对小鼠诺如病毒的分子生物学及复制的研究进展做了比较系统的综述,为小鼠诺如病毒的病原学研究及感染的防控提供参考。

黄芪甲苷通过锌离子抑制内质网应激发挥PC12细胞神经保护作用

目的探讨黄芪甲苷是否通过锌离子(Zn^(2+))调控线粒体相关内质网膜(MAMs)发挥神经保护作用,并阐明可能的机制。方法常规培养PC12细胞并分为7组。对照组:细胞常规培养;2-DG组:用50μmol/L 2-DG处理30 min;黄芪甲苷+2-DG组:用50μmol/L黄芪甲苷处理20 min后再用50μmol/L 2-DG处理30 min;黄芪甲苷组:用50μmol/L黄芪甲苷处理20 min;TPEN+黄芪甲苷+2-DG组:用10μmol/L TPEN处理10 min后再用50μmol/L黄芪甲苷处理20 min,接着用50μmol/L 2-DG处理30 min;TPEN组:10μmol/L TPEN处理10 min;TPEN+2-DG组:用10μmol/L TPEN处理10 min后再用50μmol/L 2-DG处理30 min。通过Western blotting实验检测葡萄糖调节蛋白(GRP)78、GRP94、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-8、B细胞受体相关蛋白31(Bap31)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达,采用Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡水平,采用免疫荧光法检测Fis1蛋白的表达,采用线粒体荧光探针TMRE检测线粒体通透性转移孔(mPTP)开放情况。结果(1)与对照组相比,2-DG组GRP78、GRP94、Caspase-8、Bap31、Fis1蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显增加;与2-DG组相比,黄芪甲苷+2-DG组上述5种蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显降低;与黄芪甲苷+2-DG组相比,TPEN+黄芪甲苷+2-DG组上述5种蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显增强;差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照组相比,2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强;与2-DG组相比,黄芪甲苷+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显减弱;与黄芪甲苷+2-DG组相比,TPEN+黄芪甲苷+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强;与对照组相比,TPEN+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强;差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)与对照组相比,2-DG组TMRE荧光强度明显减弱;与2-DG组相比,黄芪甲苷+2-DG组TMRE荧光强度明显增强;与黄芪甲苷+2-DG组相比,TPEN+黄芪甲苷+2-DG组TMRE荧光强度明显减弱;与对照组相比,TPEN+2-DG组TMRE荧光强度明显减弱;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪甲苷能够通过Zn2+抑制内质网应激诱导的PC12细胞凋亡,阻止mPTP开放发挥神经保护作用,其作用机制可能与Fis1、Bap31表达有关。