DNA疫苗的特性及免疫机理研究

DNA疫苗已成为疫苗研究领域的热点,被称为疫苗的第3次革命。本文介绍了DNA疫苗的特点并分析了DNA疫苗的免疫机理,为改进和提高DNA疫苗的免疫效果提供一些理论依据。

马传贫驴白细胞疫苗株反式激活蛋白基因的克隆与表达

马传染性贫血病毒（Equine infectious anemia virus,EIAV）属于逆转录病毒科慢病毒属,由该病毒引起的马传染性贫血（简称马传贫或EIA）是马属动物的一种非常重要的传染病.该病呈世界性分布,对养马业危害极大.EIAV为正链RNA病毒,其基因组由两条相同的单链RNA组成.

抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立

采用黄曲霉毒素M1与牛血清白蛋白偶联物免疫8周龄BALB/c小鼠,4次免疫后,使小鼠产生免疫应答,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合、筛选,最终获得1株能稳定分泌抗黄曲霉毒素M1的杂交瘤细胞株系。其染色体平均计数为90±10对,间接ELISA检测该株系培养上清的效价为1∶6400,纯化腹水效价为5000×27,与黄曲霉毒素M1及其结构类似物黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的反应率分别为100%、7%、0%。经传30代后,抗体效价稳定。并在此基础上建立了间接竞争ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度是0.08ng/mL,校正曲线的线性范围为0.08ng/mL～5ng/mL。该方法的加标回收率为80.0%～128.3%。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒依赖Caspase途径诱导仔猪胸腺细胞凋亡

为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)Hu N4株诱导断奶仔猪胸腺细胞凋亡的分子机制,本实验通过免疫荧光技术、流式细胞术、荧光定量PCR和western blot等方法检测HP-PRRSV感染仔猪胸腺内细胞凋亡相关因子Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3表达量的变化。结果显示:HP-PRRSV感染仔猪后,胸腺内表达凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的细胞比例显著升高,并且凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3表达量也明显升高。以上结果表明:HP-PRRSV感染仔猪引起胸腺细胞凋亡是通过Caspase依赖性通路介导。本研究为进一步了解HP-PRRSV感染机制提供了实验依据。

高致病性PRRSV感染对仔猪骨髓细胞影响的初步鉴定

为了研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)感染对仔猪骨髓细胞的影响,本研究体外培养仔猪骨髓细胞后感染HP-PRRSV,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测骨髓细胞生长情况,并通过流式细胞分析技术检测病毒感染骨髓内细胞的类型。实验结果显示:HP-PRRSV HuN4感染骨髓细胞72h后病毒感染率达到峰值,骨髓细胞存活率显著下降;流式细胞分析结果显示,HP-PRRSV感染的骨髓细胞为髓系前体细胞(SWC3~LSWC8^-)与巨噬细胞(SWC3~HSWC8^-)。本实验结果表明:HP-PRRSV在骨髓内除能够感染巨噬细胞外,还能感染髓系前体细胞,引起仔猪骨髓损伤并影响机体的正常免疫反应。本研究为进一步探究HP-PRRSV感染机体免疫抑制机制奠定了前期基础。