宫颈癌辐射敏感性相关基因的研究进展

宫颈癌治疗以手术切除辅以放化疗作为首选治疗方法,但是上述治疗手段创伤较大,不良反应也较严重,甚至可能剥夺年轻患者的生育功能。近年来随着分子生物学的发展,研究者试图从基因水平寻找对辐射敏感的放疗靶点,以最高效的杀灭肿瘤,同时最大限度地保护正常组织,从而提高放疗效果,减少放疗副作用。本文主要就宫颈癌辐射敏感性相关的多种基因及其表达产物展开综述,为研究放疗抵抗的分子机制,预测宫颈癌放射治疗预后效果奠定基础,并为肿瘤的放疗增敏治疗提供新思路。

辐射介导下HeLa细胞中Cdc25B与IER5蛋白表达的关系

目的:探索辐射介导下He La细胞中Cdc25B与IER5蛋白表达的关系。方法:用4 Gyγ射线分别照射正常He La细胞和IER5-si RNA-He La细胞,收集照射后0、0.5、2、4、8、12、16、24、36 h的细胞样本,并设未照射细胞为对照组。采用q PCR法检测照射后Cdc25B m RNA的表达;Western blot检测细胞内IER5和Cdc25B蛋白的表达;流式细胞术检测照射后G2期细胞周期阻滞情况。结果:q PCR结果显示,照射后0.5~24 h内,与对照组相比,正常He La细胞内Cdc25B m RNA在0.5 h先下降2 h再上升之后再下降,差异均有统计学意义(P均<0.05);在IER5-si RNA-He La细胞内Cdc25B m RNA在0.5 h先下降后再上升,差异均有统计学意义(P均<0.05,2 h组除外)。Western blot结果显示,照射后0.5~24 h内,与对照组相比,正常He La细胞内Cdc25B蛋白从2 h开始上升8 h开始下降,差异有统计学意义(P均<0.01);IER5-si RNA-He La细胞内Cdc25B蛋白从0.5 h开始下降8 h开始逐渐上升,差异有统计学意义(P均<0.01,24 h除外)。照射后0~36 h内,与对照组相比,正常He La细胞与IER5-si RNA-He La细胞的IER5蛋白表达水平分别在照后8 h与0 h后开始出现明显上升,差异均具有统计学意义(P均<0.05);而Cdc25B蛋白表达水分别在照射后8 h与0 h后开始出现下降,差异均具有统计学意义(P均<0.05),正常He La细胞与IER5-si RNA-He La细胞中Cdc25B蛋白与IER5蛋白的表达分别从8 h与0 h后开始呈现负相关关系(r分别为-0.740和-0.669,P均<0.01),当两种细胞中Cdc25B蛋白表达量下降时,G2期细胞周期阻滞比例升高(P<0.05)。结论:辐射介导下He La细胞中Cdc25B蛋白表达变化是由Cdc25B m RNA变化引起的,并且Cdc25B与IER5蛋白表达呈负相关关系。

铀尾矿废渣回填治理区植物中铀放射性水平调查

为了解北方某铀矿尾渣回填区内放射性核素铀在植物体中富集情况,为进一步探讨利用植物修复技术对铀矿区进行土壤修复的可行性,以及寻找放射性核素污染土壤治理的方法提供理论依据,采集矿区内堆浸工位与矿区外尾渣回填治理区常见植物样本,采用ICP-MS测定植物和土壤中放射性铀水平,针对植物对铀的耐受性和富集能力进行评估,筛选出富集能力较强的植物,进一步探索利用植物修复技术对放射性废物治理。结果表明,经对采集的植物中铀含量检测发现植物的地下部分铀含量高于地上部分,铀主要集中在根部,植物各部位铀含量由高到低分别为根、叶、茎。矿区内堆浸工位处的大籽蒿根部铀活度为64.26 Bq/kg;在矿区外尾渣回填区同一植物根部铀活度为0.86 Bq/kg。所调查的北方某铀矿尾渣回填区内所采集的植物中铀含量极低,远小于矿区内堆浸工位所采植物样品中铀含量。深埋回填铀矿尾渣是切实有效可行的。

外界刺激下肿瘤细胞中早反应基因5相关生物学功能的研究进展

早反应基因5(IER5)属于早期反应基因,因其在多种肿瘤细胞中均发挥着抑制肿瘤细胞增殖的作用而受到广泛关注。在受到外界刺激(热压力、血清、电离辐射等)时,肿瘤细胞内的IER5会过表达从而使细胞作出一系列应激性反应如G2期周期阻滞和凋亡等。在临床放化疗中IER5的表达量可以作为一种潜在的肿瘤放化疗后诱导细胞凋亡的生物标记物,并和肿瘤组织大小相关,对今后放化疗方案的改进具有重要的指导意义。

人Cdc25B基因启动子报告基因载体的构建及转录活性分析

目的构建人细胞分裂周期25家族蛋白B(Cdc25B)基因启动子(promoter)荧光素酶报告基因载体p GL3-Cdc25B-promoter,并检测其转录活性。方法应用欧洲启动子在线数据库(EPD)获得人Cdc25B基因5'端非编码区处包含转录起始位点在内的-2000^+100的DNA序列。以正常人全血基因组DNA为模板,利用PCR扩增该序列,并插入到p GL3-Basic荧光素酶报告基因载体上。通过设计不同引物,进一步构建系列缺失体,共获得7个不同长度启动子序列的报告基因载体。将其与内参质粒pRL-TK瞬时共转染He La细胞,通过双荧光素酶报告基因活性测定实验检测不同缺失体的转录活性。利用定点突变及RNA干扰(RNAi)探究预测的转录因子对Cdc25B转录活性的影响。结果构建的人Cdc25B基因启动子荧光素酶报告基因载体p GL3-Cdc25B-promoter经酶切鉴定及测序结果比对完全正确,将其转染He La细胞后,检测到荧光素酶高表达(P<0.05)。启动子系列缺失分析显示-160^-53片段包含基本核心启动子,与生物信息学的预测结果一致。定点突变及RNA干扰显示NF-YB转录因子对Cdc25B起正调控作用。结论成功构建了7个具有转录活性的人Cdc25B启动子缺失片段,确定了NF-YB是Cdc25B转录的一个重要调控因子,为进一步将其用于抗肿瘤药物的筛选与评价奠定了基础。