中华眼镜蛇毒组分对MCF-7乳腺癌细胞凋亡的诱导作用及对Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨中华眼镜蛇毒组分(naja naja actra venom component,NNAVC)对MCF-7乳腺癌细胞凋亡的诱导作用及对Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法采用MTT法检测不同浓度(0.312 5、0.625、1.252、.5、5、10μg/mL)、不同作用时间(244、8、72 h)下NNAVC对MCF-7细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜观察NNAVC对MCF-7细胞形态学影响;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot法检测Bcl-2及Bax蛋白的表达。结果 MTT结果显示,NNAVC对MCF-7细胞具有明显的增殖抑制作用,且呈时间及剂量依赖性。倒置显微镜观察NNAVC作用MCF-7细胞后,细胞出现形态不规则、部分细胞变圆甚至脱落、细胞碎片等改变。流式细胞仪检测2.5μg/mL和5μg/mL的NNAVC均明显诱导MCF-7细胞凋亡,凋亡率分别达到(35.08±4.24)%和(44.41±3.56)%。Western blot法结果显示Bcl-2蛋白表达减少,而Bax蛋白表达增多。结论 NNAVC对MCF-7细胞具有明显的增殖抑制作用,且可以诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与下调Bcl-2和上调Bax蛋白表达有关。

体外观察雷公藤内酯醇对乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TP)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测不同条件下TP对MCF-7细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜观察TP对MCF-7细胞形态学影响;流式细胞仪检测MCF-7细胞的凋亡情况;Caspase检测试剂盒测定Caspase-3,9的变化。结果:TP以剂量及时间依赖性方式明显抑制MCF-7细胞的增殖;TP作用MCF-7细胞后,细胞出现明显的形态学改变(形态不规则、脱落,细胞碎片等)。流式细胞仪检测5μg/mL的TP明显诱导MCF-7细胞凋亡;Caspase-3,9表达水平明显升高,和对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TP可能通过线粒体通路诱导MCF-7细胞凋亡而发挥其抑制作用。

蝎毒及其分离组分对4种肿瘤细胞生长的抑制作用

目的:观察蝎毒(scorp ion venom,SV)及其分离组分对4种人肿瘤细胞(肺癌A549细胞、人低分化胃腺癌细胞BGC-823、人肝癌细胞SMMC-7721、人骨髓细胞白血病细胞HL-60)生长的抑制作用。方法:采用Sephadex G-50柱层析法分离蝎毒;用MTT法检测肿瘤细胞的存活率。分别以丝裂霉素C(MMC)及顺铂(C-DDP)为阳性对照药,以蝎毒及其组分1 mg/L、10 mg/L和100 mg/L的浓度处理4种人肿瘤细胞,作用48 h后,分别观察蝎毒及其分离各组分对上述细胞的影响。结果:用Sephadex G-50柱层析法分得6个峰(APⅠ1,API2,APⅡ,APⅢ1,APⅢ2,APⅣ),其中蝎毒组分APⅢ1(antineop lastic polypeptideⅢ1)对HL-60,SMMC-7721,BGC和A549细胞生长有明显的抑制作用,与对照组比较差异有显著性(P<0.05,或P<0.01)。对A549细胞和HL-60细胞具有较好的剂量-效应关系。结论:蝎毒分离6个组分中,蝎毒组分APⅢ1对HL-60,SMMC-7721,BGC和A549 4种人肿瘤细胞具有明显的生长抑制作用,剂量效应关系明显。

机能实验学设计性实验对提升学生创新能力的探索与效果

创新能力的培养是高等医学教育的重要目标之一。机能实验学设计性实验,通过引导学生应用已学过和掌握的机能实验知识和技能,去解决某一实际医学问题,达到了良好的效果。该文分析并探讨了本院机能学设计性实验的实施方法,取得的经验以及存在的问题和应对策略,有利于进一步开展设计性实验,提高学生的创新能力。

蝎毒素调控离子通道的研究新进展

近年来 ,随着蝎毒素理化性质及结构功能逐渐被认知 ,其在多种离子通道 (Na+ 通道、K+ 通道、C1-通道、Ca2 通道等 )的生物学功能 ,已引起科学工作者的极大兴趣。而离子通道与肌肉收缩、神经分泌 ,体内电解质的平衡 ,动作电位的频率与延续以及静息电位等一系列细胞活动密切相关。本文对蝎毒多肽对离子通道作用的研究进展进行综述。

L-精氨酸预处理对急性缺氧大鼠肺组织的影响

目的探讨L-精氨酸预处理对急性缺氧大鼠肺组织的影响及其作用机制。方法建立大鼠缺氧模型,并观察一般状况,计算体重及肺系数;NO含量测定试剂盒测定肺组织NO水平。结果缺氧后大鼠进食及活动减少,一般状况差,用药组体重及肺系数有所改善;缺氧后肺组织中NO和常氧组相比有明显减少,而缺氧+L-arginine组NO水平与缺氧组比较有明显提高(P<0.05),几乎接近正常水平。结论 L-精氨酸预处理对急性缺氧大鼠肺组织具有保护作用,其机制可能与NO水平的升高有关。

去氢吴茱萸碱对D-半乳糖大鼠学习记忆障碍的预防作用及其机制

目的探讨去氢吴茱萸碱(dehydroevodiamine,DHED)对D-半乳糖大鼠学习记忆障碍的预防作用及其机制。方法 40只雄性SD大鼠随机分为4组,即对照组、D-半乳糖组、DHED低剂量组和DHED高剂量组。Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆,生化方法检测血浆和脑组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,ELISA测定皮质和海马β淀粉样肽(Aβ)的变化。结果经8周D-半乳糖注射后,与对照组比较,D-半乳糖组大鼠的学习和记忆、血浆和脑组织中SOD的活性显著降低(P<0.01),血浆和脑组织中MDA的含量、脑皮质和海马中Aβ的含量显著升高(P<0.05);DHED高剂量组大鼠的学习和记忆能力增强,血浆和脑组织SOD增加、MDA的含量降低,脑组织中Aβ的含量降低,与D-半乳糖组比较,差异有统计学意义(P<0.05),DHED低剂量组与D-半乳糖组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DHED可能通过减少脑组织Aβ的产生和增强机体的抗氧化作用来预防D-半乳糖对大鼠学习记忆的损伤。

漆树酸联合紫杉醇对肝癌细胞生长抑制和凋亡的影响

目的:评价漆树酸和紫杉醇联合用药对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用。方法:人肝癌HepG2细胞经漆树酸和(或)紫杉醇处理后,MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪技术检测细胞凋亡,Westernblot方法检测Bax、Bcl-2及Caspase-3、8、9和PARP凋亡相关蛋白的变化。结果:漆树酸和紫杉醇联合应用能够明显增强对HepG2细胞的增殖抑制,与单独用药组相比具有明显的协同作用。漆树酸联合紫杉醇可以明显诱导HepG2细胞凋亡。两药联合作用可以诱导Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比率增加,引起Caspase-3、8、9的活化,PARP的切割。结论:漆树酸和紫杉醇联合用药具有协同作用,明显增强抑制HepG2细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与Caspase系统活化相关。

Bmi-1促人胶质瘤SNB19细胞生长恶化的作用机制

目的:观察Bmi-1对人胶质瘤SNB19细胞生长恶化的影响。方法:体外培养人胶质瘤SNB19细胞,建立稳定表达Bmi-1和抑制Bmi-1表达的细胞系及空载体对照组细胞系。通过MTT、体外小室侵袭试验和血管内皮细胞成管试验检测胶质瘤细胞生长、侵袭运动和血管增生的能力。通过双萤光素酶信号报告系统和细胞免疫荧光染色检测NF-κB的活化程度。通过实时荧光定量PCR检测NF-κB下游基因表达水平。结果:Bmi-1体外增强胶质瘤细胞生长、侵袭运动和血管增生能力。高表达Bmi-1的细胞NF-κB信号通路被活化,而抑制NF-κB的活性能够抑制Bmi-1对胶质瘤细胞生长、侵袭和血管增生相关的促进作用。高表达Bmi-1的细胞其NF-κB下游与细胞生长、侵袭运动及血管增生相关的基因的表达被上调。结论:Bmi-1在人胶质瘤SNB19细胞生长过程中起到重要促进作用,其作用机制可能与活化NF-κB进而增强相关基因的表达有关。

云龙县2005—2014年麻疹疫情分析及防控建议

目的:了解云龙县2005-2014年麻疹流行特征,为制定消除麻疹措施提供依据。方法:对云龙县2005-2014年报告的麻疹病例进行描述性流行病学分析。结果:云龙县2005-2014年报告麻疹病例110例。云龙县麻疹疫情呈间隔几年后又流行,发病高峰以冬春季为主。发病以儿童和成人为主。患者职业以农民为主。接种史不详或无的共101例,占91.82%。结论:加强常规免疫,提高接种率,落实入托、入学儿童预防接种证查验工作,加强麻疹监测和医院感染管理,同时将成人人群作为消除麻疹的重点,才能实现消除麻疹目标。

云龙县2013-2015年健康人群麻疹抗体水平监测分析

目的了解云龙县健康人群麻疹免疫状况,为控制和消除麻疹提供依据。方法用分层整群抽样方法,于2013-2015年连续三年抽取健康人群采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测麻疹IgG抗体的含量。结果云龙县人群麻疹IgG抗体阳性率96.05%,保护率70.68%,不同监测年度、不同年龄组、不同地区人群之间抗体阳性率、保护率差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论云龙县健康人群麻疹免疫总体水平已达到消除麻疹应维持在95%以上的要求,但不同年龄组、不同地区之间抗体阳性率、保护率差异较大,应加强免疫薄弱地区免疫规划工作,加强10-17岁年龄组麻疹强化免疫、8-17月龄组麻疹疫苗的及时有效接种工作,提高麻疹疫苗接种率、接种质量,最终达到控制和消除麻疹的目标。

蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其机制

目的探讨蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其抗肿瘤机制。方法四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用。荧光显微镜及流式细胞仪（FCM）技术观测蝎毒重组蛋白对肿瘤细胞内钙离子浓度（[Ca^2＋]i）的影响，从而了解Ca^2＋的可能来源。结果蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞生长有明显抑制作用（P〈0．05），各浓度组抑制率分别为（25．61±11．0HD）％、（40．91±7．32）％、（65．35±14．51）％。荧光显微镜显示，蝎毒重组蛋白作用细胞48h后细胞内钙离子荧光强度增强，提示[Ca^2＋]i升高。流式细胞仪显示蝎毒重组蛋白在不同情况下可显著增加肿瘤[Ca^2＋]i（P〈0．05）。结论蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞增殖具有显著抑制作用，可能与升高肿瘤[Ca^2＋]i，继而诱导肿瘤细胞凋亡有关；其升高肿瘤[Ca^2＋]i是通过开放肿瘤细胞膜钙通道和肿瘤细胞内钙库释放两条途径实现。

五段滚动式病理生理学课外实验教学模式的构建与成效

目的培养学生的科研创新能力，构建创新型病理生理学课外实验教学模式。方法运用创新型五段滚动式培养方法，将课外实验教学分为动员引导、择优选拔、课题申报、课题实施及课题总结5个阶段。结果自2002年以来，约300名学生参与五段滚动式教学，获得学院学生科研课题立项36项，发表学术科研论文26篇，参与申报专利2项，学生的科技作品在各级竞赛中获奖31项，其中1项获得“挑战杯”全国大学生课外学术科技作品竞赛二等奖。此外，相关指导教师也获得广州医学院学生课外科研活动指导工作奖励20余项。结论采用创新型五段滚动式培养方法，成功地构建了创新型病理生理学课外实验教学模式，取得了非常显著的成效。