CT灌注成像定量参数与非小细胞肺癌患者VEGF、PCNA因子水平相关性分析

目的探讨CT灌注成像定量参数与非小细胞肺癌(NSCLC)患者血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)水平相关性。方法选取确诊的80例NSCLC患者作为NSCLC组,另选确诊为肺部良性病变的80例患者作为对照组,两组均实施CT灌注成像检测及血清VEGF、PCNA水平检测,对比组间CT灌注成像定量参数:血流量(BF)、血容量(BV)、VEGF、PCNA水平差异,采用Pearson相关性分析评估NSCLC患者BF、BV与VEGF、PCNA水平的相关性。结果NSCLC组CT灌注定量参数BF值和BV值均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);NSCLC组VEGF、PCNA水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,NSCLC患者BF与VEGF、PCNA水平呈现正相关性(r=0.2445,P<0.0001)、(r=0.1719,P=0.0001),BV与VEGF、PCNA水平呈现正相关性(r=0.4195,P<0.0001)、(r=0.4241,P<0.0001);BV和BF对NSCLC的诊断曲线下面积(Area under the curve,AUC)分别为0.8080(95%CI=0.7407-0.8752,P<0.0001)和0.7788(95%CI=0.7050-0.8525,P<0.0001);VEGF和PCNA对NSCLC的诊断AUC分别为0.5109(95%CI=0.4190-0.6028,P=0.8112)和0.6013(95%CI=0.5126-0.6899,P=0.0270)。结论NSCLC组CT灌注定量参数、VEGF和PCNA水平与对照组比较,差异有统计学意义(P>0.05),且NSCLC组CT灌注定量参数与VEGF、PCNA明显相关,BV、BF和PCNA对NSCLC具有一定的诊断效能。

宫颈永生化细胞和癌细胞的α、β、γ–微管蛋白比较分析

目的:探讨中心体α、β、γ–微管蛋白在人鳞状上皮宫颈永生化细胞(H8细胞株)和癌细胞(Caski细胞株)的表达差异及其在宫颈癌发生发展过程中的作用。方法:采用免疫细胞化学SP法检测中心体α、β–微管蛋白在人宫颈永生化细胞和癌细胞中的表达差异,提取两株细胞的骨架蛋白并用Western blotting对α、β、γ–微管蛋白的表达水平进行半定量分析。结果:Caski细胞中α、β–微管蛋白表达水平高于H8细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。半定量分析α、β、γ–微管蛋白,Caski细胞中的表达量高于H8细胞。结论:中心体异常可能是宫颈癌细胞恶性表型的特征之一,以中心体微管蛋白为治疗靶点的研究有着可期待的前景。

CD147与基质金属蛋白酶-2,3,9在卵巢癌中的表达及临床病理意义

目的:检测CD147和基质金属蛋白酶(MMP)-2,3,9在卵巢癌中的表达,了解其与卵巢癌临床病理特征之间的关系,探讨卵巢癌中CD147与MMP-2、MMP-3和MMP-9表达的相关性。方法:用免疫组化SP法对40例卵巢癌组织,9例良性卵巢上皮性肿瘤组织中CD147和MMP-2、MMP-3、MMP-9的表达情况进行检测。结果:CD147和MMP-2、MMP-3及MMP-9在卵巢癌中的阳性表达率分别为92.5%,100%,100%和95%,阳性表达与病理分级和临床分期有关(P<0.05),与组织学类型无关,与临床预后无显著相关(P>0.05)。在卵巢癌中,CD147与MMP-2、MMP-3和MMP-9多同时表达,呈现出显著正相关,相关系数分别为0.802,0.786,0.914(P<0.001)。结论:卵巢癌组织中CD147、MMP-2、MMP-3及MMP-9的表达与的临床分期及病理分级有关。MMP-2、MMP-3和MMP-9的分泌增加可能与CD147的诱导促进作用有关系。

二烯丙基硫醚对大鼠脑缺血再灌注损伤后Nrf2、NQO1表达的影响

目的探讨二烯丙基硫醚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后Nrf2、NQO1表达的影响。方法实验动物随机分为假手术组、缺血再灌注组、200mg/kg二烯丙基硫醚预处理组。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2h再灌注24h后进行神经行为学评分,测定脑梗死体积及脑组织中SOD、MDA活性,采用免疫荧光和Western Blot测定Nrf2、NQO1蛋白分子的表达。结果与缺血再灌注组相比,大鼠经二烯丙基硫醚预处理后神经损害症状减轻,脑梗死体积缩小,SOD活性增强,同时MDA活性受到抑制,Nrf2、NQO1蛋白分子表达上调。结论二烯丙基硫醚对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的神经保护作用,可能与其增强大鼠脑组织抗氧化酶活性和激活Nrf2/NQO1通路有关。

电刷镀法制备钢基体超疏水表面的实验研究

采用复合电刷镀技术,在Q235钢表面制备了具有超疏水性能的n-SiO2/Ni纳米复合镀层,在优选的工艺参数下,获得了接触角为169.8°、滚动角为2.3°的超疏水表面。研究了刷镀电压和刷镀时间对镀层表面结构和疏水性的影响规律;分析了复合镀层表面和截面的结构形貌特点;研究了电刷移动速度对复合镀层中n-SiO2含量的影响规律。对镀层的接触角、表面粗糙度和显微硬度进行了表征。结果表明:刷镀电压和刷镀时间是影响复合镀层表面微观结构特征的重要因素;复合镀层表面的微纳米双重结构对表面的超疏水性起到了关键的作用。

共刺激分子PD-L1、PD-L2和B7-H4在人子宫颈癌的表达及意义

目的：研究共刺激分子程序性死亡配体1（Programmed death ligand 1,PD-L1）、程序性死亡配体2（Programmeddeath ligand 2,PD-L2）和B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学PV-6000法检测PD-L1、PD-L2和B7-H4在10例正常人宫颈组织、10例高级别CIN（CINⅡ~Ⅲ级）和67例子宫颈癌中的表达,并分析3种共刺激分子的表达与子宫颈患者临床病理特征的相关性。结果：正常人宫颈组织上皮不表达PD-L1和B7-H4,而基底层细胞微弱表达PD-L2;CINⅡ~Ⅲ的瘤变宫颈上皮微弱表达PD-L1、PD-L2和B7-H4;子宫颈癌细胞表达PD-L1、PD-L2和B7-H4的阳性率分别为70%（47/67）、51%（34/67）和46%（31/67）。统计学分析显示宫颈癌细胞PD-L1的表达与癌细胞浸润深度明显相关（P〈0.01）,与年龄、组织学类型无关;PD-L2的表达与肿瘤的淋巴结转移（P〈0.05）有关;B7-H4的表达与肿瘤的淋巴结转移（P〈0.05）和局部血管内瘤栓形成（P〈0.05）相关。结论：人子宫颈癌细胞异常表达PD-L1、PD-L2和B7-H4,且与肿瘤浸润和转移密切相关。PD-L1、PD-L2和B7-H4可能成为子宫颈癌免疫治疗的潜在靶点。

敲低小胶质细胞中过氧还原素6(PRDX6)降低氧糖剥夺再复氧神经元的存活

目的观察敲低小胶质细胞中过氧还原素6(PRDX6)对氧糖剥夺再复氧(OGD/R)神经元存活的影响。方法小胶质细胞采用PRDX6-siRNA慢病毒感染,同时培养基中加入非Ca2+依赖性磷脂酶A2(i PLA2)活性抑制剂MJ33,24 h后与原代神经元共培养,并进行OGD/R处理。实验分为正常组、OGD/R组、阴性对照siRNA处理的OGD/R组、PRDX6-siRNA处理的OGD/R组、PRDX6-siRNA联合MJ33处理的OGD/R组。Western blot法检测小胶质细胞PRDX6蛋白的表达,实时定量PCR检测小胶质细胞PRDX6 mRNA的表达。ELISA检测i PLA2活性;MTS、乳酸脱氢酶(LDH)法检测神经元的存活率;采用比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量以反映神经元的氧化应激水平。结果与OGD/R组比较,PRDX6-siRNA处理的神经元存活率降低,MDA增加、SOD降低、氧化应激损伤加重;与PRDX6-siRNA组比较,同时加入i PLA2活性抑制剂MJ33组神经元存活率增加,MDA降低、SOD增加、氧化应激水平下降。结论小胶质细胞PRDX6对神经元氧糖剥夺损伤有保护作用,而i PLA2活性对PRDX6的作用有影响。

卵巢子宫内膜样腺癌:组织学起源分析和性激素受体状态检测

目的 :探讨子宫内膜异位症 (异位症 )与卵巢上皮性癌 (卵巢癌 )的关系 ,以及雌、孕激素受体、雌激素调节蛋白pS2在卵巢宫内膜样癌组织中的表达及相关性。方法 :对 6 3例卵巢宫内膜样腺癌组织中合并内膜异位症的情况在光镜下进行回顾性观察分析 ,并用免疫组化对 6 3例病变组织作ER、PR和pS2标记。结果 :6 3例卵巢子宫内膜样癌合并异位症者 8例 ,有 1例可直接观察到良性异位灶由非典型增生逐渐向宫内膜样腺癌过渡的形态。宫内膜腺癌合并有粘液腺癌者 3例 ,浆液腺癌者2例。瘤组织中ER、PR和 pS2阳性表达率分别为 38.1% (2 4 / 6 3)、4 6 .2 % (2 6 / 6 3)和 2 5 .4 % (16 / 6 3)。ER和 pS2蛋白阳性表达呈正相关 (P <0 .0 1)。结论 :卵巢宫内膜样癌主要来自卵巢生发上皮向子宫内膜方向分化 ,少数病例来自于异位症病灶恶变。激素与部分肿瘤的发生、发展有关。对肿瘤组织行ER、PR、pS2检测 ,有助于指导对该肿瘤的激素治疗。

阴道平滑肌瘤26例临床病理分析

目的 :探讨阴道平滑肌瘤的临床、病理特点、组织学起源及生长影响因素。方法 :分析 2 6例阴道平滑肌瘤的临床资料和病理组织学特点 ,免疫组织化学染色检测肿瘤的组织中平滑肌肌动蛋白 (SMA)、S 10 0蛋白、CD34、雌激素受体 (ER)和表皮生长因子受体 (EGFR)的表达及状态。结果 :阴道平滑肌瘤患者年龄 30～ 5 2岁 ,平均 4 4 .5岁 ,常为单发 ,临床症状与肿瘤的大小及部位有关 ,形态学与子宫平滑肌瘤相似 ,免疫组化标记所有 2 6例肿瘤SMA强阳性表达 ,S 10 0蛋白、CD34全为阴性表达。ER和EGFR阳性表达率分别为 38.5 % (10 / 2 6 )和34.6 % (9/ 2 6 ) ,且ER与EGFR表达呈明显正相关 (四格表确切概率法 ,P =0 .0 0 2 3,r =0 .75 )。有效治疗方法为阴道平滑肌瘤切除术。肿瘤偶有复发、出现交界性病变甚至恶变。结论 :阴道平滑肌瘤为临床少见的良性肿瘤 ,可能起自于阴道组织中间叶干细胞向平滑肌分化 ,雌激素和表皮生长因子与肿瘤的发生发展可能有关。

Sulfiredoxin-1对大鼠星形胶质细胞缺血损伤的保护作用

目的探讨小分子蛋白Sulfiredoxin-1(Srxn1)对大鼠星形胶质细胞缺血损伤的保护作用以及Srxn1是否参与活化NF-κB炎症信号通路的分子机制。方法通过H2O2处理、氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation followed by recovery,OGD/R)模型,模拟体内脑缺血再灌注损伤;通过慢病毒载体片段Lenti-Srxn1-sh1和Lenti-Srxn1-sh2干扰Srxn1的表达,采用MTT法检测两种损伤模型中细胞的存活率,采用双荧光免疫细胞化学法检测NF-κB入核情况,Western blot检测p-NFκB p65、MIF的蛋白表达。结果在H2O2和OGD/R模型中,两组慢病毒干扰片段均可以降低Srxn1蛋白的表达。与Control组比较,干扰Srxn1基因能够明显降低细胞存活率,增加NF-κB p65入核,使p-NFκB p65和巨噬细胞游走抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)蛋白表达显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Srxn1作为体内重要的神经保护因子,可以减少大鼠星形胶质细胞缺血性损伤的作用机制之一可能是与其激活NF-κB信号通路相关。

宫颈腺癌p53、HPV16/18-E6蛋白和ER的表达及其临床意义

目的 探讨宫颈腺癌组织中 p5 3蛋白、HPV16 / 18 E6蛋白及ER的表达及其临床意义。 方法 采用免疫组织化学S P法对 6 3例宫颈腺癌组织进行p5 3蛋白、HPV16 / 18 E6蛋白及ER检测。结果 6 3例宫颈腺癌中p5 3、HPV16 / 18 E6蛋白和ER阳性表达率分别为为 5 2 .3%、31.7%和 4 9.2 %。p5 3表达与肿瘤病理分级、临床分期 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期 )有关。HPV16 / 18 E6、ER的表达与宫颈腺癌的病理学分级、临床分期无关 ,但与 p5 3表达呈负相关 (P <0 .0 1) ,HPV16 / 18 E6、ER在宫颈腺癌中的表达呈正相关 (P <0 .0 1)。结论 随宫颈腺癌组织病理分级和临床分期增高p5 3阳性表达率逐渐增高 ,可能与 p5 3突变有关 ,部分宫颈腺癌的发病可能与HPV16 / 18 E6蛋白过度表达有关。部分宫颈腺癌可能属于激素依赖性 ,雌激素可能有协同HPV致癌的作用。

接合物蛋白Crk和CrkL在上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的探讨接合物蛋白Crk和CrkL在上皮性卵巢癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法,观察Crk和CrkL蛋白在上皮性卵巢癌不同临床病理指标内的表达,并与卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织进行比较。结果上皮性卵巢癌中Crk和CrkL蛋白的表达与卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织比较差异有统计学意义(P<0.05)。不同分化程度、临床分期的上皮性卵巢癌Crk蛋白的表达间差异有统计学意义(P<0.05)。不同分化程度、临床分期的上皮性卵巢癌CrkL蛋白的表达情况间差异无统计学意义(P>0.05)。不同组织病理类型的上皮性卵巢癌Crk和CrkL蛋白的表达间差异无统计学意义(P>0.05)。结论Crk和CrkL蛋白可能在上皮性卵巢癌的发生、发展中发挥某种作用,与CrkL蛋白相比,Crk蛋白的过度表达可能更直接影响着卵巢癌浸润、转移等恶性生物学行为。

姜黄素对人宫颈癌细胞株Hela细胞抑制及凋亡的影响

目的 :探讨姜黄素 (curcumin)对人宫颈癌细胞株Hela细胞体外增殖及凋亡的调控作用。方法 :选用人宫颈癌Hela细胞进行体外培养 ,以 5～ 5 0 μmol/L的姜黄素分别处理Hela细胞 2 4～ 72h后 ,MTT法检测细胞增殖 ,流式细胞仪 (FCM )检测凋亡 ,透射电镜进行形态学观察。SABC免疫组化法检测细胞内Bcl- 2、BcI -XL、Caspase - 3蛋白表达水平。结果 :curcumin对Hela细胞增殖有抑制作用。并呈剂量依赖性。DNA直方图上可见亚“G1”峰 ;透射电镜观察见部分细胞发生凋亡形态学改变。Bcl- 2、Bcl-XL表达均下调 ,Caspase - 3表达增强。 结论 :姜黄素对人宫颈癌Hela细胞的增殖具有明显抑制作用。上调Cas pase - 3,下调Bcl- 2、Bcl-XL蛋白的表达 ,诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。

钙视网膜蛋白在先天性巨结肠病理诊断中的应用

目的研究钙视网膜蛋白(calretinin,CR)免疫组织化学染色及胆碱酯酶染色(acetylcholinesterase staining,AchE)在先天性巨结肠(hirschsprung disease,HD)病理诊断中的作用对比,并探讨在直肠黏膜活检标本不足时CR的诊断作用。方法采用回顾性研究的方法对比163例直肠黏膜活检CR免疫组织化学染色与AchE染色诊断HD准确性及敏感性。研究26例只含有1个黏膜下神经丛的直肠黏膜活检标本中,CR免疫组织化学染色辅助病理诊断的准确率。结果在年龄<3个月的病例组中,CR免疫组织化学染色敏感度显著高于AchE染色。CR免疫组织化学染色能够准确诊断21例只含有1个黏膜下神经丛的直肠黏膜活检HD病例。结论 CR免疫组织化学染色是一种优于AchE染色的直肠黏膜活检诊断HD的必要辅助方法。

MCM5和Ki67在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中表达及意义

目的探讨微小染色体维持蛋白-5（minichromosome maintenance-5,MCM5）和Ki67在宫颈上皮内瘤变（cer-vical intraepithelial neoplasia,CIN）及宫颈癌组织中的表达及临床病理意义。方法采用免疫组化技术（S-P法）检测MCM5和Ki67在99例宫颈CIN和宫颈癌中的表达。结果MCM5和Ki67在正常宫颈黏膜上皮、CINⅠ-Ⅱ级、CINⅢ级、浸润癌表达的阳性率分别为26.7%、72.0%、80.0%、97.9%和10.0%、32.4%、84.0%、97.9%。各级CIN与浸润癌相比MCM5的表达率差异具有显著性（P〈0.05）;在CINⅢ级和宫颈癌中MCM5的表达与Ki67表达呈正相关（r=0.687,0.936,P〈0.05）。MCM5和Ki67表达率与临床分期及病理分级有关（P〈0.05）。结论MCM5和Ki67可作为反映宫颈上皮增生病变程度及生物学行为的指标,对宫颈非浸润性病变与浸润性病变的诊断及鉴别有参考价值。

PLC热备冗余的研究与设计

PLC热备冗余可以提高系统的可靠性,在长期不间断运行的控制场合中广泛应用。该文介绍热备冗余原理,分析PLC热备冗余的关键技术,给出PLC热备冗余的具体设计方案,为冗余PLC研究和产品选型提供参考。

宫颈永生化细胞和癌细胞的胞质蛋白双向电泳图谱的建立及初步分析

目的:建立HPV-16阳性的宫颈上皮永生化细胞(H8细胞株)和宫颈癌细胞(CaSKi细胞株)胞质蛋白双向电泳图谱,并初步分析找出特征性的差异蛋白点。方法:分别培养H8和CaSki细胞,用亚细胞结构蛋白质提取试剂盒提取胞质蛋白进行双向电泳,用ImageMaster 2D V2002.1图像分析软件分析电泳图谱,筛选差异蛋白点。结果:获得了分辨率和重复性均较好的宫颈永生化细胞和癌细胞胞质蛋白2-DE图谱,并分析找出了显著的差异蛋白点8个,其中3种蛋白质在宫颈癌细胞株表达上调,1种蛋白质表达明显下调,2种蛋白质在宫颈癌细胞株表达缺失,2种蛋白质在永生化细胞株表达缺失。结论:应用亚细胞蛋白双向凝胶电泳技术对HPV-16阳性的宫颈癌前和癌变的胞质蛋白分析,能有效找出蛋白质表达差异点,为进一步确定宫颈癌前病变和癌细胞的关键性差异蛋白质的结构和功能奠定了基础。

外阴Bowen样丘疹病15例临床病理分析

目的 探讨Bowen样丘疹病的临床病理特征、鉴别诊断及病因。方法 对 15例Bowen样丘疹病进行临床和病理分析并随访。采用多重引物PCR检测 12例Bowen样丘疹病上皮组织中HPVDNA ,用免疫组化S P法检测 15例HPV抗原及p5 3蛋白。 结果 15例Bowen样丘疹病患者全为女性 ,年龄 2 1～ 4 0岁 (平均 2 9 5岁 )。病变外观为色素性扁平丘疹 ,组织学与Bowen病相似 ,但异型性较小。 12例病变组织HPV6、11、16、18型病毒基因检测均为阴性 ,对照组检测阳性。广谱HPV抗原检测阳性 2例 (2 / 15 ) ,p5 3蛋白阳性 2例 (2 / 15 )。结论 Bowen样丘疹病的诊断应该结合典型临床特征 ,该病属良性病变 ,但伴有重度非典型增生病例可视为癌前病变 ,发病与HPV感染的关系尚待肯定。

特发性膜性肾病患者血清抗PLA2R抗体表达研究

目的分析特发性膜性肾病患者血清抗 PLA2R抗体的表达，探讨其在特发性膜性肾病诊断及病情评估中的价值。方法收集经肾活检确诊的118例肾小球疾病患者，其中包括97例 IMN和21例 IgA肾病与19例健康体检者作为研究对象，应用 ELISA法检测血清抗 M型磷脂酶 A2受体（PLA2R）抗体表达水平，并分析其与 IMN患者血清清蛋白，24 h尿蛋白量等指标的相关性。结果 IMN组，IgA肾病组及健康体检组血清抗 PLA2R抗体含量中位数分别为45.2（3.6～705.9）RU／ml，5.9（2.3～10.6）RU／ml和1.2（0.6～9.3）RU／ml，IMN组血清抗PLA2R抗体含量高于 IgA肾病组及健康体检组，差异有统计学意义（t＝－5.027，－3.077；P均＜0.05）；97例 IMN患者中76例血清抗PLA2R抗体阳性，阳性率为78.35％，IgA肾病组与健康体检组均未检出阳性样本。IMN组患者血清抗PLA2R抗体与血清清蛋白呈负相关（r＝－0.453，P＜0.05）；与肌酐、胆固醇、红细胞沉降率、24 h尿蛋白呈正相关（r＝0.233，0.234，0.363，0.586；P 均＜0.05）。结论血清抗PLA2R抗体可作为 IMN特异性标志物用于 IMN的血清学诊断，并对评估 IMN患者病情的严重程度有重要参考意义。