NO对心脏缺血再灌注损伤的影响及其在缺血预处理中的作用

目的 :明确NO对心脏缺血再灌注 (IR)损伤的影响及其在缺血预处理 (IP)保护机制中的作用 ,同时观察NO对缺血再灌注凋亡的影响。方法 :使用在体大鼠心脏缺血再灌注模型 ,实验共分为 6组 :IR组 ,IR +L -arg组 ,IR +L -NAME组 ,IP组 ,IP +L -arg组 ,IP +L -NAME组 ,观察分析心功能、梗塞面积、中性粒细胞 (PMN)计数、心肌髓过氧化物酶 (MPO)活性、TUNEL阳性细胞计数等指标。结果 :L -arg ,L -NAME均明显减轻了IR引起的PMN浸润和心肌细胞凋亡。缺血预处理前给予NO前体L -arg增加NO生成或使用L -NAME阻断NO生成对缺血预处理保护作用无明显影响。结论 :缺血前组予L -arg增加内源性NO生成可对心肌缺血再灌注发挥保护作用 ;组予L -NAME可能通过减少再灌注其ONOO-的生成而减轻心肌损伤和凋亡。

血小板激活因子及其拮抗剂银杏内酯B对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响(英文)

目的 探讨外源性血小板激活因子 (PAF)激活的多核形中性粒细胞 (PMN)是否具有低浓度氧自由基模拟缺血预适应 (IP)对缺血再灌注 (IR)所致心肌损伤的保护作用。方法 结扎冠脉左前降支 30min ,再灌注 3h制备大鼠心脏IR模型。以缺血前给予 2次 5min缺血 ,10min再灌注作为IP。实验分为6组 ,IR组、IR +PAF组和IR +银杏内酯B(GB、PAF拮抗剂 )组 ,分别于缺血前 2 5和 10miniv生理盐水、PAF(3μg·kg- 1)和GB (5mg·kg- 1) ;IP +IR组、IP +IR +PAF组和IP +IR +GB组分别于IP 2次 10min再灌注开始时iv相应药物。观察分析心功能、梗死面积、PMN计数、心肌髓过氧化物酶活性、TUNEL阳性细胞计数等指标。结果 给予PAF明显加重IR引起的心脏损伤、PMN浸润及凋亡的程度 ;GB对IR引起的心功能下降没有明显影响 ,但明显减少梗死面积、PMN浸润及凋亡细胞 ;PAF明显削弱IP的保护作用 ;GB对IP作用未见明显影响。结论 IR后PMN浸润可能是引起心肌细胞凋亡的一个重要原因 ;PAF激活PMN可能不具有模拟IP对IR所致心肌损伤的保护作用 ,反而取消IP的保护作用。

高脂饲料及维生素D_3联合应用建立大鼠动脉粥样硬化模型

目的建立适合于心血管疾病研究的大鼠动脉粥样硬化模型。方法健康Wistar大鼠24只,雌雄各半,随机分为3组:高脂+VD3组、高脂组、对照组。检测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、Ca2+,分离各组大鼠主动脉弓,置于10%中性福尔马林中固定,作HE染色及von Kossa染色。结果试验后,高脂饲料+VD3组及高脂饲料组血清TC、TG水平均明显升高,同对照组相比P<0.01,高脂饲料+VD3组血钙水平明显高于高脂饲料组和对照组。高脂饲料组可见大鼠主动脉壁管壁明显增厚,中膜平滑肌细胞增生;高脂饲料+VD3组可见血管内较典型的动脉粥样斑块。von Kossa染色有大量黑色钙沉积于血管中膜。结论用大剂量维生素D3腹腔注射,联合应用高脂饲料喂养的方法可建立理想的动脉粥样硬化模型。

高糖高脂对培养成年小鼠心肌细胞的氧化应激损伤

目的:建立培养成年小鼠心肌细胞模型,给予高糖高脂刺激观察是否可以引起心肌细胞损伤和凋亡,并分析其机制。方法:分离培养成年小鼠心肌细胞,以最小必需培养基(minimum essential medium,MEM)加20 mmol/L甘露醇作为正常对照培养基(正常对照组,n=10);以MEM+高糖(20 mmol/L葡萄糖)高脂(50μmol/L软脂酸)培养模拟糖尿病(高糖高脂组,n=10),心肌细胞分别在两种培养基中培养24 h后测定指标。结果:高糖高脂组乳酸脱氢酶(LDH)、细胞凋亡蛋白酶caspase-3活性显著升高,过氧化亚硝基损伤标志物硝基酪氨酸生成增多,同时心肌诱生型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达水平和一氧化氮(NO)生成增多,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶蛋白表达水平和超氧阴离子生成增多,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论:在培养的成年小鼠心肌细胞,高糖高脂可引起心肌细胞损伤和凋亡,这主要是由于高糖高脂引起的iNOS大量表达所生成的NO和NADPH氧化酶表达增高生成的超氧阴离子反应产生的大量过氧化亚硝基所诱发。

心脏结构和功能变化与心脏β_1与M_2受体自身抗体产生的关系

目的： 研究心脏结构和功能改变与心脏受体自身抗体产生的关系。方法： 在缩窄主动脉与阿霉素中毒引起的两种心功能不全大鼠模型上，利用合成的心脏β１ 与Ｍ２ 受体细胞外第二环抗原肽段进行ＳＡ－ ＥＬＩＳＡ 检测，观察血清中这两种自身抗体的动态变化。结果：（１） 两组模型大鼠血清中的自身抗体在处理前均呈低阳性率、低滴度，于处理后１５ ～２０ ｄ 出现高阳性率、高滴度，与处理前相比有显著差异。（２） 两组大鼠心脏结构和功能的改变与自身抗体滴度之间呈正相关。（３） 自身抗体在产生后有一个自然衰退的过程。结论：心脏结构和功能的变化能够促进β１ 受体及Ｍ２ 受体自身抗体的产生。目的： 研究心脏结构和功能改变与心脏受体自身抗体产生的关系。方法： 在缩窄主动脉与阿霉素中毒引起的两种心功能不全大鼠模型上，利用合成的心脏β１ 与Ｍ２ 受体细胞外第二环抗原肽段进行ＳＡ－ ＥＬＩＳＡ 检测，观察血清中这两种自身抗体的动态变化。结果：（１） 两组模型大鼠血清中的自身抗体在处理前均呈低阳性率、低滴度，于处理后１５ ～２０ ｄ 出现高阳性率、高滴度，与处理前相比有显著差异。（２） 两组大鼠心脏结构和功能的改变与自身抗体滴度之间呈正相关。（３） 自身抗体在产生后有一个?

四种不同高血压大鼠模型形成过程中血清抗AT_(1A)受体自身抗体的检测(英文)

本实验采用不同的方法复制两肾一夹(two-kidney one-clip renal hypertensive,2KIC)、神经性、DOCA-盐高血压和自发性高血压大鼠模型,观察AT1A受体自身抗体(AT1A-receptor autoantibodies,AT1A-AAs)在不同高血压发病的变化规律,同时对自身抗体生物活性进行分析。实验结果表明,在高血压发病过程中AT1A-AAs的阳性率和滴度均明显增加,在四种模型中,自发性高血压组最明显,2K1C和神经性组次之。AT1A-AAs的生物活性显示,可增加培养的新生鼠心肌细胞跳动频率和血管收缩张力。结果提示,自身免疫机制参与了高血压的形成,AT1A-AAs可能与心肌肥厚有关。

心力衰竭大鼠血清抗β_1肾上腺素受体自身抗体的产生与生物学效应的研究

目的:建立心力衰竭大鼠模型,探讨心力衰竭发生发展过程与抗β1肾上腺素受体(β1AR)自身抗体产生的关系,并观察该抗体的生物学效应及其信号转导通路。方法:采用缩窄腹主动脉法制备心力衰竭大鼠模型;应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,检测心力衰竭大鼠血清中的抗β1AR自身抗体;利用亲和层析法纯化心力衰竭大鼠抗体阳性血清中的IgG,观察该抗体IgG对乳鼠心肌细胞搏动频率和成年大鼠心肌细胞腺苷酸环化酶活性的影响。结果:(1)心力衰竭大鼠血清中抗β1AR自身抗体的阳性率(82.8%)和抗体滴度[1∶(67.3±2.4)]明显高于假手术组5%,[1∶(17.3±2.0)](P<0.01);(2)纯化的抗体IgG既可增加乳鼠心肌细胞的搏动频率,还可增强成鼠心肌细胞腺苷酸环化酶的活性,使cAMP产生量增加。结论:心力衰竭可以诱导大鼠血清中抗β1AR自身抗体的产生,该抗体具有激动剂样正性变时效应,可增强腺苷酸环化酶活性。提示该自身抗体可能通过β1AR-Gs-AC-cAMP-PKA信号通路对心脏产生病理损害。

肾血管性高血压大鼠发病过程中心血管AT_1-受体自身抗体的变化

实验观察了肾血管性高血压（RVH）大鼠血浆中抗AT1-受体自身抗体在发病过程中的作用及其变化规律。采用两肾一夹Goldblatt RVH模型,以合成的大鼠AT1-受体细胞外第二环165-191位氨基酸序列作为特异性抗原,用SA-ELISA法检测大鼠血清中抗AT1-受体自身抗体。结果表明,RVH模型组术后2周时大鼠血清中抗AT1-受体自身抗体的阳性率和平均滴度与术前相比明显增高,较高的阳性率和平均滴度持续几周后逐渐下降,12周时下降到正常水平。结果提示,自身免疫机制参与了高血压的形成,抗AT1-受体自身抗体可能与心肌肥厚有关。

β_3肾上腺素受体自身抗体在扩张型心肌病患者中的检测及临床意义

[目的]检测扩张型心肌病(CDM)患者血清中β3肾上腺素受体(β3AR)自身抗体,并分析其类型和可能的医学意义。[方法]以合成的人β3AR细胞外第一、二、三环肽段作为抗原,应用酶联免疫吸附实验,检测临床甄选的60例CDM患者及103例正常对照者血清中β3AR自身抗体。[结果]DCM患者血清中β3AR细胞外第一环和第二环的IgG类自身抗体阳性率(30.0%和41.7%)及抗体水平(0.46±0.08和1.17±0.17)均显著高于正常对照者,且与心功能有关;β3AR细胞外第二环IgM类自身抗体阳性率(50.0%)也显著高于正常人,但与心功能无关。β3AR细胞外第二环的自身抗体水平明显高于第一环和第三环的自身抗体。而IgG类自身抗体水平明显高于IgM类。[结论]β3AR自身抗体,尤其是β3AR细胞外第二环的IgG类自身抗体可能作为重要的功能性抗体,参与DCM的病理生理过程。

β_3肾上腺素受体在心脏活动调节中的作用

1996年首次发现在人类心室肌组织中存在β3肾上腺素受体(β3-adrenoceptor,β3AR),可以介导负性变力作用。该受体的结构与功能特性明显不同于β1AR和β2AR,这可能有助于深入了解病理情况下,心脏对儿茶酚胺的异常反应规律。心房中也存在β3AR,其作用尚无定论。心室β3AR主要通过抑制型G蛋白(G i)-内皮型一氧化氮合酶(eNOS)-一氧化氮(NO)-环-磷酸鸟苷(cGMP)-Ca2+通路介导负性变力作用。心衰时,β3AR表达上调,与其偶联的G i也上调,由于该受体不易脱敏并易被高浓度儿茶酚胺激活,因此该受体介导的负性变力作用可能参与心衰的病理生理机制。

预缺血对大鼠心肌缺血再灌注凋亡的影响

为观察大鼠心肌缺血再灌注的致凋亡作用和再灌注早期不同阶段中性粒细胞浸润与凋亡的关系及预缺血对凋亡的影响 ,制备在体大鼠心肌缺血再灌注模型 ,实验分为四组 :缺血 +1h再灌注组、缺血 +2h再灌注组 ,缺血 +3h再灌注组及预缺血组 ,观察分析心功能、梗死面积、中性粒细胞计数、心肌髓过氧化物酶活性及凋亡指数等指标。结果发现 ,缺血再灌注明显引起心脏功能损伤、中性粒细胞浸润和心肌细胞凋亡 ,且随再灌注时间延长而加重 ,预缺血明显减轻其损伤并抑制凋亡。心肌细胞凋亡与中性粒细胞浸润存在显著正相关关系。结果提示 ,预缺血可通过减轻凋亡对心肌发挥保护作用。

抗血管紧张素Ⅱ-1型受体的抗体对大鼠心脏活动的影响

目的探讨抗血管紧张素Ⅱ-1型受体（AT1）的抗体对大鼠心室肌细胞胞浆钙离子浓度和心功能的影响。方法按照人AT1受体细胞外第二环表位肽段合成AT1受体抗原肽段，以此肽段对大鼠进行主动免疫，获取抗AT1受体抗体；利用CCD钙离子成像系统实时记录细胞内游离钙含量的变化；在离体灌流心脏上，应用生物信号采集系统检测左心室各项心功能指标的变化。结果抗AT1受体抗体可剂量依赖性地增加心室肌细胞内游离钙的浓度，而阴性抗体组则无此作用。抗AT1受体抗体对离体灌流心脏的收缩和舒张功能均有剂量依赖性的增强效应；血管紧张素-Ⅱ也显示有与抗AT1受体抗体相似的生物效应，而且二者对心脏的生物效应均可被AT1受体拮抗剂losartan所阻断。结论抗AT1受体抗体对心肌细胞游离钙含量和心功能具有显著的激动剂样效应，这可能是该抗体参与心脏疾患发病的机制之一。

四氢小檗碱对外周血管多巴胺DA_1和DA_2受体亚型的作用

目的 :研究四氢小檗碱 (THB)对外周血管DA1和DA2 受体亚型的作用。方法 :采用家兔离体血管环方法。结果 :THB使DA1受体激动剂FODA诱发的肾、肺和肠动脉以及DA2 受体激动剂PBDA诱发的肠和股动脉舒张反应的量效曲线非平行右移 ,最大反应 (Emax)降低 ,均呈非竞争性拮抗。结论 :THB为外周血管DA1和DA2 受体的混合性阻滞剂作用特性 ,其作用与左旋千金藤定碱 (l SPD)相似 ,但弱于l SPD。

后处理减轻心肌缺血/再灌注损伤与HIF-1α-iNOS-cGMP通路激活的关系

目的 探讨后处理减轻缺血/再灌注所致的心肌损伤效应是否与低氧诱导因子-1α （HIF-1α）及其下游通路有关.方法 建立大鼠心肌缺血/再灌注及后处理模型,检测心肌组织中HIF-1α及其下游基因诱导性一氧化氮合酶（iNOS）的表达情况及cGMP的含量.结果 后处理缩小缺血/再灌注所致的心梗面积[（27.30±4.16）%比 （36.00±5.29）%,P＜0.01],减少心肌细胞凋亡（Caspase 3比活性：（1.85±0.50）比（3.79±0.64）,P＜0.01）,上调心肌组织中HIF-1α表达[（5.76±0.55） 比（2.85±0.13）,P＜0.01）的同时,提高了iNOS的表达及其cGMP的含量.预先给予HIF-1α脯氨酸羟化酶抑制剂DMOG使后处理心肌组织中HIF-1α表达进一步上调后,iNOS的表达及cGMP含量随之增加,同时后处理减轻心肌损伤的效应[心梗面积：（17.95±2.00）% 比 （27.30±4.16）%,P＜0.01; Caspase3比活性：0.43±0.13比1.85±0.50,P＜0.01]也进一步增强.结论 后处理减轻缺血/再灌注所致心肌损伤的效应可能与其激活心肌组织中HIF-1α-iNOS-cGMP通路有关.

氯沙坦对肾血管性高血压大鼠血清中血管紧张素Ⅱ-1受体自身抗体产生的影响

目的和方法 :采用两肾一夹型肾血管性高血压 (RVH)模型 ,以合成的大鼠血管紧张素Ⅱ 1受体 (AT1R)细胞外第二环 1 65 1 91位氨基酸序列作为特异性抗原 ,用ELISA法检测大鼠血清中血管紧张素Ⅱ 1受体自身抗体 ,动态观察 (1 3周 )氯沙坦 (术后第 2周开始 ,5mg/kgdig ,连续 1 2周 )治疗对模型大鼠AT1R自身抗体产生的影响。结果 :RVH组大鼠血清中AT1R自身抗体从术后 1周起阳性率、滴度逐渐升高 ;给予氯沙坦治疗不仅可抑制模型大鼠心脏功能和结构的改变 ,而且使血清AT1R自身抗体的阳性率和滴度明显低于肾血管性高血压组。结论

抗肽抗体在大鼠心肌M_2胆碱受体的免疫组织化学研究

目的 探讨在扩张型心肌病患者新发现的心脏M2 胆碱受体自身抗体与用人M2 胆碱受体肽段经免疫制备的抗受体抗体对大鼠左右心房和心室M2 胆碱受体的分布位置及其特性的影响。方法 利用免疫组织化学方法及图象分析技术测定M2 胆碱受体在大鼠心房和心室肌细胞的分布位置及其密度的变化。结果 M2 胆碱受体的免疫反应阳性颗粒主要位于远离胞核的胞浆内 ;心房和心室肌细胞均明显存在有免疫阳性反应产物 ,但其分布密度存在有明显差异 ,心房免疫阳性颗粒明显多于心室。用阿托品后 ,心房心室细胞的免疫阳性反应产物明显降低。结论 大鼠M2 胆碱受体主要位于心房和心室肌细胞表面 ,心房M2 胆碱受体的分布密度明显大于心室 ,M2 胆碱受体抗体和受体结合的位点可部分被M2

抗β_1-肾上腺素受体自身抗体对在体大鼠心肌细胞的致凋亡作用

目的:观察抗β1-肾上腺素受体(β1-AR)自身抗体对在体大鼠心肌细胞的致凋亡作用,并探讨其可能的信号转导通路,以阐明该抗体参与心衰发生发展的病理机制。方法:用β1-AR细胞外第二环合成肽段免疫抗β1-AR自身抗体阴性大鼠(9周),定期检测大鼠的血清抗β1-AR自身抗体滴度、心功能、心肌组织凋亡现象和caspase-3,8,9活性。结果:(1)免疫组大鼠的血清抗β1-AR自身抗体滴度逐渐升高并维持于高水平[1∶(1 280±0.07)];对照组始终在1∶10左右;(2)TUNEL和琼脂糖凝胶电泳显示免疫组大鼠在免疫3、4、5周心肌组织发生明显凋亡,caspase-3,8活性增高,免疫7、9周心功能明显下降,对照组未见异常。结论:抗β1-AR自身抗体可能通过激活死亡受体途径促进在体大鼠的心肌细胞发生凋亡,最终引起心功能下降。