归芪益母口服液对产后奶牛炎性因子调节作用

研究归芪益母口服液对产后奶牛炎性因子的影响作用。研究选用18头体况相近的2~3胎次健康荷斯坦奶牛,随机等分为试验组与对照组,每组9头。试验组奶牛在产犊后0 d开始灌服归芪益母口服液,500 mL/d,连用6 d,对照组奶牛灌服相同体积的饮用水。于产后0 d及产后7 d灌药前空腹尾静脉采血,制备血浆,采用ELISA法测定TNF-α、TGF-β、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、IL-17、IL-18、IL-23和IgG水平。结果表明,对照组产后7 d与0 d比较,血浆中促炎性细胞因子TNF-α水平显著升高(P<0.05)、IL-2和IL-18水平极显著升高(P<0.01);试验组产后7 d与0 d比较,IL-2、IL-4、IL-10和IL-18水平显著降低(P<0.05)、IL-13水平极显著降低(P<0.01);产后0 d,试验组与对照组相比,各炎性因子无显著差异(P>0.05);产后7 d,试验组与对照组相比,IL-4、IL-13水平均显著降低(P<0.05),IL-10、IL-2和IL-18水平均极显著降低(P<0.01)。提示归芪益母口服液可能是通过调节Th1与Th2型细胞因子的平衡而发挥免疫调节作用。

PEDV与TGEV双重荧光RT-LAMP检测方法的建立与评价

为建立可快速鉴别检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的双重荧光RT-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,从GenBank下载PEDV和TGEV不同毒株M基因序列进行比对后,针对高度保守区设计合成内、外引物对和探针,在PEDV探针5′端标记FAM基团,3′端标记BHQ1基团,在TGEV探针5′端标记CY5.5基团,3′端标记BHQ2基团,对反应条件和体系优化后建立了一种快速鉴别PEDV和TGEV的双重荧光RT-LAMP检测方法。采用建立的方法在63℃水浴锅中反应60 min,然后再85℃作用10 min结束反应,将反应管置于多色荧光成像仪,在520、690 nm双通道下即可观察结果。用该方法检测其他猪常见病毒性病原均无交叉反应;以10倍稀释的重组质粒为模板评价该方法的灵敏度,结果最低检测限为10^(2)拷贝/μL重组质粒,是常规RT-PCR方法敏感度的10倍。从175份有腹泻症状仔猪的肛拭子样品中采用建立的方法共检出PEDV阳性样品72份,TGEV阳性样品49份,PEDV和TGEV混合感染样品40份,均比采用常规RT-PCR方法的检出率高。本研究建立的双重荧光RT-LAMP方法采用普通水浴锅即可进行扩增反应,而无需对反应产物进行凝胶电泳,为快速方便的进行PED与TGE的鉴别诊断和PEDV与TGEV混合感染的同步检测提供了技术支撑。

子宫内膜炎奶牛血酮与炎性细胞因子的相关性

为了较全面揭示奶牛发生子宫内膜炎时血酮(KET)与炎性细胞因子的变化规律及相关性,本试验选择8头产后健康奶牛和8头子宫内膜炎奶牛,尾静脉采血,制备血浆。采用Nova Vet血酮仪检测各组奶牛全血中KET含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆中TNF-α、IL-1、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、IL-18、IL-23和TGF-β的水平。结果显示,子宫内膜炎组奶牛血浆中TNF-α、TGF-β、IL-1、IL-4、IL-8、IL-10的含量极显著升高(P<0.01),KET、IL-6、IL-17、IL-18含量显著升高(P<0.05),而IL-13和IL-23的表达水平在两组之间无显著性差异(P>0.05)。KET与TNF-α、IL-1、IL-8、TGF-β、IL-4、IL-10之间呈显著性正相关(P<0.05),与IL-18水平之间呈极显著性正相关(P<0.01),说明奶牛产后能量负平衡可显著降低其免疫水平,是子宫内膜炎发生的因素之一。