中药单体调控血管内皮细胞自噬干预动脉粥样硬化的研究进展

动脉粥样硬化(AS)是一种慢性持续进展、过程复杂的炎症性血管病变,是心脑血管疾病最主要的病理因素,在中老年人群中普遍存在,且随年龄增长呈渐进性病变,发病率呈逐年上升趋势。血管内皮细胞作为直接接触血液的细胞,具有调节血管生成、免疫反应、营养交换及血管张力等生理学功能。细胞自噬是一个高度保守的亚细胞降解过程,可维持细胞质成分周转,以响应代谢需求,而自噬在AS发生发展过程中具有两面性,适度自噬可保护细胞免受环境刺激的影响,自噬过度或不足又可引发疾病。天然中药中众多活性单体及其衍生物具备抗AS的活性,甚至可影响其获得性耐药,而对自噬的调控多被证实为其潜在的作用机制。旨在探讨内皮细胞自噬水平与AS的关系及中药单体以自噬为靶点对AS的影响。

外泌体中miRNA介导动脉粥样硬化及中药干预作用的研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种多因素导致的慢性炎症性疾病,发病率呈逐年上升趋势,是心血管疾病人群中高死亡率的主要原因,有效调控其发生发展进程可对相关疾病进行早期防治。外泌体作为一种新发现的天然纳米载体和细胞间信使,在调节细胞间通讯中发挥着关键作用,通过细胞间通讯将所携带的内容物运输至邻近或远距离的靶细胞,并通过多种方式影响靶细胞的生物学功能从而干预AS。中药能通过多靶点、多途径整合起效防治AS,其机制可能与调控相关外泌体中的miRNA有关。本文旨在探讨外泌体衍生的miRNA在AS中的调控作用及中药干预的影响。

单采血小板捐献者献血不良反应及防范措施分析

目的分析单采血小板捐献者献血后的不良反应及相关防范措施.方法选择2020年1月至2020年12月收治的1000例单采血小板捐献者作为研究对象,统计对比捐献者献血后的不良反应发生情况,并制定有针对性的防范措施.结果①对比1000例单采血小板捐献者常见不良反应发生情况,出现恶心、呕吐不良反应的捐献者人数最多,占比6.40%,出现体温下降或血压下降不良反应的捐献者人数最少,占比2.90%.②对比186例不良反应捐献者的不良反应程度及相关因素,各不良反应捐献者,因精神因素所致不良反应的人数最多,占比55.91%,因设备因素所致不良反应的人数最少,占比5.91%.③对比186例不良反应捐献者的基本资料,献血次数1次的捐献者出现不良反应发生率更大,达69.35%,体重>60 kg捐献者的不良反应发生几率更大,达57.53%,采集量双份的捐献者不良反应发生更大,达55.38%,数据对比差异有统计学意义(P<0.05).但年龄方面差异无统计学意义,数据对比差异无统计学意义(P>0.05).结论单采血小板捐献者易在献血后,因精神、睡眠、饮食、设备等各方面因素出现不良反应,则面对此类问题,本研究主要提出了加强采血前的筛查工作、加强采血前健康宣教这两项防范措施,以降低献血后不良反应发生几率.

黄连解毒汤含药血清激活PPARγ诱导RAW264.7源性泡沫细胞向M2表型极化

目的:通过体外细胞实验观察黄连解毒汤干预RAW264.7源性泡沫细胞PPARγ表达对细胞极化的影响,探讨黄连解毒汤抗动脉粥样硬化的部分作用机制。方法:氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导RAW264.7源性泡沫细胞;油红O染色法鉴定细胞泡沫化;以一定浓度的黄连解毒汤含药血清干预细胞,流式细胞术鉴定M2型巨噬细胞表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清IL-1β、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定细胞过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ),精氨酸酶1(Arg-1)的蛋白表达水平。结果:油红O染色显示,泡沫细胞模型制备成功。含药血清干预后,与模型组相比,巨噬细胞CD206分子表达阳性数量明显升高(P<0.01)。细胞上清IL-1β、TNF-α的表达下调,IL-10、TGF-β的表达明显增多(P<0.05,P<0.01),PPARγ、Arg-1的蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:黄连解毒汤可通过激活PPARγ促进ox-LDL诱导的RAW264.7源性泡沫细胞向M2表型极化,发挥抗炎作用,这可能是其防治动脉粥样硬化机制之一。

四妙勇安汤含药血清对ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化与自噬的影响

目的:探究四妙勇安汤含药血清对ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化与自噬的影响,并探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:灌胃给予SD大鼠不同剂量四妙勇安水煎液制备含药血清。油红O染色观察泡沫化巨噬细胞脂滴变化;CCK-8法观察含药血清对泡沫巨噬细胞活化的影响;ELISA检测炎症性细胞因子IL-6、IL-10和IFN-γ表达;透射电镜观察细胞自噬水平;免疫荧光标记法检测LC3Ⅱ表达;RT-PCR及Western blot检测细胞AMPK/mTOR/p70S6K通路相关因子表达变化。结果:油红O染色显示,ox-LDL干预后胞质内可见大量橘红色脂滴;CCK-8显示浓度30%以下的含药血清干预泡沫化巨噬细胞OD值无明显变化(P>0.05)。与模型组相比,含药血清刺激后,IL-6、IFN-γ表达降低,IL-10表达升高(P<0.05),含药血清组及雷帕霉素组细胞自噬小体形成增加,LC3Ⅱ、AMPK表达提高,mTOR、p70S6K表达降低(P<0.05)。结论:四妙勇安汤含药血清可调节ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化以及AMPK/mTOR/p70S6K信号通路,抑制炎症反应,诱导细胞自噬,可能是其防治AS的作用机制之一。

旅游新业态背景下的旅游管理人才培养

旅游业是当前我国第三产业中的新兴产业,为我国经济的飞速发展做出了不少有力贡献。当下,我国的旅游业的发展态势主要呈现为旅游业与社会多元产业的融合,从而衍生出了如网红地打卡、温泉旅游等新型多元旅游方式。从我国地理特征考虑,我国地域辽阔、物产丰富、传统文化、美食文化博大精深,所以与旅游业相联结的产业非常多,在这样的大背景下,我国的旅游业人才却是相对匮乏,以至于无法满足旅游市场的需求,这需要我们加大投入力度,加快培养高素质的旅游人才。

姜黄素对脐带间充质干细胞脂毒性损伤及生物功能的影响

目的 探究姜黄素干预对人脐带间充质干细胞(MSCs)脂毒性损伤及生物功能的影响。方法 建立棕榈酸诱导的MSCs脂毒性损伤模型,姜黄素进行干预,CCK-8法检测细胞活性,油红O染色法和甘油三酯(TG)定量检测法观察细胞脂质沉积,RT-qPCR法检测细胞内质网应激相关基因BiP、CHOP、XBP1的表达,Western blot检测细胞BiP、CHOP蛋白表达。另外,体外建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)脂毒性损伤模型,观察姜黄素预处理对MSCs提高HUVECs活性的影响。结果 棕榈酸呈剂量依赖性诱导细胞损伤。姜黄素浓度在5μmol/L以下时对细胞无毒性作用,5μmol/L对棕榈酸诱导的细胞具有保护作用(P<0.05)。棕榈酸诱导后MSCs细胞内可见明显脂滴生成,细胞TG水平升高(P<0.05),BiP、XBP1、CHOP mRNA表达和BiP、CHOP蛋白表达升高(P<0.05);姜黄素干预均可改善以上指标(P<0.05)。另外,棕榈酸诱导后,HUVECs细胞活性降低(P<0.05),姜黄素预处理可进一步提高MSCs对HUVECs细胞活性的保护作用(P<0.05)。结论 姜黄素通过调控内质网应激减轻棕榈酸诱导的间充质干细胞脂毒性损伤,可提高间充质干细胞对内皮细胞脂毒性损伤的保护作用。

阿魏酸对RAW264.7源性泡沫细胞脂代谢及炎症反应的影响

目的:通过体外细胞实验研究阿魏酸对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的泡沫化巨噬细胞脂代谢及炎症反应的影响,并通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)-炎症通路探讨阿魏酸抗动脉粥样硬化(AS)的分子作用机制。方法:ox-LDL诱导RAW264.7源性巨噬细胞形成泡沫细胞,CCK8法观察阿魏酸对泡沫细胞模型细胞活性的干预作用;油红O染色法鉴定细胞泡沫化及阿魏酸对脂质沉积的干预作用;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定细胞PPARγ、TNF-α的蛋白表达水平。结果:CCK8结果显示,ox-LDL呈浓度依赖性诱导细胞损伤;阿魏酸25μM以下对RAW264.7细胞无毒性作用,阿魏酸12.5μM、25μM浓度对ox-LDL诱导的细胞活性下降具有保护作用。油红O染色显示,ox-LDL诱导后细胞内可见红色脂滴,提示泡沫细胞模型制备成功,阿魏酸干预后脂质沉积减少。ELISA结果显示,与正常组比较,ox-LDL组细胞培养上清IL-10浓度降低,IL-1β、TNF-α浓度升高,阿魏酸干预后IL-10浓度升高,IL-1β、TNF-α浓度降低(P<0.05,P<0.01);Western Blot结果显示,与模型组相比较,阿魏酸干预组PPARγ蛋白表达水平升高,TNF-α表达下降,PPARγ抑制剂的加入可削弱阿魏酸的干预作用(P<0.05,P<0.01)。结论:阿魏酸可通过激活PPARγ改善ox-LDL诱导的RAW264.7源性泡沫细胞脂质沉积,改善炎症反应,恢复巨噬细胞功能,这可能是以阿魏酸为主要成分中药及复方治疗AS的分子机制之一。

黄连解毒汤含药血清对ox-LDL诱导的RAW264.7源性泡沫细胞模型自噬及炎症反应的影响

目的:研究黄连解毒汤含药血清对RAW264.7源性泡沫细胞自噬相关通路及上清液中炎症因子表达的影响。方法:用ox-LDL干预RAW264.7巨噬细胞分化为泡沫细胞。制备黄连解毒汤低、中、高剂量组含药血清以及正常组血清干预泡沫细胞。油红O法鉴定细胞泡沫化;MTT法观察含药血清对泡沫化细胞增殖影响;ELISA检测干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-18(IL-18)表达;细胞免疫荧光标记测微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)表达;RT-PCR法测蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)的mRNA表达;Western Blot法测p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K的蛋白表达。结果:油红O染色显示泡沫细胞模型制备成功。与模型组比较,黄连解毒汤含药血清刺激后诱导了LC3Ⅱ的表达,抑制了AKT、mTOR、p70S6K及IFN-γ、IL-18的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:黄连解毒汤含药血清可抑制泡沫化细胞AKT/mTOR/p70S6K信号通路及炎症因子IFN-γ、IL-18的过表达,促进泡沫化细胞自噬及抑制炎症反应,这可能是其防治动脉粥样硬化作用机制之一。