多核细胞法和Brdurd法检测辐射诱发体细胞HPRT基因突变的比较研究

目的 研究放射性核素内照射诱发体细胞HPRT基因位点突变及其剂量 -效应关系 ,比较不同方法对HPRT基因位点突变的检出率。方法 给大鼠尾静脉注射晚期混合裂变产物后不同时间心脏穿刺取血。用多核细胞法和Brdurd法分别检测HPRT基因突变细胞 ,计算突变率 ,拟合出辐射诱发HPRT基因位点突变的剂量 -效应关系函数。结果 用多核细胞法检测的放射性核素内照射诱发HPRT基因位点突变率 (y ,‰ )和剂量 (D ,cSv)相关函数为y =1 14 98+0 1199lnD,r =0 970 6 ;用Brdurd法检测的相关函数为 y =6 5 310× 10 -2 +3 4 5 4 2× 10 -3 D ,r =0 984 6。多核细胞法检测HPRT基因位点突变检出率比Brdurd法高 11～ 17倍之多。结论 体细胞HPRT基因对电离辐射敏感 ,有可能作为辐射生物剂量计。

成人外周血淋巴细胞HPRT基因突变率及其影响因素的研究

目的 研究年龄范围在 2 1～ 5 0岁健康成年人外周血淋巴细胞HPRT基因位点突变率及其影响因素。方法 用多核细胞法检测淋巴细胞HPRT基因位点突变率 ,拟合HPRT基因位点突变率与年龄的相关函数。结果 成年人淋巴细胞HPRT基因位点突变率与年龄的相关函数为 :y =0 .75 5 5 +0 .0 44 0x ,r =0 .982 9(P <0 .0 5 )。吸烟对健康成人HPRT基因突变率有影响 (P <0 .0 5 ) ,而不同性别间无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 成年人HPRT基因位点突变率随年龄增长而增加 ,年递增率为 0 .0 44 0‰ ;吸烟对HPRT基因突变有影响 ,而性别则无影响。

放射性核素内照射诱发体细胞HPRT基因突变

[目的 ]研究放射性核素内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞次黄嘌呤乌嘌呤磷酸核糖转移酶 (HPRT)基因位点突变及其剂量 效应关系。并比较多核细胞法和 5 溴脱氧尿嘧啶核苷 ( 5 Brdurd)法测定HPRT基因位点突变的检出率。 [方法 ]用多核细胞法和Brdurd法研究的两批大鼠均分别随机分为 1个对照组和 4个不同剂量组 ,每组 6只。对照组尾静脉注射生理盐水(pH 3 0 ) ,注射容积为 0 5ml/10 0g体重 ,注射后 1d心脏穿刺取血。多核细胞法的不同剂量实验组大鼠尾静脉注射比活度为 3 6 4× 10 5Bq/ml放射性晚期混合裂变产物 ,注射容积同对照组 ,于注射后 1、3、6和 9d心脏穿刺取血。Brdurd法的不同剂量实验组大鼠尾静脉注射比活度为 3 40× 10 5Bq/ml的放射性晚斯混合裂变产物 ,注射容积同前 ,于注射后 1、5、15和 2 0d心脏穿刺取血。每鼠分别取抗凝血 1 5ml于离心管中 ,加入Hank s液 8ml,混匀后 15 0 0r/min离心 10min ,去上清后再重复洗涤一次。将沉积细胞悬浮于生长培养液 (内含 90 %RPMI16 40 ,10 %灭活小牛血清 ,庆大霉素 10 0IU/ml,PHA适量 )中至 1 5ml ,取上述血细胞 0 5ml接种于 4 5ml生长培养液中。每个样本培养 2瓶 ,其中 1瓶加入 6 巯基乌嘌呤 ( 6 TG)。终浓度为 1× 10 -5mol/L。①多核细胞法 :将样本?

晚期混合裂变产物内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞hprt基因位点突变与染色体畸变的研究

应用多核细胞法研究晚期混合裂变产物内照射诱发大鼠外周血淋巴细胞ｈｐｒｔ 基因位点突变， 并与染色体畸变进行比较。结果表明， 淋巴细胞ｈｐｒｔ 基因位点突变不仅随内照射剂量增加而增加， 呈现出良好的正相关， 而且与染色体畸变之间亦呈现出较好的相关性。说明辐射诱发ｈｐｒｔ 基因位点突变和染色体畸变的剂量效应关系动力学相似。因此ｈｐｒｔ 基因位点突变有可能成为生物剂量计。

低浓缩铀对机体急性损伤效应的研究

本研究以肾脏和骨髓作为靶器官,以血清尿素氮浓度和外周血淋巴细胞微核出现率作为指标,观察低浓缩铀对机体的急性损伤效应。结果表明:低浓缩铀引起血清尿素氮浓度和外周血淋巴细胞微核出现率显著升高的剂量,注射后第1天为1.00mg/kg;第4天为0.50mg/kg。微核出现率的峰值在注射后24小时。血清尿素氮浓度与低浓缩铀注射剂量的函数,注射后第1天为y=2.15 log^x;第4天为y=9.02 log^x。血清尿素氮浓度与注射后时间的函数为y=13.82 logx。

晚期混合裂变产物胃肠道内阻吸收效果的研究

报道两种阻吸收药物普鲁土蓝和褐藻酸钠对晚期混合裂变产物自大鼠胃肠道内阻吸收作用。结果表明，两种阻吸收药物不仅有明显阻吸收作用，而且两种药物伍用，对阻吸收效果有相加作用。阻吸收疗效与给药剂量和给药时间有密切关系。如果在灌胃阻吸收药物的同时肌注促排药物DTPA－CaNa2盐和喹胺酸，反而会增加混合裂变产物自胃肠道内的吸收。

钷在机体内的生物转运动力学研究 Ⅱ.钷在体内分布、滞留与排泄的动力学

研究了钷在大鼠体内分布、滞留与排泄的动力学。结果表明,吸收的钷主要沉积在骨骼中,其次是肝、肾、脾和肺。钷在全身和重要沉积器官中的滞留分数随时间变化,均可用两项指数函数描述,给肺部直接注入钷,肺钷滞留函数可用单项指数函数表示。体内钷可经尿和粪排除。开始以尿排除为主,嗣后以粪排除为主。经尿排除钷的分数随时间变化,可用两项指数函数描述;经粪尿共同排除钷的分数随时间变化,可用幂函数描述。

用BrdU法研究γ射线外照射诱发外周血淋巴细胞HPRT基因突变

用 5 -溴脱氧尿嘧啶 (BrdU)法检测 ,不同剂量γ射线外照射诱发正常人外周血淋巴细胞HPRT基因突变频率 (MFs) ,并研究其剂量效应关系。抽取正常成年人静脉血 ,分成 5组 ,分别用 0 .0— 4 .0Gy的不同剂量γ射线照射 ,全血培养后用BrdU法检测淋巴细胞HPRT基因MFs。结果表明 ,正常人外周血淋巴细胞的MFs随外照射剂量的增加而上升 ,且剂量效应关系符合线性平方模型。研究证明了BrdU法是一种快速、简便、较敏感的检测外照射诱发HPRT基因突变的方法 ,HPRT基因辐射突变可作为生物剂量计。

克隆法研究辐射诱发人外周血淋巴细胞HPRT基因突变

本文目的是用克隆法研究γ射线诱发人外周血淋巴细胞次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸抗糖转移酶(HPRT)基因突变的量效关系。从健康成年人外周血分离淋巴细胞 ,每份分成两等份 ,其中一份加滋养细胞 ,另一份不加滋养细胞 ,种于 96孔板 ,进行淋巴细胞的克隆和突变细胞的筛选 ,比较二者结果 ;剂量效应关系实验为取一健康成年男子外周血 2 5mL分成 5等份 ,分别用 0、1、2、4和 6Gy照射 ,分离淋巴细胞 ,种于 96孔板 ,不加滋养细胞条件下观察淋巴细胞的克隆效率和HPRT基因突变频率的变化。结果表明加滋养细胞组的克隆效率高于不加滋养细胞组 (p <0 0 1 ) ,但二者HPRT基因突变频率无差别 (p >0 0 5 )。在一定剂量范围内 ,人外周血淋巴细胞克隆效率与照射剂量呈负相关 。

晚期混合裂变产物内照射诱发体细胞 HPRT 基因位点突变的剂量效应关系研究

运用多核细胞法及胞质分裂阻断微核（ＣＢＭＮ）法对５组Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因位点突变频率及微核进行检测。实验组静脉注射放射性比活度为３．６４×１０５Ｂｑ／ｍｌ的晚期混合裂变产物后１至９ｄ心脏穿刺取血。结果表明：静注后第１ｄ，累积剂量达１．７３ｃＳｖ时，与对照组相比，ＨＰＲＴ位点突变频率、、微核率均已显著增加（ｐ＜０．０１）；累积剂量与ＨＰＲＴ位点突变频率、微核细胞率、微核率间均可拟合成剂量效应函数Ｙ＝ａ＋ｂｌｎＸ；ＨＰＲＴ基因突变检测可望成为生物剂量计。

电离辐射致中国仓鼠卵巢(CHO)细胞凋亡的研究

为研究X射线致中国仓鼠卵巢(CHO)细胞凋亡,探讨电离辐射的生殖毒性机理,用2—20GyX射线照射CHO细胞株,通过荧光显微镜、AnnexinV/PI双染色法结合流式细胞仪,检测和观察细胞凋亡及其形态学改变。结果表明,X射线照射后24、48、72h均出现细胞凋亡,并随照射剂量增加凋亡细胞数亦增加。但照射后48h和72h细胞凋亡更为明显(p<0.05)。凋亡的CHO细胞在荧光显微镜下,观察到细胞核内染色质的不规则聚集、核固缩和周边化,有的呈月牙形,甚至出现凋亡小体等一系列凋亡细胞形态特征。结果显示电离辐射引起生殖细胞严重的DNA损伤,因无法修复继而导致细胞凋亡。

双色荧光原位杂交检测放疗后鼻咽癌患者外周血淋巴细胞染色体畸变

目的 :评价辐射诱发的染色体畸变作为癌患风险评估指标的可行性。方法 :应用双色荧光原位杂交 (FISH)技术检测 10例放疗后及 6例放疗前鼻咽癌患者外周血淋巴细胞染色体畸变并与常规法比较。结果 :放疗后 1～ 10年 ,鼻咽癌患者淋巴细胞染色体易位率、双着丝粒体率仍显著高于放疗前对照组的相应数值 (P <0 .0 0 1)。患者的易位率约为双着丝粒体率的 3 .5倍 ,照后 3年以上患者染色体易位率与照后小于 3年患者的易位率之间差别无显著性 (P >0 .1) ,而照后 3年以上患者染色体双着丝粒体率显著低于照后小于 3年患者的双着丝粒体率 (P <0 .0 0 1)。 结论 :稳定性染色体畸变 (易位 )在照后相当长时间 (10年 )仍可保持较高百分率 ,有望成为癌患风险评估的生物标志。

克隆法检测大鼠体细胞HPRT基因突变探讨

目的 探讨克隆法检测大鼠体细胞HPRT基因突变 ,为后续研究打下基础。方法 参照文献提供的克隆法 ,靶细胞为外周血淋巴细胞或脾淋巴细胞时 ,选取自体或异体的外周血淋巴细胞或脾淋巴细胞作为滋养细胞 ,比较相应的克隆率。结果 无论靶细胞为外周血淋巴细胞还是脾淋巴细胞 ,自体来源的滋养细胞组的克隆率高于异体来源的滋养细胞组 ,脾淋巴细胞为滋养细胞时克隆率较高。结论 自体来源的滋养细胞优于异体来源的滋养细胞 。

晚期混合裂变产物的胃肠道阻吸收及促排研究

本文采用液体闪烁测定法研究了褐藻酸钠和普鲁士蓝对晚期混合裂变产物的胃肠道阻吸收作用。结果表明：褐藻酸钠和普鲁士蓝对晚期混合裂变产物均有阻吸收作用，以普鲁士蓝的作用为明显，血液、肝、肾、脾、骨和尿液中的放射性比活度均比对照组低。它们两者同时使用效果更佳，如再同时给予促排剂ＤＴＰＡ或喹胺酸在增加已吸收的核素自尿中排除的同时，也增加了组织中的放射性活度，说明促排剂增加了晚期混合裂变产物自肠道的吸收。Ｐ＜０．０１组有差异，余无明显差异；尿、肝、肾各组间两两比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；脾除与对照组比有明显差异，余无明显差异；骨骼与对照组比均有显著性差别，除实验３组外，实验５组与其他组有显著性差别，余组间无显著性差别。讨论褐藻酸钠是锶的特异性阻吸收剂，普鲁士蓝是铯的特异性阻吸收剂［３］。在分别使用的情况下，褐藻酸钠只能对混合裂变产物中的锶阻吸收而不能阻止其他核素的吸收，而普鲁士蓝也只能阻止混合裂变产物中铯的吸收，所以它们分别使用能不同程度地降低组织和尿中混合裂变产物的含量。血液中的混合裂变产物含量除实验５组外，余无明显差异，这与锶和铯进入血液后以离子态或与有机酸结合成络合物形式较快地转移至器官组织特性有关。肌注?

晚期混合裂变产物内照射诱发体细胞HPRT基因位点突变率与剂量率关系的研究

运用多核细胞法及胞质分裂阻断微核（CBMN）法对5组Wistar雄性大鼠外周血淋巴细胞HPRT基因位点突变频率及微核进行检测。实验组注射不同放射性比活度的晚期混合裂变产物，在达到累积剂量近似相等（约4.66cSv）时心脏穿刺取血。结果显示，在总累积剂量近似相等条件下，HPRT位点突变频率、微核细胞率、微核率均随剂量率的增加而增加，4个剂量率点间的HPRT位点突变频率、微核细胞率和微核率总体上均有显著差异（P＜0．01）。HPRT基因位点突变频率、微校率与剂量率之间的关系可分别用函数Y=a＋blnX表示。HPRT位点突变频率与微核率间存在线性相关。

^(60)Coγ射线照射对AT细胞周期进程的影响

目的 研究AT细胞辐射高敏感性与细胞周期进程间的联系。方法 用细胞流式术检测2 Gy60Coγ射线照射后不同时间及不同剂量照射后GM0639和AT5BIVA两种细胞的细胞周期分布状况。结果 GM0639细胞受2 Gy60Coγ射线照射后,从照射后即刻至第24小时,G2／M细胞比例逐步增大,出现了G2阻滞,0~6 Gy60Coγ射线照射24 h后,G2／M细胞比例随剂量增大而增大;AT5BIVA受2 Gy60Coγ射线照射后不同时间及0-6 Gy60Coγ射线照射24 h后,G2／M细胞比例减小,不发生G2阻滞。结论 ATM基因突变所导致的细胞周期关卡丧失及DNA修复能力降低是AT细胞辐射高敏感性的重要原因。

双色荧光原位杂交检测放射性工作者的染色体畸变及剂量估算

应用荧光原位杂交技术检测 13例放射性工作者的外周血淋巴细胞染色体易位率及双着丝粒体率 ,并根据易位率进行生物剂量估算。结果表明 ,13例放射性工作者的平均易位率、双着丝粒体率都显著高于对照组 (P <0 0 1) ,13例放射性工作者的平均易位率约为双着丝粒体率的 8 44倍 ,两者差异显著(P <0 0 1) ,且两者无相关性 (r =0 44 3) ,除 1例核医学工作者外 ,其余 12例的生物剂量估算范围在0 6 2～ 2 17Gy之间。提示 。