境外EPC项目投标阶段风险分析及报价策略

EPC合同模式是国际上较为流行的工程总承包模式,目前境外水运项目大多采用这种合同模式。在EPC模式下,总承包商的工程承包范围大、工程投标时的不确定性明显增加。由于EPC总承包合同是固定总价和固定工期的合同,并且招标人在招标文件中偏向于将合同范围内可能产生的绝大多数风险转移给投标人。所以,在投标阶段分析和研究项目可能存在的风险因素并体现在报价中是投标阶段潜在投标人应当给与充分重视的重要内容。本文结合水运工程的特点,以孟加拉国EPC投标实例为基础,分析投标阶段可能存在的风险因素并提出报价时可采用的策略。

混合堤结构在航道整治工程中的应用

文章结合长江南京以下深水航道建设一期工程潮汐径流河段的特点,针对新型的齿形及半圆型整治建筑物在工程中的首次应用,结合对开展的物模波浪断面试验成果的分析,建立了新型齿形构件波浪力的计算方法;提出了对半圆型混合堤的波浪力计算以T*和d/H进行划分,可采用不同计算方法的建议;文中还采用波浪在水流作用下变形的计算方法考虑了浪、流对混合堤结构的联合作用。

唐汉钧教授治疗慢性骨髓炎经验

唐汉钧教授治疗慢性骨徙炎，重视健脾益气利湿、活血化瘀、补肾填精壮骨之法，采用内服、外用结合治疗本病，收到了较好的临床疗效。

威海金线顶护岸工程施工方案及造价分析

大开挖换填方式是护岸软基处理的常见方法。设计人员在常规设计的基础上本着更为经济环保的原则,设计了挤密砂桩方案和淤泥固化桩方案,从可行性、施工方法、造价等方面进行了比选和研究。

港口软土复合地基处理方案优选

本文通过对某港口复合地基处理典型方案的论证与优选,对比多种工法的优点与缺点,着重说明适用的地基处理方案与要素,并对其经济性作出对比。可为同类工程设计提供借鉴。

组织芯片技术检测SIRT6蛋白在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨NAD依赖性蛋白脱乙酰基酶sirtuin-6(SIRT6)蛋白在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌患者临床病理参数之间的关系,阐明SIRT6蛋白在结肠癌发生发展中的作用。方法:选取术前均未行放化疗的100例结肠癌患者的结肠癌组织和癌旁组织,采用组织芯片技术和免疫组织化学SP法检测结肠癌组织和癌旁组织中SIRT6蛋白表达水平,采用秩和检验分析SIRT6蛋白表达水平与结肠癌患者临床病理参数的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线、单因素和多因素生存分析法分析结肠癌患者临床病理参数与预后的关系。结果: SIRT6蛋白在结肠癌组织细胞核和胞浆中的表达水平均明显高于癌旁组织(Z=-4.603,P=0.000;Z=-7.610,P=0.000)。Kaplan-Meier单因素和多因素分析,细胞核中SIRT6蛋白高表达的结肠癌患者预后更好且是其独立预后影响因子(HR=2.345,P=0.003),年龄较小及T、N分期较低的患者生存率更高(HR=0.394,P=0.004;HR=2.301,P=0.012;HR=2.423,P=0.048),细胞浆中SIRT6蛋白高表达与结肠癌患者预后无关联性(HR=1.309,P=0.333)。结论: SIRT6蛋白在结肠癌细胞核中高表达可作为结肠癌预后良好的评价指标。

BAG3蛋白Ser187磷酸化位点定点突变促进FRO细胞迁移和侵袭

Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(Bcl-2 associated athanogene 3,BAG3)是BAG家族的重要成员,调节肿瘤细胞的黏附、迁移和侵袭,促进恶性肿瘤的复发和转移。我们的前期工作证明,PKCδ可催化BAG3的Ser187位点磷酸化。本文研究BAG3蛋白磷酸化修饰对甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭的影响及其可能机制。通过定点突变的方法,将BAG3蛋白的187位丝氨酸突变为天冬氨酸(S187D)模拟磷酸化,或者将丝氨酸突变为丙氨酸(S187A)抵抗磷酸化,从而间接推测BAG3蛋白Ser187位点磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭的影响。FRO细胞转染野生型BAG3、模拟磷酸化型BAG3、阻碍磷酸化型BAG3,通过划痕愈合实验和Transwell转移小室实验,观察BAG3蛋白磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭的影响。进一步通过PKC激活剂和抑制剂,研究BAG3蛋白磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭影响的机制。结果显示,FRO BAG3-S187D模拟磷酸化组细胞在培养24 h、48 h时,划痕愈合率分别达到35%和80%。Transwell及三维Matrigel转移小室实验显示,平均每个视野穿膜细胞数分别达到180和350个,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。PKC激活剂TPA及抑制剂Rottelerin处理FRO WT-BAG3细胞,24 h愈合率分别为40%和15%,48 h划痕愈合率分别为55%和18%,Transwell穿膜细胞数分别为240和70个,与对照组细胞相比,差异显著(P<0.05)。本研究提示,BAG3蛋白Ser187磷酸化修饰,可促进甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭,其机制可能与PKC信号通路有关。

沉默CENP-N基因表达对胃癌细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的探究着丝粒蛋白-N(CENP-N)对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,并分析其可能机制。方法利用基因表达谱交互式分析网站(GEPIA)中的癌症基因组图谱(TCGA)数据分析CENP-N基因在503例胃癌组织和125例癌旁组织中的表达水平;以收集的143例胃癌患者癌组织、癌旁组织以及人胃癌细胞株SNU-1、HS-746T、AGS、MGC-803及人胃黏膜细胞GES1为研究对象,qRT-PCR法检测CENP-N mRNA水平,Western blot检测CENP-N蛋白表达;体外培养胃癌SNU-1细胞株,分为空白对照组、siRNA-NC组(阴性对照组)、CENP-N-siRNA组(沉默CENP-N表达组)、通路激活剂组(CENP-N-siRNA+740Y-P组)。qRT-PCR法检测CENP-N mRNA水平;CCK-8法、流式细胞仪分别检测细胞增殖、凋亡情况;免疫印迹法检测细胞增殖相关核抗原(PCNA)、凋亡蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]及磷脂肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路相关蛋白表达情况。结果利用GEPIA网站发现CENP-N mRNA在胃癌组织、癌旁组织中的表达分别为4.25±0.36、1.45±0.21,差异有统计学意义(P<0.05);与癌旁组织比较,胃癌组织中CENP-N mRNA及蛋白的表达水平显著升高(P<0.05);与GES1细胞比较,CENP-N mRNA在胃癌SNU-1、HS-746T、AGS、MGC-803细胞中的表达水平显著升高,且CENP-N mRNA在SNU-1细胞中的表达水平最高,因此,选择SNU-1细胞进行后续实验研究。细胞成功转染;与空白对照组、siRNA-NC组比较,CENP-N-siRNA组SNU-1细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),PCNA、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR表达显著降低(P<0.05);与CENP-N-siRNA组比较,通路激活剂组SNU-1细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05),PCNA、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR表达显著升高(P<0.05)。结论沉默CENP-N表达可抑制胃癌细胞增殖并诱导凋亡,可能是通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路实现的。

“助推”与“锚定”:基于PPM模型的视频用户付费行为转移研究

本文以视频平台用户付费行为转移为研究对象,基于对25位典型用户的深度访谈,运用NVIVO 12.0软件,经过开放式编码、主轴编码、选择性编码等方式探寻转移行为触发机制的影响因素,并对应建立“行为转移研究”通用的PPM模型。研究发现,用户付费行为转移除基本的内容与版权因素的影响之外,“感知价值”与“社会关系”成为影响付费行为转移的重要情境条件。本文的创新之处在于:首先,对“付费行为”这一粗略的概括做了启动付费、持续付费、终止付费三个节点上的细分;其次,对两个重要情境条件的发生方式进行了行为经济学视角的分析,并给出平台运营的干预建议。