4种红芪多糖对实验性糖尿病小鼠血糖的影响

目的:比较4种红芪多糖的降血糖作用,筛选出降血糖效果最佳的红芪多糖。方法:腹腔注射四氧嘧啶造成实验性糖尿病小鼠模型,灌胃给予不同红芪多糖,从中筛选出降血糖效果最佳的红芪多糖,将上述多糖按不同剂量分别灌胃给药,测定小鼠血糖值和糖耐量。结果:红芪多糖Ⅲ能显著改善糖尿病小鼠全身症状、降低血糖水平并提高糖耐量。结论:红芪多糖Ⅲ对实验性糖尿病小鼠的降血糖、改善糖尿病症状作用最显著,并有明显的量效关系,是一种值得开发利用的植物多糖。

红芪多糖的提取分离纯化及组成分析

目的获得红芪多糖纯品并且得到其单糖组成。方法通过分步醇沉法和凝胶柱色谱获得红芪多糖纯品,用气相色谱法测其组成。结果红芪多糖1和2经Sephadex G-200纯化后分别得到两个组分,红芪多糖3通过Sephadex G-25得到两个组分;红芪多糖1,2,3均由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖五种单糖组成。结论分步醇沉法获得的三种多糖1,2,3经Sephadex G-200和Sephadex G-25纯化可获得红芪多糖纯品,GC法测其组成方法简便可行。

红芪多糖的纯化及初步结构鉴定

目的研究红芪多糖的分离纯化及初步的结构。方法采用超声辅助提取多糖,比较Sevag法、三氯乙酸法和三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白的效果,并用GC、TLC及IR分析多糖的初步结构。结果三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白,经Sepha-dexG-25柱层析分离纯化后得红芪多糖2(HPS-2),HPLC确定为均一多糖,糖含量为98.02%,糖组成分析表明其含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖,摩尔比为0.3∶0.2∶2.7∶16.1∶2.0。结论 HPS-2是一种以β苷键为主的吡喃型杂多糖。

党参不同提取部分活性比较

目的:比较研究党参不同溶剂提取部分的药理活性。方法:系统溶剂法提取分离得到四个部分,分别为石油醚部分、乙酸乙酯部分、乙醇部分和水部分,通过耳廓致炎法、镇静催眠实验、炭粒廓清法、消炎痛致胃溃疡法对四个部分进行药效学比较研究。结果:四个部分的极性不同,所包含的化学成分不同,各部分的药理活性亦不相同。结论:石油醚部分抗炎效果最为显著,水部分增强免疫力作用最为显著,乙酸乙酯部分抗胃溃疡活性最为显著,而乙酸乙酯部分和水部分具有显著的中枢抑制作用。

红芪和黄芪对去卵巢致大鼠骨质疏松防治作用的研究

目的探究红芪和黄芪乙醇提取物(HE/AE)对卵巢摘除致大鼠骨质疏松的防治作用。方法选用72只SD雌性大鼠随机分为9组,每组8只,分别为:假手术组、模型组、阳性药组(戊酸雌二醇0.2mg/kg)、红芪醇提组(HE1~HE3)、黄芪醇提组(AE1~AE3)。术后两周每日灌胃一次,连续给药12周后扫描全身骨密度并采集血清测定碱性磷酸酶(AKP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)的活力及血钙、血磷水平;剖取右股骨测定骨密度及生物骨力学指标。结果 HE/AE各组均能增加去卵巢所致骨质疏松大鼠全身及右股骨骨密度、改善生物骨力学指标,升高大鼠血清中降低的AKP活力、血钙及血磷水平,降低了StrACP活力,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论 HE/AE对去卵巢所致雌性大鼠骨质疏松均具有明显的防治作用。

高效液相色谱法同时测定参橘止咳滴丸中肉桂酸、橙皮苷和哈巴俄苷含量

建立了用高效液相色谱法同时测定参橘止咳滴丸中肉桂酸、橙皮苷和哈巴俄苷含量的方法，色谱柱为Hypersil C18，流动相为甲醇-0．2％醋酸溶液，梯度洗脱，检测波长280nm，柱温25℃．结果显示，肉桂酸、橙皮苷和哈巴俄苷检测线性范围分别为0．00814—0．20350，0．00968～0．24200和0．00684～0．10260mg·mL^-1，平均回收率为98％-100％，相对标准偏差小于2．19％．方法简便、快速、准确，可用于参橘止咳滴丸的质量控制．

RP-HPLC法测定润肠丸中阿魏酸及5种蒽醌衍生物的含量

目的:建立润肠丸中阿魏酸和蒽醌衍生物芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚6种成分的高效液相色谱测定方法。方法:Hypersil ODS-2 C_(18)柱(5 μm,4.6 mm×250 mm),Kromasil ODS 保护柱(5 μm,4.6 mm×10 mm)流动相:甲醇-1%醋酸,梯度洗脱,流速:0.8及1.0 mL·min^(-1),二极管阵列检测器(PDA),检测波长:阿魏酸323 nm,大黄蒽醌衍生物430nm,柱温:25℃。结果:可在2个波长下同时测定6种化合物的含量。阿魏酸、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的线性范围分别为0.04～1.41,0.03～2.00,0.03～2.05,0.02～1.45,0.04～2.11,0.03～1.74 μg。平均回收率分别为104.5%,101.0%,101.0%,100.9%,95.5%,101.1%;RSD 分别为0.14%,0.31%,1.2%,0.28%,0.21%,1.3%。结论:该方法灵敏,准确,是检测润肠丸中阿魏酸和5种蒽醌衍生物较理想的方法,为该制剂的质量标准提升提供了依据。

红芪多糖3的荧光标记及其组织分布研究

目的对红芪多糖3(HPS-3)进行荧光标记,并研究其在小鼠组织中的分布特征。方法以异硫氰酸酯FITC为探针,对HPS-3进行标记;采用荧光分光光度法测定荧光标记的红芪多糖(HPS-3-FITC)在小鼠各组织中的质量浓度,并以FITC为阴性对照,探讨HPS-3-FITC在小鼠体内的组织分布特征。结果实现FITC对HPS-3的荧光标记,其取代度为1.71%;小鼠心、肝、脾、肺、肾、胃、肠和脑的药时曲线下面积(AUC)分别为31.51,291.81,23.67,103.65,326.14,21.89,23.53和0.36μg·mL^(-1)·h。结论成功实现了HPS-3的荧光标记,绝大多数药物聚集在肾和肝,有明显肾肝靶向性。

周期性和持续性流体剪切力对成骨细胞OPG、RANKL蛋白表达的影响

目的:观察两种不同加载模式的流体剪切力(周期性或持续性)对MC3T3-E1成骨细胞增殖以及骨保护素(OPG)、细胞核因子k B受体活化因子配体(RANKL)蛋白表达的影响,同时探讨影响成骨细胞功能的最佳流体剪切力加载模式。方法:对MC3T3-E1成骨细胞分别加载生理强度为12 dyn/cm2的周期性流体剪切力或持续性流体剪切力。其中,持续性模式采用12 dyn/cm2的流体剪切力,加载成骨细胞2 h,静息2 h;周期性流体剪切力采用12 dyn/cm2流体剪切力加载成骨细胞30 min,然后静息3 0min,如此往复循环4次,总的加力时间为2 h。最后,MTT法检测不同加载模式下成骨细胞的增殖情况,Westernblot检测两组成骨细胞OPG、RANKL蛋白的表达影响。结果:MTT结果显示,两种加载模式的流体剪切力均能够显著促进成骨细胞的增殖(P<0.05),与持续性流体剪切力相比,周期性流体剪切力更能有效的促进成骨细胞的增殖(P<0.05)。另外,两种模式的流体剪切力均能有效地调控MC3T3-E1成骨细胞OPG、RANKL的表达(P<0.05)。但与持续性流体剪切力相比,周期性流体剪切力对成骨细胞OPG蛋白的促进作用更为显著(41.34%±5.37%vs 80.42%±4.19%,P<0.05);对成骨细胞RANKL蛋白的抑制作用更为明显[(24.17±5.92)%vs(8.45±2.18)%,P<0.05]。结论:与持续流体剪切力相比,周期性流体剪切力对成骨细胞增殖以及OPG、RANKL蛋白有更显著的调节作用。

一种在核磁共振影像中分辨膝关节前外侧韧带的方法

目的:介绍一种可以在膝关节MRI影像中分辨前外侧韧带结构的方法。方法:首先在T2加权相冠状位影像中分别定位易于查找且结构清晰的髂胫束和外侧副韧带所在扫描层面,然后在上述扫描层面间的影像中位于膝关节外侧的韧带结构即为前外侧韧带。选取2019年3月1日至2019年6月30日我院对105例膝关节3.0T磁共振检查的冠状位影像结果进行分析,对可分辨出前外侧韧带全部或部分结构的影像例数进行记录。结果:前外侧韧带的总检出率为96.2%,其中完整韧带结构检出率为57.2%,股骨-半月板间的韧带结构的检出率为30.4%,半月板-胫骨间的韧带结构的检出率为8.6%。结论:本研究介绍的方法可以简单、准确的在膝关磁共振检查的冠状位影像中定位并分辨前外侧韧带的结构。

红芪复方对CCl_4致小鼠肝损伤防治作用的筛方研究

目的筛选防治肝损伤效果最佳的红芪复方。方法皮下注射四氯化碳(CCl_4)致小鼠肝损伤,分别给予小鼠4个红芪复方(原药材20 g·kg^(-1),每日1次)灌胃,7周后测定小鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST);测定肝组织匀浆中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA);采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。结果 CCl_4所致小鼠肝损伤效果明显;4个红芪复方对CCl_4致小鼠肝损伤药效显著,但药效活性存在差异,其中红芪复方三的效果最佳。结论红芪复方三具有防治小鼠肝损伤的作用,具有进一步研究的价值。

扶正抑瘤颗粒的指纹图谱研究

采用高效液相色谱法,Krom asil ODS-1柱(5μm,4.6 mm×250 mm),甲醇-水梯度流动相,流速0.8mL/m in,研究了扶正抑瘤颗粒和组成该颗粒药材的指纹图谱.从扶正抑瘤颗粒的指纹图谱中找到14个与其处方药材对应的特征峰,其中与红芪药材有2个对应特征峰,当归药材有4个对应特征峰,墓头回药材有2个对应特征峰,莪术药材有6个对应特征峰,并对指标成分芒柄花素进行了定位和含量测定.可以用指纹图谱中的这些特征峰和芒柄花素的含量对扶正抑瘤颗粒的质量进行定性、定量控制.

ERK5信号通路介导流体剪切力对成骨细胞BMP2,BMP7mRNA的表达影响

目的:观察流体剪切力对MC3T3-E1成骨细胞BMP2,BMP7mRNA的表达影响,并探讨ERK5信号通路在其中的作用。方法:应用不同浓度的ERK5特异性阻断剂BIX02188干预成骨细胞,MTT比色法检测酶标仪490 nm吸光度,观察成骨细胞增殖情况以及ERK5mRNA的表达。并采用生理强度为12dyne/cm2的流体剪切力干预成骨细胞,实时荧光定量PCR检测BMP2,BMP7mRNA的表达情况。结果:浓度为15μM的BIX02188干预成骨细胞后,成骨细胞的生长的抑制以及ERK5mRNA的降低呈浓度依赖性。流体剪切力能够明显增加BMP2和BMP7mRNA的表达(P<0.05),且该种反应能够被ERK5信号通路阻断(P<0.05)。结论:ERK5信号通路调控流体剪切力对成骨细胞BMP2,BMP7mRNA的表达。

siRNA 沉默 ERK5基因对 MC3 T3-E1成骨细胞增殖及BMP2／BMP7的影响

目的观察ERK5信号通路对MC3T3-E1成骨细胞的增殖,及功能分化蛋白BMP2/BMP7的影响。方法应用小RNA分子干扰技术(siRNA)沉默ERK5基因,分别将浓度为20、40、60、80 nmol/L的ERK5 siRNA干预MC3T3-E1成骨细胞,筛选ERK5 siRNA转染的最佳浓度。噻唑蓝实验(MTT)检测转染后12 h、24 h、36 h和48 h细胞的增殖情况,实时荧光定量PCR检测ERK5、BMP2和BMP7 mRNA的表达。Westernblot检测不同干预组BMP2及BMP7蛋白的表达变化。结果当ERK5siRNA浓度为60 nmol/L时,MC3T3-E1成骨细胞的ERK5 mRNA的表达下降最为显著,沉默率为76.8±2.2%(P<0.01)。ERK5 siRNA转染后12 h、24 h、36 h,成骨细胞的增殖受到明显抑制(P<0.05),但48 h转染组未发现明显变化(P>0.05)。ERK5 siRNA转染24 h后,实时荧光定量PCR结果显示:空白组与对照siRNA组成骨细胞的BMP2/BMP7 mRNA变化水平无显著性差异(P>0.05),但ERK5 siRNA转染组的BMP2/BMP7 mRNA明显降低(P<0.05);Westernblot结果显示,空白组与对照siRNA组成骨细胞的BMP2/BMP7蛋白未发现明显变化(P>0.05),但转染组成骨细胞的BMP2/BMP7显著降低(P<0.05)。结论 ERK5 siRNA对MC3T3-E1成骨细胞的增殖以及骨形态蛋白BMP2和BMP7的表达有明显抑制作用。

补肾健骨方含药血清对ROBs和rBMSCs增殖、分化和矿化的影响

目的观察补肾健骨方含药血清对大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs)和大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,r BMSCs)细胞活性及分化、矿化的影响。方法制备补肾健骨方含药血清,将ROBs和r BMSCs分为5%、10%、15%、20%、25%浓度含药血清组、无药血清组及传统诱导组,分别对各组ROBs和r BMSCs进行成骨诱导。MTT法检测ROBs和r BMSCs细胞的增殖情况;用试剂盒检测ROBs和r BMSCs的碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色法检测矿化结节形成。结果不同浓度含药血清组与空白无药血清组、传统诱导组相比,均不同程度地促进ROBs和r BMSCs的增殖,使ALP活性提高,增加钙化结节数量和面积。其中含药血清浓度为20%时促进ROBs增殖分化作用最佳,浓度为10%时促进r BMSCs增殖分化效果最为显著。结论不同浓度补肾健骨方含药血清均能够促进ROBs和r BMSCs的成骨增殖、分化和矿化,分别在浓度为20%和10%时最佳。

参橘止咳方提取物的清咽功能和安全毒理学研究

目的:研究参橘止咳方提取物的清咽功能、遗传毒理学和亚慢性毒性。方法:功效研究采用大鼠棉球植入实验和大鼠足趾肿胀实验,分别设(1.2g/kg·BW,0.4g/kg·BW,0.2g/kg·BW参橘止咳方提取物)剂量组和蒸馏水空白对照组,连续灌胃给药30d,计算SD大鼠肉芽肿净量和足趾肿胀率;遗传毒理学研究采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验,分别设(4.0g/kg·BW,2.0g/kg·BW,1.0g/kg·BW)剂量组,环磷酰胺阳性对照组和蒸馏水空白对照组,灌胃给药小鼠30d,计算小鼠骨髓细胞微核率和精子畸形发生率;亚慢性毒性研究采用30d喂养实验,分别设(4.0g/kg·BW,2.0g/kg·BW,1.0g/kg·BW)剂量组和蒸馏水空白对照组,连续灌胃给药30d,观察和记录SD大鼠的生长发育情况、食物利用率、血液学指标和脏器病理检查。结果:1.2g/kg·BW高剂量组大鼠致炎后肉芽肿净量及4h和6h足趾肿胀率均显著减少(P<0.05);各剂量组骨髓细胞微核率和精子畸形发生率与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);30d喂养实验结果表明大鼠食物利用率、血液学指标和主要脏器系数与空白对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),各组织形态正常,未见与参橘止咳方提取物有关的明显病理变化。结论:参橘止咳方提取物对动物具有清咽功能,且无明显遗传毒性与亚慢性毒性,符合保健食品的安全性要求。

腹腔镜胃穿孔修补术治疗胃穿孔患者的疗效观察

目的观察胃穿孔患者行腹腔镜胃穿孔修补术的临床疗效,分析对血清胃泌素及炎症因子水平的影响。方法选取2018年5月~2019年6月本院收治的胃穿孔患者78例,随机将其分为观察组和对照组各39例。对照组行传统开腹手术,观察组行腹腔镜胃穿孔修补术。对比两组患者临床指标、胃泌素、炎症因子水平及术后并发症。结果观察组术中出血量较对照组少,手术用时、术后排气时间及住院时间均较对照组短,差异有统计学意义(P<0.05);观察术后血清白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察术后并发症发生率较对照组低,胃泌素水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜修补术对胃穿孔患者的创伤小,可改善胃泌素指标并降低炎症因子水平,且并发症较少,安全有效。

经胆囊后三角解剖入路腹腔镜胆囊切除术治疗胆囊结石伴慢性胆囊炎的疗效观察

目的探究胆囊结石伴慢性胆囊炎患者经胆囊后三角解剖入路腹腔镜胆囊切除术(LC)治疗对肠道功能恢复时间及血清炎性因子水平的影响。方法选取我院130例胆囊结石伴慢性胆囊炎患者(2018年9月至2020年9月),按随机数字表法分成两组,各65例。常规组接受常规胆囊三角入路LC治疗,研究组接受胆囊后三角解剖入路LC治疗。对比两组围术期指标、术前、术后1 d疼痛介质指标[一氧化氮(NO)、5-羟色胺(5-HT)]、炎性因子指标[白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。结果研究组术中出血量较常规组低,肠功能恢复时间、住院时间、手术时间较常规组短(P<0.05);术后1 d研究组血清NO、5-HT水平较常规组低(P<0.05);术后1d研究组血清IL-8、TNF-α水平较常规组低(P<0.05)。结论胆囊结石伴慢性胆囊炎患者经胆囊后三角解剖入路LC治疗术中出血量较常规组低,缩短肠功能恢复时间、住院时间,减少术中出血量,减轻术后疼痛感,且对炎性反应影响较小。