利用末龄幼虫蜕和蛹壳对苹果蠹蛾基因的无创伤检测方法

苹果蠹蛾Cydia pomonella(L.)是我国重大农业入侵害虫,对我国果业健康发展造成严重威胁。在利用基因编辑等技术对相关基因进行功能研究时,通常采用单对交配策略对纯合突变体进行筛选。因此,在配对前明确个体基因型,避免对虫体造成损伤尤为重要。本研究分别收集末龄幼虫蜕(10个蜕)和蛹壳(1个、5个、10个、15个蛹壳),通过基因组DNA提取、目的基因PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳检测和PCR产物测序,以评估该方法作为苹果蠹蛾基因检测的可行性。结果显示,以苹果蠹蛾末龄幼虫10个蜕及5个以上蛹壳提取的基因组DNA作为模板,扩增精巢特异性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Testis specific serine/threonine protein kinase,TSSK1)基因,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测得到单一、明亮的条带,经测序证实该产物是目的基因序列。基于高效及节约成本的原则,拟推荐利用10个末龄幼虫蜕或10个蛹壳提取基因组DNA、通过PCR扩增和测序进行苹果蠹蛾的无损伤基因型检测。本研究建立了一种利用幼虫蜕和蛹壳进行苹果蠹蛾无损伤、高效的基因检测方法,为提高苹果蠹蛾基因功能研究的效率奠定了基础。

高中化学综合实践活动的方法研究

随着教育制度的完善,综合实践活动在高中化学课程中扮演着越来越重要的角色,目的是希望学生发挥主体作用,提高动手解决实际问题的能力。在实践活动的学习过程中,促进个性发展,正确认识自我、社会和自然之间的内在联系。本文通过文献研究法、案例分析法,以高中化学教学为例,提出开展综合实践活动应遵循的原则,包括密切联系社会生活原则、科学性原则、主体性原则,并通过“制盐师”和“烟花燃放”两个案例阐明了活动主题应该贴近社会生活热点并具有可操作的特点、实施过程应注重学生的主动性和实践性、活动结果应开展合理的和多元化的教学评价,能更好促进综合实践活动的开展。