糖醋酒液诱捕核桃园小黄鳃金龟的效果

为研究核桃园中小黄鳃金龟Pseudosymmachia flavescens(Brenske)成虫的发生规律,探讨糖醋酒液对小黄鳃金龟的诱捕效果,本研究采用正交试验筛选糖醋酒液最佳配方,并于2020年-2022年在陕西省商洛市镇安县核桃园开展不同配方糖醋酒液及诱捕器悬挂不同高度诱捕小黄鳃金龟成虫试验。结果表明,糖∶乙酸∶乙醇∶水为3 g∶4 mL∶3 mL∶20 mL的配方对小黄鳃金龟成虫诱捕效果最佳。商洛市镇安县核桃园小黄鳃金龟成虫的发生期为5月上旬至9月中旬,盛发期为6月中旬至7月中旬。糖醋酒液诱捕器在距地面0.5~1.5 m范围内诱捕量随高度升高增加,当高度升至2.0 m时诱捕量明显下降,悬挂高度1.5 m时诱捕量570头/年、占比50.04%,显著高于其他高度处理。糖醋酒液3∶4∶3∶20配方(m∶V∶V∶V)既可准确监测核桃园小黄鳃金龟成虫种群发生动态,亦可高效诱杀用于防治。

菌剂PA9降解农田土壤残留氧化乐果研究

【目的】验证菌剂PA9在设施棚中对土壤中残留的氧化乐果降解效果,研究其对土壤理化性质、番茄生长及土壤微生物等产生的影响。【方法】将氧化乐果降解菌ZZY-C13-1-9制备成氧化乐果降解菌剂PA9,在土壤中添加100 mg/kg的氧化乐果并施用0.1%菌剂PA9,进行为期50 d的土壤污染修复试验。每隔10d取土样1次,采用HPLC法测定土壤中残留的氧化乐果含量,通过选择性平板培养观察降解功能菌在土壤中的定殖,采用高通量测序法监测土壤细菌多样性变化,按国标法测定土壤理化指标,测定番茄生长指标。【结果】土壤中添加100 mg/kg的氧化乐果并施用0.1%菌剂PA9,修复40 d后氧化乐果残留量降至5.3 mg/kg,对照残留量为48.79 mg/kg,差异极显著。菌剂PA9功能菌株ZZY-C13-1-9在氧化乐果污染土壤中可有效定殖,修复10~20 d时,在氧化乐果土壤微生物中比例有所增加。土壤中残留的氧化乐果含量显著降低,表明该功能菌株可在污染土壤中发挥降解氧化乐果的作用。高通量测序结果显示,随着氧化乐果含量降低,假单胞菌在土壤微生物菌群中的比例也随之降低,表明菌剂PA9不会永久改变土壤的微生物多样性分布,修复后的土壤可有效恢复细菌菌群多样性,土壤全氮、微生物氮、速效磷含量及土壤团聚体MWD值较对照显著增加,菌剂PA9的使用对番茄生长无负面影响。【结论】氧化乐果降解菌剂PA9,可在氧化乐果污染土壤中短期定殖并加速土壤中氧化乐果的降解,改善污染土壤微生物多样性,对土壤理化性质及种植番茄无不良影响。

利用PCR-DGGE技术指导高温油藏中功能微生物的分离

采用PCR-DGGE技术对高温油藏的微生物群落进行了多样性分析,并将得到的信息用于指导油藏微生物的分离.本研究通过PCR-DGGE技术对油藏水样中DNA的16S rDNA V3、V8、V9 3个高可变区的扩增产物进行了比较,确定采用可得到更多微生物多样性信息的V9区引物进行PCR扩增,优势条带序列分析表明,在高温油藏中存在的微生物与GenBank数据库中α,β,γ-变形杆菌和芽孢杆菌的序列相似性最高.利用多元细菌培养技术,以序列信息为指导,采用富集培养、直接培养和特殊培养的方法,从水样中分离出5株高温菌(而传统分离方法只能获得3株),其中3株高温解烃菌分别属于Bacillus属、Geobacillus属和Petrobacter属,它们能够在55℃以上兼性厌氧条件良好生长,对原油的降解率分别为56.5%7、0.01%和31.87%,对原油的降粘率分别为40%、54.55%和29.09%,使原油的凝固点分别降低3.7、5.2和3.1℃.因此,序列指导和改变培养条件是分离更多有效采油微生物的改进方法,这3株高温菌的对原油的作用效果证明其具备提高石油采收率的潜力.

胜利油田沾3区块内源微生物激活剂的筛选、优化及效果评价

采用最大可能数法(MPN)和变性梯度凝胶电泳(DGGE)解析胜利油田沾3区块注入水和产出液中微生物群落结构组成,采用离子色谱和电感耦合等离子体发射光谱技术分析了油藏地层水的离子组成,从而确定了该区块实施内源微生物激活的基础背景资料。以微生物提高采收率机理为基础,同时考虑在激活过程中抑制有害菌———硫酸盐还原菌的生长繁殖,确立了以激活前后水样中总菌浓的变化、硫酸盐还原菌数量变化和对原油的乳化效果作为主要评价指标进行激活剂效果评价。在单因素实验基础上采用最陡爬坡实验逼近最大响应区域,并成功将Box-Benhnke中心组合实验和响应面分析法应用到激活剂体系各因素的优化组合,最终得到玉米浆干粉0.33 g.(100 ml)-1、磷酸氢二铵0.312 g.(100 ml)-1和硝酸钠0.2 g.(100 ml)-1的激活配方,此时总菌浓达到1.57×108cells.ml-1。

大庆油田聚驱后油藏内源微生物激活剂的筛选和效果评价

聚合物驱油后的油藏含水大幅回升,操作成本高,传统化学方法很难继续提高采收率,而内源微生物采油技术是最有希望的接替技术之一.针对大庆油田聚驱后油藏,利用分子生态学技术考察目标油藏的菌群结构,并通过统计学方法对内源微生物激活剂进行筛选和效果评价.结果表明目标油藏具有多种采油功能微生物,确定以糖蜜,硝酸盐,磷酸盐及酵母粉为主的激活剂体系,该体系能显著提高内源微生物的数量,有益菌浓度提高1～3个数量级,代谢产生的表面活性剂能将原油完全乳化分散,形成稳定的悬浊液,同时也能兼顾厌氧微生物的生长及产甲烷菌代谢产甲烷,因此具备实施内源微生物采油的潜力.

陕西核桃黑斑病病原菌鉴定及药剂防治研究

核桃黑斑病是危害核桃生产的重要细菌性病害,近年来在陕西严重发生。为探究陕西省核桃黑斑病的病原菌种类,制定核桃黑斑病的田间防治策略。采用组织分离法对陕西省内核桃黑斑病的病原菌进行分离纯化,获得纯培养物,通过形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,获得2种病原株系HTX和HTP,分别鉴定为野油菜黄单胞杆菌(Xanthomonas campestris)和成团泛菌(Pantoea agglomerans)。通过对21种药剂进行室内抑菌试验,筛选出7种药剂对2种病原菌株系均有明显抑制作用。通过室内毒力测定和田间防治试验,结果表明中生菌素、春雷霉素、噻霉酮、琥胶肥酸铜和噻唑锌对核桃黑斑病危害的叶片、果实的防治效果均在67.67%、61.53%以上,防治效果好,可用于核桃黑斑病的田间防治。

高效氯氰菊酯降解菌米曲霉SSCL-3的分离筛选及降解能力研究

【目的】采用微生物法解决土壤中残留的菊酯类农药问题。【方法】通过唯一碳源法从土壤样本中筛选出发菌株,采用紫外分光光度法及HPLC法对菌株降解能力进行测定,用形态学及ITS测序对菌株种属进行鉴定,通过菌丝生长及产孢量的测定观察该菌株的生长特性,采用摇瓶及室内土壤降解试验验证其降解能力。【结果】从土壤中获得一株高效分解利用菊酯类农药的微生物菌株SSCL-3,经鉴定该菌为米曲霉(Aspergillus oryzae),该菌株可在含1000 mg/L的高效氯氰菊酯无机盐培养基中正常生长。对多种高浓度菊酯类农药耐受。米曲霉SSCL-3在无机盐培养基、28℃、150 r/min摇瓶培养24 h的条件下,对500 mg/L高效氯氰菊酯的降解率为88.9%。土壤室内试验证明该菌在土壤中,温度20~34℃、水分含量保藏40%~60%条件下,30 d可将土壤中400 mg/L的高效氯氰菊酯降解45.6%。【结论】该菌株或可解决土壤残留菊酯类农药问题。

氧化乐果降解菌ZZY-C13-1-9的筛选、鉴定及降解能力

【目的】从设施棚室土壤中筛选获得可降解氧化乐果的微生物菌株,研究降解菌对氧化乐果在土壤中残留量的降解效果。【方法】通过唯一碳源筛选法筛选土壤样本中的本源菌株,生理生化及16S rDNA鉴定种属类型,通过钼胺蓝显色法及HPLC法验证菌株对氧化乐果的降解效果。在土壤中添加一定量的氧化乐果,再添加微生物菌剂并保持湿度温度以验证微生物菌剂在土壤中的应用效果。【结果】筛选获得一株可分解利用氧化乐果的微生物菌株ZZY-C13-1-9,该菌株可在含1000 mg·L^-1的氧化乐果无机盐培养基中正常生长。经鉴定确定该菌为嗜松香假单胞菌(Pseudomonas abietaniphila)。经HPLC证实,在含氧化乐果400 mg·L^-1发酵培养基中,30℃、180 r·min-1摇瓶培养240 h,氧化乐果的降解率达92.3%。ZZY-C13-1-9亦可在敌百虫与敌敌畏中正常生长。土壤室内试验证明:土壤水分含量保持25%~30%,室内温度25~34℃,45 d后嗜松香假单胞菌ZZY-C13-1-9可将土壤中200 mg·L^-1的氧化乐果降解59.2%。【结论】筛选获得一株对土壤中残留的氧化乐果具有降解作用的菌株。

氯氰菊酯降解菌草酸青霉SSCL-5分离鉴定及降解特性

为解决土壤中残留的菊酯类农药问题,通过富集筛选法从70余份土壤中获得一株高效分解利用菊酯类农药的微生物菌株SSCL-5,该菌株可在含1000 mg/L的氯氰菊酯无机盐培养基中正常生长。经形态学及ITS测序鉴定,确定该菌为草酸青霉(Penicillium oxalicum),对多种高浓度菊酯类农药耐受。经紫外分光光度法及HPLC验证该菌株草酸青霉SSCL-5在无机盐培养基、28℃、180 r/min摇瓶培养24 h的条件下,对400 mg/L氯氰菊酯的降解率为97%。土壤室内试验证明该菌在土壤中,温度20-34℃、水分含量保藏40%-60%条件下,30 d可将土壤中400 mg/L的氯氰菊酯降解67.6%。

微生物菌剂W55修复多菌灵污染土壤研究

【目的】评估多菌灵降解菌致密链格孢WJD-55在棚室土壤中的应用效果及其安全性。【方法】在设施棚室土壤中添加多菌灵并施用由降解菌WJD-55制备的菌剂W55,栽种番茄作为观测作物,进行为期50 d的土壤修复试验,同时监测土壤中残留多菌灵、菌剂微生物WJD-55定殖及土壤真菌群落的变化,以及土壤理化性质变化,观测作物生长等指标,从而评估菌剂W55在棚室土壤施用效果及其安全性。【结果】初始土壤中多菌灵质量浓度约42 mg/kg,菌剂使用量0.1%,药后第10天,土壤中多菌灵质量浓度为9.27 mg/kg、下降78%,而对照土壤中多菌灵质量浓度为30.2 mg/kg、下降29%,差异极显著(T-test,P=0.001);土壤微生物高通量测序结果显示,降解菌WJD-55可在污染土壤中定殖,弥补多菌灵对土壤微生物多样性产生的负面影响;土壤理化指标显示,菌剂的加入未对土壤物理化学性质带来显著影响;观测作物番茄生长未受到菌剂的影响,降解菌WJD-55未对番茄叶片等造成病害。【结论】多菌灵降解菌致密链格孢WJD-55可在土壤中稳定定殖并有效发挥降解多菌灵的作用,迅速降低土壤残留多菌灵含量,可改善污染土壤真菌微生物多样性,对土壤理化性质及番茄作物生长无不良影响。

多菌灵降解菌的生物学特性及降解能力研究

农药污染已成为影响人身健康及环境的主要原因。在污染土壤中引入降解特定农药的微生物可有效降低该农药的浓度,并且该方法绿色环保、无二次污染。为降低棚室土壤中的残留农药多菌灵,通过唯一碳源平板筛选法,从长期使用多菌灵的棚室土壤中分离筛选出一株分解利用多菌灵的微生物菌株WNP-3,该菌株可在含200 mg/L的多菌灵LB培养基中正常生长。经形态学、理化、Biolog及16S rDNA鉴定,确定该菌为小麦苍白杆菌(Ochrobactrum tritici)。该菌表现出宽泛的生长范围:在pH4-9,盐含量1%-3%条件下正常生长,对多种农药具有耐受性。经紫外分光光度法及HPLC验证WNP-3在无机盐培养基、28℃、180r/min摇瓶培养120 h的条件下,对100 mg/L多菌灵的降解率为61%。

抗锌细菌ZS2的分离鉴定及抗金属特性研究

筛选可有效降解矿区土壤重金属的抗性细菌,在土壤环境的生物修复中应用前景广阔。从陕西商洛铅锌矿重金属污染土壤中筛选获得一株对重金属锌有高抗性的菌株,命名为ZS2。通过形态特征、生理生化特性及16S r RNA序列分析,初步鉴定该菌为不解糖假苍白杆菌(Pseudochrobactrum asaccharolyticum)。研究其抗重金属及重金属吸附特性,结果表明:ZS2对Zn^(2+)具有较高抗性,最大耐受浓度20 mmol/L,且对多种重金属(Pb^(2+)、Cu^(2+)、Cr6+和Cd^(2+))也具有耐受性;对低浓度Zn^(2+)去除效果最佳,Zn^(2+)浓度为2.0 mmol/L时吸附率高达55.25%;同时对高浓度Zn^(2+)仍具有去除作用。不解糖假苍白杆菌ZS2是鲜有的抗重金属假苍白杆菌属细菌,具有优良的修复土壤重金属污染应用价值。

陕北石油污染区土壤细菌群落结构解析

为了解陕北地区石油污染对土壤微生物群落结构的影响,采用高通量测序对石油污染土壤中细菌群落结构进行研究,考察了石油污染土样的理化性质、可培养微生物数量及细菌群落结构,探讨石油污染程度与细菌群落结构间的关系。结果表明,石油污染土样中残油量为28.7~870.0mg/kg,相对于未污染土样,石油污染土样的总碳随残油量的增加呈增加趋势。石油污染土样中可培养细菌数量大于未污染土样,而可培养放线菌数量则相反。细菌群落结构分析表明,石油污染土样中细菌群落数量显著低于未污染土样,操作分类单元(OTU)数从未污染土样的7 707个最低下降到2 034个,且物种丰富度显著降低,其中厚壁菌门、放线菌门及变形菌门为优势菌群,随土壤残油量增加,厚壁菌门、变形菌门及拟杆菌门比例显著上升,而酸杆菌门、芽单胞菌门等比例则显著降低。

一株抗铅细菌的分离鉴定与抗铅性能研究

为获得可应用于农田土壤重金属污染治理的铅(Pb)降解功能菌株,从陕西商洛铅锌矿区周边农田土壤中分离筛选出1株抗铅细菌,命名为PS8,对其形态特征、生理生化、16SrDNA同源性及抗铅性能进行研究。结果表明,菌株PS8为革兰氏阴性细菌,菌落呈圆形、淡黄色;最适生长温度为30℃,最适pH为7.0;可还原亚硝酸盐,氧化酶、接触酶反应呈阳性;与粪产碱菌Alcaligenes faecali高度同源;在Pb2+浓度为0.5和1.0mmol/L时,去除率分别为99.08%和97.24%。菌株PS8对重金属铅具有高抗性和较强降解能力,是高效、环境友好的土壤重金属铅污染微生物修复菌株。

抗结核海洋放线菌的筛选及菌株HY286生物活性研究

海洋放线菌是研究抗结核药物及其先导化合物的重要来源。以耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Msm)作为指示菌,采用平板对峙法,从漳州浅滩泥土分离的77株放线菌中筛选出9株对Msm具有抑制作用的抗性放线菌,其中1株对Msm具有高效抑制作用的拮抗放线菌HY286。通过对菌株HY286的菌落形态观察、生理生化鉴定及16S r DNA序列分析,初步鉴定其为一株马杜拉属放线菌。通过测定菌株HY286发酵产物的抗耻垢分枝杆菌MIC值、抗菌活性和细胞毒活性。结果表明,该菌株产生化合物的抗耻垢分枝杆菌MIC值为200μg/m L,具有较好的抗结核分枝杆菌的潜力,且对枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌也具有较好的抑制作用,对He La和Hep G2的抑制率分别为89.3%和94.2%。

枝顶孢霉制剂防治根结线虫过程中土壤酶活性和微生物数量的变化

为了了解枝顶孢霉制剂在设施黄瓜根结线虫防治过程中对土壤微生态环境的影响,通过田间试验研究了黄瓜不同生长期土壤酶活性和微生物数量变化。结果发现,枝顶孢霉制剂对土壤酶活性和微生物数量的影响在幼苗期较显著,盛果期和拉秧期影响较小;幼苗期,土壤脲酶活性降低,蔗糖酶活性升高,过氧化氢酶和磷酸酶变化不显著;土壤中细菌数量减少,放线菌数量变化不显著,真菌数量增加;盛果期仅蔗糖酶活性提高,拉秧期土壤酶活性和微生物数量变化均不显著;土壤微生物数量和土壤酶活性具有一定相关性,且随黄瓜生长期发生变化。结果表明,枝顶孢霉制剂对土壤微生态环境的影响主要在幼苗期,此影响有利于黄瓜幼苗生长和根结线虫的防治。

不同棚龄及种植期对土壤微生物代谢功能的影响

为了解不同年限(3、6、9、15年)及不同种植期(定植期、坐果期、盛果期、拉秧期)的设施棚室土壤微生物对碳源利用的变化趋势,对土壤理化性质和土壤微生物碳源利用进行了检测分析。结果表明:种植年限增加导致棚室土壤pH约降低0.52,土壤可溶性盐分、总磷及总碳随着棚龄增加逐渐累积。不同棚龄土壤中,9年棚室微生物碳源代谢活性最高,15年棚室有所下降,但差别不显著。与不同棚龄棚室土壤代谢差异显著相关的碳源有15种。不同种植期土壤样本中,微生物群落对各类碳源代谢均呈现坐果期最强,拉秧期最弱的特征,并且差异显著,与其代谢差异显著相关的碳源19种。

安塞石油污染区土壤真菌群落结构分析

为了解陕西安塞石油污染对土壤真菌群落结构的影响,采用高通量测序法对石油污染土壤真菌群落结构进行了研究。真菌群落结构分析表明,石油污染土壤中真菌群落多样性显著降低,OTU数从无污染的608个下降到220个,且真菌群落丰富度显著降低,呈现单一化趋势。子囊菌门,担子菌门为样本的绝对优势菌群,子囊菌门也随着污染程度加剧而比例增加,壶菌门与接合菌门比例降低。种属分析显示部分可利用石油组分的菌属比例显著增加,大量菌属比例显著降低。

生物表面活性剂产生菌UBQ11-4诱变育种与产物性能研究

本研究从石油污染土壤中筛选得到的一株高效生物表面活性剂产生菌BQ11,对其进行分子鉴定,为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),Gen Bank登录号为KF111571。BQ11发酵后产生的表面活性剂可将发酵培养基表面张力从70 m N/m降低至35 m N/m。发酵产物经过薄层色谱及红外光谱分析,为糖脂类生物表面活性剂。经UV诱变后,筛选获得一株正诱变幅度达28%的高产生物表面活性剂菌株UBQ11-4,糖脂产量从5.3 g/L提高至6.8 g/L。通过对其产物特性及稳定性进行研究,发现该菌株产生的生物表面活性剂对原油的乳化降黏效果良好,9 d后乳化相仍可保持86%。经测定,其临界胶束浓度CMC值为50 mg/L,低于出发菌株BQ11的CMC值(65 mg/L),并能将培养基的表面张力降低50%以上,有可能应用于石油工业提高采收率和环境工程的油气污染生物修复。

枝顶孢霉对南方根结线虫的防治效果

以室内生物测定检测枝顶孢霉悬液对南方根结线虫二龄幼虫的致死率,在黄瓜砧木上,以盆栽试验和温室小区试验检测枝顶孢霉粉剂对南方根结线虫病的防效。结果表明,室内生物测定枝顶孢霉悬液对南方根结线虫的最高致死率为89.7%,毒力曲线为y =-7.5989+1.717826x,R^2=0.9960,LC_(50)=2.15×10~7 CFU/ mL;盆栽试验最佳防效为药后14 d,防效为15.38%~31.57%,各处理有剂量-效应关系,对黄瓜砧木生长有促进作用。温室小区最佳防效为药后120 d,防效为80.47%~84.38%。枝顶孢霉粉剂对南方根结线虫有一定的防效,同时可以促进黄瓜砧木的生长,需要在早期病害较轻时施用,药后4个月左右需要补施一次。