P27^(kip1)与出核因子CRM1在人淋巴瘤细胞系中的表达及相互关系

目的研究P27kip1与出核因子CRM1在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系。方法运用血清饥饿同步化处理淋巴瘤细胞株Jurkat和Raji,10%血清刺激细胞增殖。Western blot分别检测生长阻滞及增殖的淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1的表达。用核浆分离方法检测P27kip1与CRM1分别在胞核、胞质的定位。免疫沉淀检测P27kip1与CRM1在淋巴瘤细胞中的结合。结果在不同状态的淋巴瘤细胞中,P27kip1与CRM1蛋白水平的表达均表现为负相关,并且P27kip1的核内外分布与CRM1的核内外分布一致。免疫沉淀结果验证在淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1相互结合。结论出核因子CRM1可能通过与P27kip1结合而影响P27kip1的核内外分布及表达水平,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。

磷酸化P27^(kip1)的表达与非霍奇金淋巴瘤的恶性相关

目的探讨P27kip110位丝氨酸(Ser10)和187位苏氨酸(Thr187)磷酸化形式的蛋白质表达水平与非霍奇金淋巴瘤(NHL)恶性程度的关系。方法采用免疫组织化学方法检测88例NHL及15例良性增生淋巴结中Ser10、Thr187磷酸化P27kip1和P27kip1蛋白的表达,结合临床及病理资料进行统计分析。结果两种磷酸化位点的P27kip1蛋白在良性增生淋巴结(不包括生发中心)中的阳性率明显低于NHL,随着肿瘤侵袭性的增加,两种磷酸化位点的P27kip1蛋白表达水平增高,与增殖指标Ki-67呈正相关。Thr187磷酸化P27kip1蛋白的阳性率与P27kip蛋白表达水平呈正相关,Ser10磷酸化P27kip1蛋白的阳性率与P27kip1蛋白表达水平表现为负相关。结论磷酸化的P27kip1与NHL的恶性程度有关,联合检测磷酸化P27kip1与P27kip1蛋白的表达水平可为NHL的临床诊断和治疗提供参考。

人类S期激酶相关蛋白2表达质粒的构建

目的:克隆人类S期激酶相关蛋白2(Skp2)基因,构建其表达质粒,为今后进一步研究Skp2的生物学功能提供基础。方法:采用RT-PCR技术扩增人类Skp2 eDNA全长序列,运用DNA重组技术将其重组于pcDNA3.1/myc- His A质粒,构建Skp2表达质粒。结果:通过酶切电泳分析及DNA测序分析证实,实验成功构建了Skp2表达质粒。结论:Skp2表达质粒pcDNA3.1/mye-His A-Skp2构建成功,为进一步研究Skp2的生物学功能及其在肿瘤发生、发展、诊断和预后中的作用奠定了基础。

血清饥饿释放过程中Raji细胞内Skp2与p27^(kip1)的表达变化及意义

目的:探讨血清饥饿释放过程中淋巴瘤细胞株Raji细胞内Skp2与p27kip1的表达变化及意义。方法:采用免疫沉淀方法检测Raji细胞中p27kip1与Skp2的结合情况;采用血清饥饿合并释放同步化处理Raji细胞,经WesternBlot技术检测该过程中p27kip1、Skp2在Raji细胞中的表达变化。结果:免疫沉淀结果显示在Raji细胞中p27kip1与Skp2能够相互结合。在Raji细胞血清饥饿释放过程中,Skp2蛋白总量增加,p27kip1蛋白总量减少。结论:在Raji细胞血清饥饿释放过程中Skp2合成增加,可能通过加快p27kip1的泛素化降解而使细胞中p27kip1显著减少,从而推动了细胞周期的进程。

基于紧密型医联体的慢阻肺社区防治网络体系建立的临床应用研究

目的结合紧密型医联体,初步建立慢阻肺社区防治网络体系,并观察其对慢阻肺综合管理的效果。方法构建紧密型医联体,实验组采用建立好的慢阻肺社区防治网络体系进行综合管理,对照组仅提供基本卫生服务。观察分析两组间的依从性、慢阻肺知晓率、生活质量、肺功能和急性加重等指标,评价该慢阻肺综合防治平台施行价值。结果实验组人群的慢阻肺知晓率、随访率、戒烟率等指标较对照组均明显增高(P<0.05)。实验组患者6分钟步行距离、规范化治疗率较实验前明显增加(P<0.05),且显著高于对照组(P<0.05);急性加重的人数与对照组相比,明显减少(P<0.05);实验组CAT评分较实验前明显降低(P<0.05),且显著低于对照组(P<0.05)。实验组FEV1和FEV1占预计值%与实验前比较,均明显增加(P<0.05)。对照组实验前的FEV1、FEV1占预计值%与实验后相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究的慢阻肺社区防治网络体系有较高的施行价值。

急性脑梗死后并发卒中相关性肺炎的危险因素分析

目的探讨急性脑梗死患者卒中相关肺炎(SAP)的危险因素。方法 479例患者分为SAP组(n=239)和无SAP组(n=240)。分析2组性别、年龄、病史(糖尿病、高血压、房颤及冠心病)、吸烟、饮酒、溶栓、肠内营养、神经功能缺损评分(NIHSS)、格拉斯哥昏迷量表评分(GCS)、血清白蛋白、高密度脂蛋白等差异。多因素Logistic回归模型分析有差异的指标,探讨SAP危险因素。结果单因素分析显示:SAP组和无SAP组在年龄、NIHSS分级、吞咽功能、肢体功能障碍、意识、发声障碍、冠心病、气切或插管、吸烟、高密度脂蛋白、甘油三酯中有统计学差异(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,意识障碍、肠内营养是SAP独立危险因素(P<0.05)。存活组和死亡组在NIHSS分级、意识、发声障碍、溶栓、血红蛋白、高密度脂蛋白、A2DS2、NHISS、GCS中有统计学差异(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,吞咽障碍、溶栓、血红蛋白是死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论 SAP由多因素介导,意识障碍、肠内营养是其独立危险因素。吞咽障碍、溶栓、血红蛋白是SAP患者死亡独立危险因素。

以弥漫性肺结节为表现的原发性脑膜瘤1例

目的以弥漫性肺结节为表现的疾病有很多,而肺原发性脑膜瘤(Primary Pulmonary meningioma,PPM)的病例极其罕见,少有文献提及相关影像学等表现。本文旨在探讨肺原发性脑膜瘤的临床影像学特点、诊断及鉴别诊断和治疗。方法回顾分析一例以弥漫性肺结节为表现的患者的临床表现、影像学检测、病理特点、治疗及随访结果,并结合文献学习。结果患者经病理检查确诊为肺原发性脑膜瘤。结论肺原发性脑膜瘤可以表现为弥漫性肺结节。在鉴别以弥漫性肺结节为影像学表现的疾病时,应考虑此疾病的可能。因此,掌握该疾病的影像学、病理等特点,可以更好地诊断和鉴别诊断,有利于治疗及判断预后。

建筑工程管理中项目管理理念的整合运用实践

建筑工程施工规模相对较大,施工量也相对较多,这样建筑管理工作就会具有一定的复杂性,并且在建筑管理的过程中,需要基于大量的信息资源。但是,这样的情况下,信息资源经常会发生混淆的现象,影响建筑工程管理的有效性。因此,针对该方面,提出了项目管理理念,并且分析了项目管理理念在建筑工程管理中的整合运用,主旨就是保证建筑工程管理的有效性,进而保证建筑工程的综合效益,促进其行业的发展。

全反式维甲酸对人白血病细胞系U937细胞生长的影响及其机制分析

目的研究全反式维甲酸（ATRA）作用于人白血病细胞系U937细胞后，对细胞生长的影响及可能的机制。方法收集1 μmoL／L ATRA作用后的U937细胞，利用流式细胞术检测细胞周期分布，Western blot法检测细胞周期相关蛋白（cyclinA、p16、p21、p27及p27相关分子skp2）表达水平的变化，采用免疫沉淀方法检测U937细胞中p27与Skp2的结合情况。结果流式细胞术分析显示，在1 μm0L／L ATRA作用72h后，72％的U937细胞被阻滞在G0／G1期。Western blot分析显示，ATRA能诱导cyclinA、Skp2表达下凋，p21、p27表达上调。免疫沉淀法检测结果显示在U937细胞中p27与Skp2存在相互结合的情况。结论ATRA可能主要通过诱导p27表达上调引起U937细胞生长阻滞，其过程是由p27相关分子Skp2所介导的。

p27^(kip1)及其出核相关分子激活蛋白1辅因子在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系

目的探讨 p27^(kip1)及其出核相关分子激活蛋白1(AP-1)的辅助因子 Jab1在淋巴瘤细胞中的表达变化及相互关系。方法采用血清饥饿合并释放方法同步化处理淋巴瘤细胞系 Jurkat 和Raji 细胞,分别采用 Western blot 及 RT-PCR 技术检测 p27^(kip1)、Jab1在淋巴瘤细胞中的蛋白表达水平和mRNA 表达水平变化;采用来普霉素 B(LMB)刺激增殖过程中的淋巴瘤细胞,检测 p27^(kip1)、Jab1的表达变化;构建人 Jab1基因的 pcDNA3.1-myc-Jab1的真核表达质粒,脂质体转染 Jurkat 细胞,配合免疫荧光技术检测 p27^(kip1)的亚细胞定位情况;免疫沉淀检测 Jurkat 和 Raji 细胞中 p27^(kip1)与 Jab1的结合情况。结果血清饥饿导致 Jurkat 和 Raji 细胞生长周期停滞,p27^(kip1)蛋白总量增加,Jab1蛋白总量减少。血清释放后两者的蛋白水平呈现相反的表达变化,而 p27^(kip1)mRNA 水平无明显改变。LMB 可以抑制由血清释放引起的细胞增殖,在此过程中 p27^(kip1)表达上调,Jab1表达下调。转染 Jab1真核表达质粒的 Jar-kat 细胞 p27^(kip1)定位有明显的改变。免疫沉淀结果显示在 Jurkat 和 Raji 细胞中 p27^(kip1)与 Jab1相互结合。结论 Jab1可能通过与 p27^(kip1)结合来介导 p27^(kip1)的核内外分布并影响其表达,进而影响 p27^(kip1)的功能状态,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。

Jurkat细胞增殖过程中S期激酶相关蛋白2与p27^kip1的表达变化及意义

目的探讨S期激酶相关蛋白2（skp2）与p27^kip1在淋巴瘤细胞株Jurkat细胞增殖过程中的表达变化及意义。方法采用免疫沉淀法检测Jurkat细胞中p27^kip1与Skp2的结合情况；采用血清饥饿合并释放法同步化处理Jurkat细胞，再分别用Western blot技术、免疫荧光双标技术及核浆分离法检测p27^kip1和Skp2在Jurkat细胞中的表达变化及亚细胞定位。结果p27^kip1与Skp2能够相互结合。在Jurkat细胞增殖过程中，p27““蛋白表达减少，其中在细胞核内的减少更明显；Skp2蛋白表达增加，其中在细胞浆中的增加更明显。结论在Jurkat细胞增殖过程中，Skp2在细胞浆中的合成增加，并可能通过加快p27^kip1的泛素化降解使细胞核内p27^kip1显著减少，从而推动细胞周期的进程。

角色体验式教学法在呼吸内科教学中的应用

分析在呼吸内科教学中使用角色体验式教学法的效果。方法 抽取70例呼吸内科的临床实习生进行研究,分组后,每组35例,研究组实施角色体验式教学法,对照组实施传统临床教学,对比两组数据。结果 对比两组临床教学质量考核量表评分得出明显研究组更高,对比两组临床教学满意度得出明显研究组更高,对比两组考核成绩得出明显研究组更高,P<0.05。结论 在呼吸内科教学中使用角色体验式教学法,效果较为理想。