正交设计法优化黄芩苷微波提取工艺

为优化黄芩中黄芩苷的最佳微波提取工艺,试验采用正交设计法,以黄芩苷得率作为评价指标,研究了微波功率、料液比、微波时间3种因素对黄芩苷微波提取工艺的影响。结果表明,各因素对黄芩苷得率的影响从大到小依次为:料液比、微波功率、微波时间;黄芩苷微波提取工艺最佳条件为:微波功率为650 W、料液比为1∶10、微波时间为6 min,此条件下黄芩苷的得率为9.30%,含量为96.69%。优化的黄芩苷微波提取工艺稳定可行。

正交试验优化黄芩中黄芩苷水提酸沉工艺

为了探索黄芩中黄芩苷水提酸沉的最佳工艺,采用正交试验,以黄芩苷得率作为考察指标,考察提取时间、混悬液醇浓度、酸沉pH值3种因素对黄芩苷水提酸沉工艺的影响。结果表明,黄芩苷水提酸沉工艺最佳条件为提取时间3 h、混悬液醇浓度30%、酸沉pH值2.0,此条件下黄芩苷提取物的得率可达9.758 8%。优化的黄芩苷最佳水提酸沉工艺操作简单、方法可行,为黄芩苷的工业化生产提供了理论参考。

热休克蛋白27通过调节氧化应激影响奶牛胎衣不下发生机制研究

揭示热休克蛋白27(Heat Shock Protein 27,HSP27)可通过参与机体的氧化应激过程从而影响奶牛RFM发生的具体机制。采集奶牛胎衣不下(RFM)组及胎衣正常排出母体组的胎盘组织,应用WB及试剂盒检测HSP27的相对表达以及葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量变化。在建立奶牛子宫内膜上皮细胞(UCE)氧化应激模型的基础之上,使用17-AAG对HSP27的表达进行过表达,检测上述指标的变化。HSP27在RFM组母体胎盘组织中的表达量显著高于胎衣正常排出(P<0.05),大多以磷酸化形式存在,RFM奶牛G6PD、GSH-Px活性以及GSH含量都显著低于胎衣正常排出组奶牛(P<0.05),RFM组GSSG含量显著高于胎衣正常奶牛(P<0.05)。在UCE中,HSP27过表达组G6PD、GSH-Px活性以及GSH含量都显著高于于对照组(P<0.05),HSP27过表达组GSSG含量以及ROS含量都显著低于对照组(P<0.05)。HSP27通过上调细胞内G6PD、GSH-Px活性进而上调GSH含量减轻ROS对细胞造成的损伤,进而影响胎衣排出。

黄芩苷提取工艺的筛选

本研究比较了不同提取方法对黄芩中黄芩苷的提取效果,采用煎煮法、超声法与微波法提取了黄芩中的黄芩苷,通过分光光度计法测定了黄芩苷的含量,比较了3种提取方法的提取效果。结果表明,超声法、煎煮法与微波法提取的黄芩苷含量分别为95.24%、90.15%和86.95%;超声法、煎煮法与微波法提取的黄芩苷得率分别为10.55%、5.46%和4.89%。超声法提取的黄芩苷得率高于煎煮法与微波法,含量接近于黄芩苷标准品含量。

正交试验优化黄芩中黄芩苷超声提取工艺

为了优化黄芩苷最佳超声提取工艺,试验采用正交试验设计,以黄芩苷得率作为考察指标,研究了料液比、超声功率、乙醇浓度、p H值4种因素对黄芩苷超声提取工艺的影响。结果表明:各因素对黄芩苷得率的影响从大到小依次为乙醇浓度、料液比、p H值、超声功率;黄芩苷超声提取工艺最佳条件为,乙醇浓度为55%,料液比为1∶18,p H值为4.0,超声功率为59 k Hz,在此条件下黄芩苷提取物的得率可达16.52%。说明优化出的黄芩苷超声工艺稳定、可行,具有良好的提取效果。

胎衣不下奶牛母体胎盘中有丝分裂原活化蛋白激酶及细胞外信号调节蛋白激酶基因异常表达的分析

目的分析胎衣不下(retained fetal membranes,RFM)奶牛母体胎盘组织中有丝分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK,MEK)及细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK,p42/44 MAPK)的异常表达。方法选取年龄、胎次、体况相近的产后胎衣正常排出和RFM奶牛各3头,分别为N和R组。产后用子宫内膜采样器采集两组奶牛胎盘样本,Western blot法检测样本中MEK、p42/44 MAPK、P-p42/44MAPK蛋白表达水平,RT-qPCR法检测样本中MEK、p42/44 MAPK基因mRNA转录水平。结果与N组比较,R组奶牛胎盘组织中MEK蛋白表达水平显著下调(P <0. 01),p42/44 MAPK蛋白表达水平下调,但差异无统计学意义(P> 0. 05),P-p42/44 MAPK蛋白表达水平显著上调(P <0. 001);R组奶牛胎盘组织中MEK及p42/44 MAPK基因mRNA转录水平均显著下调(P <0. 01)。结论 RFM奶牛母体胎盘组织中MEK与p42/44 MAPK蛋白及m RNA转录水平均明显下调,可能是奶牛RFM发生机制中的关键。

胎衣不下奶牛母体胎盘中血管内皮生长因子A异常表达的分析

目的分析胎衣不下(retained fetal membrane,RFM)奶牛母体胎盘组织中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGFA)的表达情况。方法提取RFM及胎衣正常排出奶牛母体胎盘组织中的总蛋白,采用荧光定量PCR及Western blot法检测两组奶牛母体胎盘组织中VEGFA的mRNA转录及蛋白表达水平。结果与胎衣正常排出组相比,RFM组奶牛母体胎盘组织中VEGFA的mRNA转录及蛋白表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(P <0. 01)。结论发生RFM的奶牛母体胎盘组织中VEGFA表达减少,提示VEGFA可能参与该病的发生发展。