线粒体钙单向转运体在模拟失重所致巨噬细胞极化改变中的调控作用研究

目的探究线粒体钙单向转运体(mitochondrial calcium uniporter,MCU)在模拟失重状态下对巨噬细胞极化的调控作用及其机制。方法体外培养小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM),采用配对比较法将野生型(wild ty pe,WT)小鼠的BM DM分为2D回转模拟失重组和同步对照组,2D回转模拟失重组细胞在2D细胞回转仪中回转24 h模拟失重效应,同步对照组细胞在2D细胞回转仪中静置24 h;按照小鼠基因型将2D回转模拟失重的细胞分为LysM Cre、MCU f l/f l与同窝对照MCU f l/f l组,2组均在2D细胞回转仪中回转24 h模拟失重效应。采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(realtime quantitative PCR detecting system,Q-PCR)和流式细胞术检测BMDM向M1、M2型巨噬细胞极化的能力;蛋白免疫印迹检测B M D M在模拟失重状态下巨噬细胞线粒体融合分裂蛋白的表达水平;实时荧光定量核酸扩增检测系统检测B M D M线粒体D N A拷贝数;转染线粒体特异性绿色荧光钙质粒Ad-4 m t-G C a M P 6检测B M D M线粒体钙信号;D C F H-DA活性氧探针检测BMDM活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果在24 h回转模拟失重处理后,WT小鼠的BMDM向M1型巨噬细胞极化的能力减弱(t=6.409、4.800、7.808、6.506,P均<0.01),向M2型巨噬细胞极化的能力增强(t=3.265、4.458,P均<0.05);线粒体融合蛋白Mfn2和OPA1表达下降,分裂蛋白Drp1表达增加;线粒体DNA拷贝数增加(t=10.06,P<0.01),ATP数目下降(t=15.6,P<0.01);线粒体Ca2+与ROS水平上升;BMDM MCU mRNA与蛋白表达水平都显著升高(t=7.824,P<0.01);敲除MCU后的BM DM向M2型巨噬细胞极化被抑制(t=8.574、5.155,P均<0.05),ATP水平显著下降(t=3.317,P<0.05),线粒体Ca2+与ROS水平的升高也受到抑制。结论在模拟失重状态下,MCU作为线粒体Ca2+内流的关键调控蛋白介导线粒体钙超载导致ROS水平上升,从而促进了巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化。

不同剂量利伐沙班治疗老年非瓣膜性房颤的疗效及安全性评估

目的探索中国老年非瓣膜性房颤患者使用利伐沙班预防卒中的合适剂量,提高抗凝治疗的有效性及安全性。方法连续入选中国人民解放军总医院第一医学中心心血管内科2016年12月至2018年12月老年非瓣膜性房颤患者152例,采用随机数表法分为利伐沙班A组及利伐沙班B组。A组采用国际推荐剂量的利伐沙班(15 mg),B组采用低剂量利伐沙班(10 mg)。随访12个月后,最后入组患者A组73例,B组67例。检测应用利伐沙班前后患者的血常规、凝血功能、血浆抗Ⅹa因子活性浓度及血栓弹力图等指标,记录随访期间的出血、缺血事件及全因死亡情况。采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析。根据数据类型,分别采用t检验、方差分析或秩和检验进行组间比较;采用Kaplan-Meier进行生存分析。结果服用利伐沙班治疗前后2组患者的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、血肌酐、血尿素氮、尿酸、血红蛋白、血小板、血小板聚集功能均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。A组患者的活化部分凝血活酶时间峰值、血浆凝血酶原时间峰值、凝血酶原活动度峰值、国际标准化比值峰值及抗Xa因子谷浓度值均明显高于B组,差异意义有统计学(P<0.05)。2组其余凝血指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组血栓弹力图各项主要指标均无统计学差异(P>0.05)。除血尿外,2组患者的其他出血性事件、缺血性事件及全因死亡均无明显统计学差异(P>0.05)。A组的累积生存率为93.5%,B组为84.6%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论我国老年非瓣膜性房颤患者卒中防治前需个体化评估缺血/出血风险,抗凝治疗推荐选用偏低剂量的利伐沙班,可取得明显且相对安全的临床获益。