双荧光素酶报告基因系统检测CYP3A4* 1G增强CYP3A4表达的调控作用

目的:探讨CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达的负调控作用。方法:设计合成包含CYP3A4*1G G或A等位基因的一系列基因片段(外显子10与内含子10交界处287和181 bp),构建CYP3A4*1G正向位于CYP3A4启动子上游的荧光素酶报告基因载体,与内参质粒pRL-TK共转染Hep G2细胞,通过双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果:与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在287 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=795.575,P<0.001),且G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在181 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=23.218,P<0.001),而G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在CYP3A4内含子10与外显子10交界处CYP3A4*1G存在与CYP3A4*1G变异无关的CYP3A4启动子的抑制元件,该抑制元件对CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达起负调控作用。

某医院Ⅰ类切口围手术期抗菌药物应用干预调查分析

目的分析Ⅰ类切口围手术期预防性应用抗菌药物干预前后的对比情况,了解干预管理的效果。方法收集某三级医院实施"关于抗菌药物临床应用管理有关问题的通知"前后Ⅰ类切口手术病例,实施干预前:2013年6月~12月共210例与实施干预后2014年6月~12月共240例的抗菌药物使用率、给药时机、用药疗程及用药后效果等相关情况进行对比分析。结果Ⅰ类切口手术抗菌药物的预防使用率从干预前的96.2%降至干预后的13.3%;平均用药疗程从干预前的5.6 d降至干预后的2.1 d;术前30 min^2 h预防使用率从干预前的30.2%提高到干预后的100%;第3代头孢菌素的使用比例由干预前的71.8%降至干预后的13.0%;第1代头孢菌素的使用比例由干预前的8.9%提高至干预后的71.9%。结论实施干预后,Ⅰ类切口手术预防性应用抗菌药物情况逐渐趋于合理,抗菌药物不合理应用现象明显改善,但仍存在手术应用抗菌药物疗程较长的问题,需进一步监管。

Joubert综合征二个家系的临床特征与遗传学分析

目的探讨2个Joubert综合征家系的临床特征与遗传学病因。方法选取2020年11月27日、2021年1月22日于河南省人民医院就诊的2个Joubert综合征家系为研究对象。分析2个家系的临床特征,采集先证者及其家系成员外周血样,提取基因组DNA,进行高通量基因测序分析,应用Sanger测序对致病变异位点进行验证,并对家系2高危胎儿进行产前诊断。结果家系1先证者为胎儿,宫内孕23+5周,超声及磁共振均表现为"小脑蚓部发育不良"及"臼齿征",引产胎儿无明显临床表型异常,基因检测提示其INPP5E基因存在c.812+3G>T和c.1828G>C复合杂合变异,临床诊断为Joubert综合征1型。家系2先证者表现为生长发育迟缓、智力低下、有特殊面容、肌张力低下、右足六趾畸形,磁共振提示小脑发育不良及"臼齿征",先证者ARMC9基因存在c.485C>G和c.1878+1G>A复合杂合变异,临床诊断为Joubert综合征30型。产前诊断提示家系2胎儿ARMC9基因携带c.485C>G杂合变异,新生儿随访临床表型正常。结论INPP5E基因c.812+3G>T及c.1828G>C复合杂合变异和ARMC9基因c.485C>G及c.1878+1G>A复合杂合变异分别是家系1和家系2的遗传学致病原因,上述发现扩展了Joubert综合征的致病变异谱,为遗传咨询和产前诊断提供了依据。

胍法辛缓释片在比格犬体内的药动学研究

目的：建立比格犬血浆胍法辛浓度的测定方法，用于胍法辛缓释片在比格犬体内的药动学研究。方法：6只Beagle犬采用两周期随机交叉实验，灌胃给予胍法辛缓释片受试制剂或参比制剂，以LC-MS／MS法测定血浆胍法辛浓度并计算出相关的药动学参数。结果：Beagle犬灌胃给予胍法辛缓释片受试制剂或参比制剂4mg后，受试制剂和参比制剂中胍法辛在（3.084±1.63）和（2.75±1.08）h达到峰值（5.72±1.78）和（5.82±1.43）ng·mL^-1，t1／2，为（2.60±1.43）和（2.77±1.15）h，AUC0～1。为（42.02416.88）和（41.94±15.06）ng·mL～·h，AUC0～∞为（44.14±17.19）和（44.38±15.20）ng·mL^-1·h。根据AUC0～1和AUC0～∞与参比制剂相比，胍法辛缓释片受试制剂生物利用度分别为（99.3±5.7）％和（98.64-5.4）％。结论：本实验建立的LC.MS／MS方法专属性强，准确度高，分析快速，适用于胍法辛缓释片在比格犬的药动学研究；结果表明胍法辛缓释片受试制剂在比格犬体内的药动学行为与参比制剂相似。