缺锌抑制体外培养大鼠成骨细胞的增殖及分化

为了研究缺锌对体外培养大鼠成骨细胞增殖和分化的影响，从大鼠颅骨分离出成骨细胞，并于ＤＭＥＭ培养基中进行传代培养。锌特异性络合剂ＴＰＥＮ络合掉培养基中的锌建立细胞体外培养的缺锌模型。采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法确定成骨细胞在不同时点ＤＮＡ的合成状况，同时应用流式细胞仪进行细胞周期的分析；采用组织学方法观察细胞骨架的变化、３Ｈ－脯氨酸掺入法确定胶原蛋白的合成；采用酶动力学和放免方法分别测定碱性磷酸酶活性和骨钙素含量。结果表明，缺锌组成骨细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入量在各个时点明显低于对照组，细胞被阻滞于细胞周期中Ｇ２／Ｍ期，这与细胞骨架受损密切相关。缺锌组胶原蛋白合成、骨钙素含量及碱性磷酸酶活性明显低于对照组。但缺锌补锌组的各个指标与对照组相比无统计学差异。因此，缺锌能够抑制体外培养大鼠成骨细胞的增殖和分化。

从药品技术审评的角度看GLP实施的必要性

临床前安全性研究的不规范性会影响药品的科学评价。GLP有利于增进药品技术审评的科学化与规范化,而药品技术审评有助于促进GLP的实施与完善。二者应协调发展、与时俱进,相得益彰,提高我国的新药研发水平,促进医药产业的发展,保障人民健康。

重组人纽兰格林对正常恒河猴心脏的影响

探索重组人纽兰格林对健康成年恒河猴心脏的作用。将10只健康成年实验恒河猴随机分为实验组及对照组,分别注射等量重组人纽兰格林及生理盐水,采用超声心动图对用药前、用药即刻60 s内及用药10 d后相关指标进行测量,比较两组之间及不同时间之间各指标的差异。结果表明:重组人纽兰格林对健康实验恒河猴的舒张末期左室内径及容积、收缩末期左室容积、每搏量有影响,且随着用药时间的延长4者均增大,而重组人纽兰格林对健康恒河猴的左室射血分数及短轴缩短率没有显著影响。本研究认为重组人纽兰格林对健康成年恒河猴左心室容积有影响,而对心肌收缩力无显著影响。

实验恒河猴10只心脏血流动力学及左室收缩功能的初步测定

目的建立健康成年实验恒河猴心脏血流动力学指标及左室收缩功能正常基础参考值。方法分别采用脉冲多普勒及M型超声Teichholtz公式对10只健康成年实验恒河猴(雌性4只,雄性6只)进行心脏血液动力学指标及左室收缩功能指标测量,并比较雌雄组间各参数的差异。结果健康成年实验恒河猴心脏血液动力学及左室收缩功能指标均类似于人类新生儿,雌、雄组间比较各指标间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论正常恒河猴心脏血液动力学及左室收缩功能测值可作为相关生理参数的基础正常值。

金属硫蛋白在大鼠成骨细胞对高锌和低锌耐受中的作用

实验旨在研究金属硫蛋白 (MT)在大鼠成骨细胞对高锌和锌缺乏的耐受中的作用。采用反义 MT寡核苷酸造成大鼠成骨细胞 MT低表达 ,采用银 /血红素饱和法测定细胞 MT含量 ,以受损细胞所释放乳酸脱氢酶的活性表示细胞毒性。结果显示 :反义 MT寡核苷酸显著降低成骨细胞对高剂量锌以及锌缺乏的耐受性 ,使细胞毒性增加 ,表明 MT在维系成骨细胞锌稳态以及对抗高剂量锌和锌缺乏的毒性中具有重要调节作用。

实验恒河猴超声心动图的初步研究

分别采用二维、脉冲多普勒及M型超声心动图Teichholtz公式对1 0只健康成年实验恒河猴(Macacamulatta)的心脏结构、心脏血流动力学及左室收缩功能进行测定,并比较不同性别间各参数的差异,以建立正常健康成年恒河猴超声心动图相关生理学参数的基础正常值。结果表明,健康成年实验恒河猴超声心动图各项生理指标类似于人类新生儿的指标,雌、雄组间比较除室间隔舒张末期厚度有统计学差异外(P <0 0 5 ) ,其余指标均无统计学差异(P >0 0 5 )。

前列腺素E_1对肺心病急性发作期血气及心衰的疗效

目的：探讨前列腺素E1对肺心病急性发作期血气的影响及心衰的疗效。将60例病人随机分为两组：治疗组32例，在常规疗法的基础上加用前列腺素E1（PGE1）；对照组28例，采用常规疗法。结果：治疗组PaO2、SaO2明显提高，PaCo2明显下降，较对照组有显著差异（P＜0．05）。对心衰治疗组总总有效率和显效率分别为93．7％和62．5％，对照组分别为71．4％和28．6％，两组间比较有显著或非常显著的差异（P＜0．05～0．01）；另外，治疗组心功能级数能明显降低。结论：PGE1能改善肺心病急性发作期血气，对心功能有较好的疗效。

二磷酸氯喹对K562细胞增殖与凋亡的影响

本研究探讨二磷酸氯喹对K562细胞增殖与凋亡的影响及其可能的作用机制。用细胞增殖试验(MTT法)检测不同浓度二磷酸氯喹对K562细胞的增殖抑制作用;应用细胞形态学检查、流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡;以罗丹明123(Rhodam ine 123)为细胞染色剂,采用流式细胞术检测不同浓度二磷酸氯喹处理后K562细胞线粒体膜电位(ΔΨm)的变化。结果表明:用不同浓度二磷酸氯喹(1.5625、3.125、6.25、12.5、25、50、100μmol/L)分别作用于K562细胞24、48和72小时后,细胞生长活力明显降低,具有剂量依赖性;典型的细胞形态学改变、亚G1峰的测出、梯形条带的显现共同证实了二磷酸氯喹能诱导K562白血病细胞凋亡;Rhodam ine 123染色显示二磷酸氯喹处理的K562细胞线粒体膜电位强度下降。结论:二磷酸氯喹对K562细胞有生长抑制、诱导凋亡作用,其作用可能与细胞线粒体膜电位(ΔΨm)下降有关。

2-芳基(烷基)-苯并咪唑-1-乙酰腙衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

在2-取代苯并咪唑环上引入酰腙基团,合成了一系列含有苯并咪唑环的酰腙衍生物(c1-18),采用IR,1H NMR和MS对其结构进行了表征,采用MTT法对目标物抑制4种癌细胞增殖活性进行了测试。其中N-(2,4-二羟基苯亚甲基)-2-[2-(2,4-二氯苯基)-1H-苯并咪唑-1-基]乙酰腙(c2)和N-(2-羟基苯甲烯基)-2-[2-(4-硝基苯基)-1H-苯并咪唑-1-基]乙酰腙(c10)对所测试的肿瘤细胞均表现出明显的抑制活性(IC50=2-21μM)。

5-(3-吲哚基)亚甲基噻唑烷-2,4-二酮衍生物的合成及体外抗肿瘤活性探索

将N-取代吲哚-3-甲醛和2,4-噻唑烷二酮通过亚甲基键合,再对噻唑烷二酮氮取代,合成了一系列5-(3-吲哚基)亚甲基噻唑烷-2,4-二酮衍生物(e1-e9).采用IR,1H NMR和HRMS对其结构进行了表征;采用MTT法对目标物抑制5种癌细胞增殖活性进行了测试.结果表明,所有目标物对A549、HCT116和PC-9表现出抑制活性,其中吲哚氮被苄基取代的化合物e1和e3对测定的癌细胞增殖抑制活性与5-氟尿嘧啶(5-FU)相近,并且对A549和HCT116表现出中等的抑制活性(IC50<30μM)。

LC-MS/MS法测定比格犬血浆中的阿那曲唑

用高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定比格犬血浆中阿那曲唑的浓度.以苯磺酸氨氯地平为内标,加入50μL血浆,用甲基叔丁基醚萃取后取上清液以氮气吹干,用50％甲醇水溶液复溶,进样5μL,在电喷雾离子源下进行正离子检测.色谱柱为Agilent XDB C18（50mm×2.1 mm×3.5 μm）,流动相为0.1％甲酸水-0.1％甲酸乙腈（60∶40）.阿那曲唑和内标的质荷比（m/z）分别为294.4和409,阿那曲唑和内标生成的主要碎片离子的质荷比（m/z）分别为255.3和238.阿那曲唑在0.5～500 ng· mL^-1内线性良好,检出限为0.5 ng· mL^-1,提取回收率均大于80％,日内、日间准确度为101％～104％,日内、日间精密度分别小于7.04％和8.69％,已成功检测比格犬血浆中阿那曲唑的血药浓度.所用方法稳定、灵敏度好、分析时间短、提取回收率高,适用于比格犬血浆中阿那曲唑的血药浓度测定.