SMARCB1/INI1缺失性肿瘤的研究进展

SMARCB1/INI1蛋白是ATP依赖性SWI/SNF染色质重塑复合物的核心亚单位蛋白之一。SMARCB1/INI1基因失活导致INI1蛋白表达缺失,是软组织肿瘤中最常失活的亚单位。SMARCB1/INI1基因缺失表达最早在恶性横纹肌样瘤(malignant rhabdoid tumor,MRT)、非典型畸胎样/横纹肌样瘤(atypical teratoid/rhabdoid tumor,AT/RT)中发现,随着免疫组化及分子病理的广泛应用,越来越多的MRT-AT/RT谱以外的SMARCB1/INI1缺陷肿瘤被报道,将其定义为SMARCB1/INI1缺失性肿瘤。研究证实,SMARCB1/INI1异常表达包括三种模式:完全缺失、镶嵌表达和表达降低。该文现对SMARCB1/INI1缺失性肿瘤的研究进展作一综述,以期为SMARCB1/INI1缺失相关肿瘤的研究、诊断及治疗提供依据。

siRNA沉默锌指蛋白A20基因促进人类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞焦亡

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默锌指蛋白A20基因对人类风湿关节炎(RA)成纤维细胞样滑膜细胞(HFLS-RA)焦亡的调节作用。方法培养人HFLS-RA细胞系(MH7A细胞),通过RNA干扰技术靶向敲降人类A20基因,合成siRNA-A20,用脂质体法将siRNA-A20(沉默组)和siRNA-NC(阴性对照组)转染MH7A细胞。RT-qPCR检测细胞中NLRP3和Caspase-1 mRNA的表达;Western blot法检测细胞中NLRP3和Caspase-1蛋白表达;ELISA法检测细胞培养液中IL-1β和IL-18的水平;透射电子显微镜(TEM)检测细胞焦亡。结果siRNA-A20组MH7A细胞中NLRP3和Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平与对照组相比均显著增高(P<0.01);siRNA-A20组细胞培养上清液中IL-1β、IL-18浓度与对照组相比均显著增高(P<0.01)。与对照组相比,siRNA-A20组部分细胞肿胀和破裂,细胞膜的完整性也丧失,细胞内出现大面积水肿区,细胞核局部核膜凹陷模糊,异染色质固缩增加,分布不均匀并在核膜周围聚集。结论通过siRNA沉默A20表达后可促进HFLS-RA中NLRP3/Caspase-1介导细胞焦亡,为探讨RA临床治疗新方案提供了实验依据。

探讨课程游戏在幼儿园语言教学中的实践

本文分析了幼儿园语言教学的目标,针对课程游戏在幼儿园语言教学中的作用,总结了目前幼儿园语言教学中运用课程游戏的现状和具体的实践优化策略。目的是为幼儿创设自由的语言学习环境,调动幼儿语言学习的自主性,在游戏课程模式下,提高语言能力,为幼儿未来的学习和发展夯实。

骨化性肌炎11例临床病理学分析

目的探讨骨化性肌炎的临床病理学特征。方法收集11例骨化性肌炎的临床和病理资料,行免疫组化和FISH检测,并复习相关文献。结果11例患者中男性5例,女性6例,年龄7~62岁(中位年龄41),病变发生于大腿7例,手掌部1例,小腿1例,上肢1例,臀部1例。9例有明确外伤史,1例有肌肉注射史,1例否认有外伤史。组织学病变中均见不规则新生骨,部分病例可见未钙化的编织状骨小梁、钙化骨,其中5例可见骨母细胞增生活跃伴梭形纤维细胞增生,2例纤维母细胞有轻度不典型性,可见核分裂象,2例间质可见淋巴细胞散在并局灶聚集。其中1例标本病变典型,由内向外分为中心带、中间带和边缘带,7例病变具有分带倾向。免疫表型:vimentin和SATB2均呈弥漫强阳性,SMA、MSA和desmin呈不同程度阳性,组织细胞和破骨细胞中CD68散在阳性,S-100、SOX-10、β-catenin、CD34、MyoD1、Myoglobin和CK均阴性,Ki-67增殖指数1%~30%。2例行FISH检测,均显示USP6基因断裂阳性。结论诊断骨化性肌炎时需结合病史、临床特征、影像学表现、免疫表型及分子病理检测,注意与骨肉瘤等肿瘤鉴别。

类风湿性关节炎滑膜组织中NLRP3炎性小体及下游因子IL-1β/IL-18的表达及意义

目的检测NLRP3炎性小体及其下游炎性因子IL-1β/IL-18在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜被覆细胞及滑膜间质中的表达及分布情况,探讨NLRP3炎症复合体在RA免疫调节中的作用机制。方法采用免疫组化EnVision法检测30例RA、10例骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者滑膜被覆细胞及滑膜间质中NLRP3、Caspase-1及其下游炎性因子IL-1β及IL-18的表达。采用Spearman秩相关分析RA患者滑膜组织中NLRP3炎性小体及其下游炎性因子IL-1β/IL-18的表达水平与RA临床和实验室参数的相关性。结果 NLRP3在RA、OA组中的阳性率分别为100.00%和70.00%,Caspase-1在RA、OA组中的阳性率分别为100.00%和50.00%,IL-1β在RA、OA组中的阳性率分别为100.00%和60.00%,IL-18在RA、OA组中的阳性率分别为86.67%和0,NLRP3、Caspase-1、IL-1β及IL-18在RA和OA组间差异均有统计学意义( P <0.05)。IL-1β与RF表达呈显著正相关( P <0.05);NLRP3与CRP、RF、Caspase-1及IL-1β表达均呈显著正相关( P <0.05),而与IL-18表达无相关性( P >0.05)。结论 NLRP3/Caspase-1信号通路因子在RA的发病过程中起重要作用,且与疾病的活动性密切相关。IL-1β的分泌主要是由Caspase-1介导产生,提示抑制NLRP3或Caspase-1可有效下调IL-1β的表达,可能是RA潜在的治疗靶点,具有重要的临床指导意义。

骰骨原发性Rosai-Dorfman病1例并文献复习

目的探讨Rosai-Dorfman病(Rosai-Dorfman disease,RDD)的临床病理学特征、免疫表型、分子表型、鉴别诊断及预后。方法回顾性分析1例原发于骰骨RDD的临床病理学特征,并复习相关文献。结果患者女性,49岁,因左足疼痛5个月余,加重1个月入院。影像学检查示骰骨溶骨性破坏,局部皮质变薄。临床特点和影像学表现缺乏特异性,病理检查可明确诊断。病灶穿刺活检病理检查,结果显示,骨小梁之间可见多量组织细胞混合不同数量的淋巴细胞和浆细胞,组织细胞胞质嗜酸性,胞质内吞噬数量不等、形态完整的淋巴细胞、浆细胞和中性粒细胞;免疫表型:CD163、S-100、溶菌酶(Lysozyme)、α1-抗胰凝乳蛋白酶(α1-antichymotrypsin,AACT)均阳性,CD1a及Langerin均阴性,结合临床及免疫表型,考虑为RDD。后患者再次入院行病灶刮除植骨,术中冷冻及其剩余组织均支持RDD诊断。患者术后3个月复查未见病变复发。结论 RDD是一种自限性疾病,临床表现复杂多样,发生于骨的RDD以溶骨性破坏为主,临床及影像学表现无特异性,易误诊为慢性非特异性炎症性病变、结核、肿瘤等,病理诊断是目前唯一能够确诊RDD的方法,结合临床病理特征及免疫表型有助于诊断;骨RDD以手术切除为主,应适当扩大手术范围,彻底清除病变组织以预防复发。

替米沙坦对高脂饲养OLETF大鼠心肌重构及PPARγ表达的影响

目的探讨替米沙坦对高脂饲养的OLETF大鼠心肌重构及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响。方法 4周龄雄性OLETF大鼠28只,高脂喂养。22周龄时称质量后随机分为替米沙坦组[O-T组,5mg/(kg·d),n=10],吡格列酮组[O-P组,10 mg/(kg·d),n=8]及无干预对照组[O-C组,等体积生理盐水,n=10],连续给药26周;选取性别、周龄匹配的正常非糖尿病LETO大鼠为空白对照(LETO组,n=12)。分别于22周龄和48周龄时行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)检测大鼠2型糖尿病(T2DM)和糖耐量异常(IGT)发病情况。48周龄时给药结束后每组随机抽取5只大鼠行高胰岛素-正糖钳夹实验,计算60~120 min的葡萄糖输注速度(GIR60-120)。实验结束时处死动物,分离心脏,称量心脏质量(HW)和体质量(BW),以HW/BW判定心肌肥厚情况。ELISA法测定血清PPARγ、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平,放射免疫法测定血清脂联素水平。Real-time PCR检测心肌组织中PPARγ1、PPARγ2及IL-6 m RNA表达水平,Western blot法检测心肌组织中PPARγ、脂联素、IL-6及核因子(NF)-κB蛋白表达水平。光镜和电镜下分别观察各组大鼠心肌常规病理改变(HE染色、Masson染色、PAS染色)和超微结构改变。结果 22周龄时,各组大鼠均未发生T2DM及IGT。48周龄时O-C组7只发展为T2DM,2只IGT;O-T组1只T2DM,3只IGT;其他2组未见T2DM和IGT。48周龄时,O-P组、O-T组GIR60-120及HW/BW均明显低于O-C组(P<0.05),同时O-T组大鼠收缩压(SBP)、舒张压(DBP)较其他3组明显下降(P<0.05)。与O-C组相比,O-T组血清IL-6、TNF-α水平下降,脂联素和PPARγ水平则明显升高(P<0.05);O-P及O-T组间上述指标差异均无统计学意义。Real-time PCR及Westen blot结果显示,与O-C组相比,O-T组PPARγ1 m RNA表达升高、IL-6表达降低,O-P组及O-T组PPARγ、脂联素的蛋白表达均明显升高,而NF-κB及IL-6蛋白表达下降(均P<0.05)。光镜和电镜下可见O-C组心肌细胞受损严重,纤维排列紊乱,胞浆溶解,心肌间质中出现大量胶原纤维增生,糖原和脂褐素沉积,肌原纤维断裂和核周扩张,心肌线粒体明显受损甚至溶解,O-P组和O-T组心肌纤维排列整齐,无明显糖原沉积,心肌超微结构损害明显减轻。结论小剂量替米沙坦可上调高脂饲养OLETF大鼠循环及心肌组织中PPARγ的表达,减轻心肌纤维化,延缓心肌重构。

hTSHR188-403bp基因免疫BALB/c小鼠建立Graves’病动物模型

目的:构建pcDNA3.1/hTSHR(188～403bp)重组质粒,并将其基因免疫BALB/c小鼠建立Graves’病动物模型。方法:RT-PCR扩增hTSHR膜外区188～403bp,与pcDNA3.1载体连接,构建重组质粒pcDNA3.1/hTSHR,用酶切、PCR及测序方法进行鉴定。于1、4、7、9、10周将重组体免疫实验组小鼠,对照组注射生理盐水,0、6、11周取血,检测血清TRAb、T4、TSAb、TBAb。取甲状腺常规病理切片,HE染色镜检。结果:构建的重组质粒经酶切、PCR鉴定证明插入方向正确,测序结果与GeneBank中hTSHR的相应片段序列相同。免疫组T4、TRAb和TSAb水平均从第6周开始显著升高(P<0.05),TBAb差异无统计学意义(P>0.05),对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。实验组甲状腺病理检查结果,显示滤泡增生,胶质浓缩等Graves’病的病理表现,对照组形态正常。结论:构建了重组质粒pcDNA3.1/hTSHR(188～403bp),成功建立了类Graves’病动物模型。

hTSHR胞膜外区片段真核表达载体的构建和表达

目的：构建人类促甲状腺激素受体（hTSHR）胞膜外区氨基端的两个片段hTSHRf（aa29-100）、hTSHRe（aa101-278）的真核表达载体pcDNA3.1-hTSHRf和pcDNA3.1-hT-SHRe,并在CHO细胞中进行表达。方法：RT-PCR法从人甲状腺正常组织的cDNA中扩增hTSHRf和hTSHRe,定向插入真核表达载体pcDNA3.1（D）/V5-His-TOPO中,经酶切、PCR和测序鉴定后通过脂质体介导转染至CHO细胞中进行表达,RT-PCR扩增转染细胞的cDNA、Western blot分别鉴定hTSHR在CHO细胞中mRNA和蛋白水平的表达。结果：RT-PCR分别扩增两个片段的阳性克隆株,所得片段大小与预期一致,经Western blot鉴定,相对分子质量（Mr）分别为11900、23600左右,与预期的大小相符。结论：真核表达载体pcDNA3.1-hTSHRf和pcDNA3.1-hTSHRe构建成功,RT-PCR和Western blot检测证实重组质粒能在CHO细胞中高效表达,为进一步研究pcDNA3.1-hTSHRf和pcDNA3.1-hTSHRe在体内的基因表达,建立Graves＇病的动物模型奠定了基础。

天津市公安民警代谢综合征的流行病学特征及相关危险因素分析

目的:了解目前天津市公安民警代谢综合征(metabolic syndrome,MS)的流行病学特征及其相关危险因素,为制定天津市公安民警MS预防控制措施提供科学依据。方法:采用横断面的调查方法,对4160名公安民警进行调查。在进行问卷调查的同时,进行体检及采集空腹血样检测相关指标,分析代谢综合征的发生情况;采用非条件Logistic回归进行相关危险因素分析。结果:天津市公安民警MS患病率为17.52%,年龄构成标化患病率为15.16%,MS的相关危险因素为女性(OR=1.927)、高龄(OR=1.329)、肥胖(OR=1.461)、有糖尿病家族史(OR=2.356)和吸烟(OR=3.742)。结论:天津市公安民警MS患病率水平较高,针对危险因素应采取综合有效的干预措施。

电子执法环境下驾驶行为与事故特征分析

针对我国电子执法环境下驾驶行为特性、交通流运行特性等研究缺乏,无法制定安全保障措施的问题,借助交通调查、资料分析等方法,对有无电子执法时交通违法行为特征、变速行为特征和交通事故特征的差异及原因进行了分析.结果表明:电子执法有助于减少交通违法行为,但会增加刮撞行人的交通事故并加剧交通事故的严重程度;电子执法环境下,营运车辆交通违法的比重明显上升、低龄驾驶员构成了道路交通违法的主体,信号交叉口绿灯末期存在严重的交通事故隐患;公路电子执法存在无法根治超速行驶的问题,同样存在交通事故隐患.鉴于此,从执法前的宣传、教育到执法过程中的安全保障设施建设提出了较完善的解决方案,以确保电子执法环境下的行车安全.

不同交通监控设施对车辆闯红灯行为的影响研究

通过对哈尔滨市4个不同交通监控设施的交叉口驾驶员闯红灯违法率的调查和对比,发现安装电子执法设施的可以分别降低绿灯末期、绿灯初期闯红灯违法率15%和30%;安装交通信号倒计时器对绿灯末期闯红灯违法率无显著影响,但会增加绿灯初期闯红灯违法率150%以上;而同时安装了电子执法与交通信号倒计时器,可以分别降低绿灯末期、绿灯初期闯红灯违法率17.6%和30.4%。建议同时安装电子执法与交通信号倒计时器以降低绿灯末期与绿灯初期的驾驶员闯红灯违法率.

电子执法对信号交叉口交通违法与交通事故的影响

为改进我国现有电子执法成效评估的对比分析方法存在的缺陷,在考虑均值回归与交通管理水平提升等影响因素后,借助概率论中的误差分析法,提出电子执法对交通事故影响的综合分析法.研究表明,我国道路电子执法对交通事故的影响要大于国外发达国家,电子执法在降低我国道路交通事故方面效果更显著,但我国电子执法在运行过程中会明显增加刮撞行人的交通事故并加剧交通事故的严重程度,导致死伤人数的比例大幅上升,与国外发达国家电子执法实施后仅增加了追尾事故的数量有较明显区别.综合分析法克服了对比分析法高估或低估电子执法对交通违法和交通事故影响的缺陷,评价结果客观,有利于推进电子执法设施应用的范围和深度.

初发2型糖尿病合并高血压患者血清内脂素、网膜素和TNF-α水平的变化

目的探讨初发2型糖尿病(T2DM)合并高血压患者血清内脂素、网膜素和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的变化及意义。方法初次诊断为T2DM的患者106例,分为T2DM组54例和T2DM合并高血压组(DM+H组)52例。所有受试者测定血压、身高、体质量、血脂、尿酸,并行口服葡萄糖耐量试验与胰岛素激发试验,同时取血测定空腹与服糖120min血糖、胰岛素、内脂素、网膜素和TNF-α水平。计算体质指数(BMI)和稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果 (1)与T2DM组相比,DM+H组空腹及服糖120min血清内脂素和TNF-α水平明显升高,网膜素水平明显降低(P<0.05)。(2)内脂素和TNF-α均与收缩压、腰围、空腹胰岛素和HOMA-IR呈正相关,而网膜素与舒张压、腰围、空腹胰岛素和HOMA-IR呈负相关。(3)多元线性回归分析显示,空腹胰岛素水平是空腹与高糖刺激下内脂素的影响因素,而收缩压则主要影响空腹内脂素水平;空腹网膜素主要受HOMA-IR和舒张压影响,而腰围、HOMA-IR、血尿酸是高糖刺激下血清网膜素的影响因素;空腹与120minTNF-α的影响因素分别为BMI和空腹胰岛素。结论初发T2DM合并高血压患者血清内脂素、网膜素和TNF-α水平明显改变,其可能通过多种途径参与了糖尿病并发高血压的病理过程。

替米沙坦对早期高脂喂养OLETF大鼠代谢综合征相关因素的影响

目的观察替米沙坦对早期高脂喂养自发性2型糖尿病(T2DM)OLETF大鼠代谢综合征相关因素的影响。方法 OLETF大鼠48只,根据OGTT 2 h血糖和体重随机分为5组:替米沙坦组(L)、替米沙坦联合二甲双胍组(LM)、吡格列酮组(P)、二甲双胍组(M)和高脂对照组(O)。LETO大鼠12只,为非糖尿病对照组(NC)。22周龄对未发生T2DM大鼠实施药物干预。48周龄观察代谢综合征相关指标:T2DM发病率、FFA、血脂及体重变化。结果 L组糖尿病发病率与O组比较有下降趋势,但差异无显著性(P=0.085)。LM组糖尿病发病率与O组比较差异有显著性(P=0.035);FFA、TC、TG、LDL均低于O组,差异有显著性(P分别为0.040、0.023、0.037和0.000)。P组体重高于其他各组,差异有显著性(P<0.05)。结论替米沙坦联合二甲双胍能够降低高脂喂养OLETF大鼠T2DM发病率,并调节FFA及血脂水平且不增加OLETF大鼠体重,从而改善代谢综合征状况。

肾素-血管紧张素系统阻断剂与代谢综合征患者脂联素水平的关系

目的探讨肾素-血管紧张素系统(RAS)阻断剂与代谢综合征(Mets)患者血浆脂联素水平的关系。方法53例Mets患者随机分为3组,ACEI组15例予贝那普利(5 mg/d),ARB组15例予坎地沙坦(4 mg/d),对照组23例避免应用影响RAS的相关药物,服药期为4周,检测并比较治疗前后血浆脂联素(APN)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酐(CR)、丙氨酸转氨酶(ALT)、胆红素(BIL)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的水平。结果ACEI组的FBG和LDL-C、ARB组的CR治疗后低于治疗前(P<0.05);ACEI组和ARB组APN水平治疗后高于治疗前(P<0.01),而3组中FINS、HOMA-IR、TC、ALT和BIL在治疗前后变化差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前CR、TC、ALT和BIL是APN水平的影响因素;治疗后FBG和TC是APN水平的影响因素。结论APN可能是ACEI和ARB治疗Mets及其并发症的潜在靶点。

超重人群皮下和网膜脂肪组织中脂联素基因表达的研究

目的:探讨脂联素(APN)在皮下(SC)和网膜(OM)脂肪组织中的mRNA表达水平与肥胖的关系。方法:实时荧光定量PCR法检测48例超重[体质量指数(BMI)≥25kg/m2)]和40例正常体质量人群(BMI<25kg/m2)腹部SC和OM脂肪组织中APN mRNA的表达,并测定血糖、胆固醇和HOMA-IR等生化指标。结果:在整体人群中,OM脂肪组织APN mRNA表达量均明显高于SC脂肪组织(P<0.05);OM脂肪组织APN mRNA表达量与BMI、腰臀比(WHR)和胆固醇(TC)水平呈负相关(r分别为-0.249、-0.143、-0.148,P<0.05);SC脂肪组织APN mRNA表达量与BMI、WHR、TC和三酰甘油(TG)水平呈负相关(r分别为-0.281、-0.180、-0.247、-0.172,P<0.05),并与同一个体的OM脂肪组织APN mRNA表达量呈正相关(r=0.192,P<0.05)。结论:APN的基因表达量内脏高于外周,提示循环APN可能主要来源于内脏脂肪组织。

原代培养的人皮下和网膜前脂肪细胞分化特性比较

目的探讨原代培养的人皮下和网膜前脂肪细胞在体外以无血清培养基诱导分化条件下细胞特性的差别。方法选择8例行择期电切开手术的健康成年女性腹部皮下和网膜分离前脂肪细胞,进行原代培养。细胞在无血清培养基诱导分化的条件下体外培养14d。观察分化后不同部位来源细胞的细胞内脂质含量和前脂肪细胞分化标志物——甘油-3-磷酸脱氢酶的活性。细胞的胰岛素敏感性通过葡萄糖消耗试验进行测定。结果诱导分化后,人皮下和网膜前脂肪细胞的胰岛素敏感性指标葡萄糖消耗量和细胞晚期分化指标G3PDH活性差异均无统计学意义(P>0.05)。网膜来源的前脂肪细胞分化后脂质含量指标油红O高于皮下来源细胞(t=2.506,P=0.025)。结论在同等分化条件下,网膜前脂肪细胞较之皮下来源细胞的脂肪含量增加,提示前脂肪细胞的分化存在部位特异性。

原发性血管内肌周皮细胞瘤1例

患者女性,54岁,10年前无明显诱因出现间断性右髋部疼痛,加重3年,行贴膏药、针灸等治疗,无明显减轻。专科检查:右大腿近端外侧略肿胀,局部压痛及叩击痛明显,局部皮肤无发红、无破溃、皮温不高、无异常静脉怒张及动脉搏动。右下肢肌力正常。影像学表现:MRI示右股骨大转子外侧皮下、肌间富血供结节影,考虑良性病变;B超示肿物为实性、低回声结节,边界清楚,内部血流信号较丰富。患者入院后完善相关检查及术前准备,在硬膜外麻醉下行“肿物切除术”,术中切开大腿阔筋膜张肌显露股外侧肌肉和臀大肌之间的间隙,达大转子外侧,肿物易于分离,完整切除肿物后送病理检查。