人CD4^+CD25^+调节性T细胞系的建立与功能分析

目的 :建立可在体外长期培养的人CD4+CD2 5+调节性T细胞系并研究其免疫生物学特性。方法 :用流式分选的方法从健康人外周血淋巴细胞中得到CD4+CD2 5+T细胞 ,并对其进行体外长期培养、扩增 ;淋巴细胞转化实验分析其免疫抑制功能 ,流式细胞法分析其表型。结果 :经对人CD4+CD2 5+T细胞的长期培养扩增 ,获得具有免疫抑制功能的调节性T细胞系。该T细胞系对经TCR的刺激不敏感 ,且能抑制同一来源或同种异型CD4+CD2 5-T细胞的活化 ,大剂量IL 2可以逆转其抑制功能。长期培养的CD4+CD2 5+T细胞 ,膜表面CD2 5和CTLA 4分子持续高表达 ,而CD4+CD2 5-T细胞CD2 5和CTLA 4分子的表达呈周期性变化。结论 :将CD4+CD2 5+T细胞体外扩增培养成系 ,其功能和表型与同一来源的CD4+CD2

结核分支杆菌LprG基因的克隆、表达及纯化

目的在大肠杆菌中重组表达MTB LprG基因,纯化回收,为进一步研究其在结核病诊断中的价值奠定基础。方法从MTB H37Rv基因组中PCR扩增出MTB LprG基因,克隆到pEASYT1载体中,经序列测定后,再亚克隆到表达载体pET28a(+)中,转化入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,Western-blot分析鉴定,采用Ni-NTA柱纯化LprG蛋白。结果扩增产物序列无突变,重组表达载体pET28a(+)-LprG酶切鉴定正确,LprG蛋白在E.coliBL21(DE3)中的表达量约占菌体总蛋白的38%左右,主要以可溶性形式存在,Western-blot分析在27kDa处见到目的蛋白条带,经Ni-NTA柱纯化后,得到纯度较高的该蛋白。结论构建了LprG基因的重组表达载体,获得了纯化的蛋白,为以后研究奠定了基础。

结核分枝杆菌LprG基因的克隆、表达

目的构建结核分枝杆菌LprG基因的融合表达载体,在大肠杆菌中进行表达,为研究其在结核病诊断中的作用奠定基础。方法采用聚合酶链反应(PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出LprG基因,克隆到pEASY T1中,序列测定正确后,再亚克隆到融合表达载体PET28a(+)中,转化入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达。结果获得结核分枝杆菌LprG蛋白,凝胶薄层扫描分析表达量在38%左右,主要以可溶性形式存在。结论获得了重组结核分枝杆菌LprG蛋白,为以后研究奠定了基础。

文学鉴赏中的外观形态美

文学鉴赏的外观形态美居于文学作品的表层结构,是诗人审美意识的载体和负荷物,由文字、韵律、节奏、结构等组成,具有鲜明的质感和直接性品格。外观形态的美包括音乐美、绘画美、建筑美。由于它们体现了一定的空间性的美,因而既能在产生的当时是美的,又能超越时域,出现超时空的美。外观形态美虽然附着在诗歌作品的表层,但它的恒稳性很强,具有悠长的延续特征,可以独立地加以审美观照。

地域文化与凉州贤孝的疏离和交融关系

凉州地域文化与凉州贤孝共存于西北这片高寒缺水的沙漠化土地上,贫瘠的土壤孕育了当地丰厚多样的文化。二者在文化的承载主体范围上不同;在文化表述的内容上有差异;在文化规范的社会生活层面上有别。但作为文化的系统与文化的支流而言,它们的文化功能,文化消费主体,文化生成的经济基础又是相同的。因此,凉州地域文化和凉州贤孝呈现出一种既疏离又交融的关系。

明确目标 因材施教

探讨了语文课在职业教育中的必要性,针对职业教育注重实用性的特点,从说话能力的培养、应用写作能力的培养、德育教育、审美教育等方面对高职学院的语文教育提出了建议。

SARS冠状病毒NS融合蛋白的重组表达纯化与免疫学性质分析(英文)

刺突蛋白(S)和核心蛋白(N)是SARS冠状病毒的主要结构蛋白.在病毒细胞受体结合和病毒包装过程起重要作用.重组融合表达这2种蛋白具有较高的诊断学价值.对SARS病毒N蛋白和S蛋白氨基酸序列进行计算机分析,选择含有优势抗原表位的N蛋白1～227位氨基酸片段和S蛋白450～650位氨基酸片段,采用序列重叠延伸策略(sequenceoverlappingextension,SOE)构建编码N1227LinkerS450650新型融合蛋白的基因片段,导入原核表达载体,实现融合蛋白在大肠杆菌的高效表达.利用组氨酸标签亲和层析的方法纯化,获得高纯度的融合蛋白.对该融合蛋白的结构特征模拟分析的结果显示,其免疫化学性质均无显著改变.采用ELISA和Western印迹方法对其识别SARS冠状病毒特异性抗体的能力进行初步鉴定,显示该融合蛋白具有较好的抗原性和特异性,可有效特异性地检测恢复期SARS病人血清中抗SARS冠状病毒结构蛋白的抗体,可以作为SARS冠状病毒感染的辅助诊断手段.

神经纤毛蛋白-1的原核表达及兔抗小鼠神经纤毛蛋白-1抗体免疫学活性的研究

目的:在原核系统中分段表达神经纤毛蛋白-1(Nrp1);将纯化的蛋白免疫家兔后获得特异的抗体,并将其应用于检测组织和细胞中Nrp1分子的表达。方法:提取BALB/c胎鼠脑组织总RNA,通过RT-PCR分段扩增获得Nrp1基因片段,将PCR产物插入表达载体pET28a(+),获得含5个Nrp1基因片段的重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导蛋白表达并纯化;将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔获得针对目的蛋白的特异性多克隆抗体;利用Nrp1特异性多抗检测胎鼠脑组织和HeLa细胞中Nrp1的表达。结果:在原核系统中分段表达了Nrp1蛋白,通过Ni-NTA纯化了Nrp1蛋白片段;纯化的Nrp1蛋白免疫新西兰大白兔获得了具有免疫活性的多抗;兔抗小鼠Nrp1特异性多抗可用于检测组织、真核细胞中Nrp1的表达。结论:应用原核系统成功地表达了Nrp1蛋白,兔抗小鼠Nrp1特异性多抗可用于免疫学检测Nrp1分子的表达。

阿比多尔与连花清瘟胶囊对中东呼吸综合征冠状病毒的体内外抑制作用比较

目的评价阿比多尔与连花清瘟胶囊抑制中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)复制的体内外药效。方法以MTT方法检测阿比多尔和连花清瘟胶囊在非洲绿猴肾细胞的半数有毒浓度(TC_(50))。建立MERS-CoV感染非洲绿猴肾细胞模型,药物分别处理感染细胞48 h后收获上清,通过空斑试验检测培养上清病毒滴度;建立MERS-CoV感染表达h CD26小鼠模型,将小鼠随机分成3组,分别为病毒对照组、阿比多尔组[90 mg/(kg·d)]和连花清瘟胶囊组[1 300 mg/(kg·d)],每组6只,药物处理后于感染后第3、5天,采用空斑试验检测鼠肺病毒滴度,分析阿比多尔组、连花清瘟胶囊组与病毒对照组的病毒滴度差异。结果阿比多尔和连花清瘟胶囊在非洲绿猴肾细胞的TC_(50)分别为36. 78μg/m L和4 023. 27μg/m L,其体外抑制MERS-CoV复制的最低浓度分别为4μg/m L和900μg/m L,治疗指数分别为2. 19和0. 47;两种药物处理MERS-CoV感染小鼠后病毒滴度与病毒对照组差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论阿比多尔具有体外抑制MERS-CoV复制的作用。

新冠肺脾气虚方对体外新冠病毒增殖及炎症因子表达的影响

目的研究新冠肺脾气虚方(简称4-1)对新冠病毒(SARS-CoV-2)及普通冠状病毒(HCoV-OC43,229E和NL-63)的体外抗病毒作用,探讨其抗病毒抗炎机理。方法通过LC-MS分析4-1化学药效物质,MTT法检测药物毒性,CPE法确定该处方体外抗病毒活性,qRT-PCR法检测病毒载量和炎症因子表达水平。结果4-1含黄酮、甾体、倍半萜等94种化合物,对新冠及3种普通冠状病毒的选择指数范围为(8.44±0.49)~(52.26±2.3)。该处方在10、5、2.5 g·L^(-1)剂量下可抑制新冠病毒增殖,影响ACE2及S蛋白mRNA表达,下调IL^(-1)α及CCL-5/RANTES过表达;在20、10、5 g·L^(-1)等剂量下可抑制3种普通冠状病毒增殖,且抑制OC43、229E引起的IL-6、CXCL-8/IL-8、CXCL^(-1)0/IP-10、TNF-α、IFN-α、CCL-2/MCP-1、CXCL-9/MIG和CCL-5/RANTES表达上调,且抑制作用均呈剂量依赖性。结论肺脾气虚方具有抗多种冠状病毒增殖的活性,可抑制冠状病毒诱导的炎症因子表达上调。该研究为常见呼吸道病毒感染和新冠病毒等新发传染病的中药治疗提供了研究依据。

关于新型冠状病毒命名的思考与建议

2019年12月,一种由新型冠状病毒(2019-nCoV)引起的病毒性肺炎开始在武汉暴发流行。2020年2月11日,世界卫生组织(WHO)将新型冠状病毒肺炎命名为COVID-19(冠状病毒病2019),国际病毒分类学委员会(ICTV)的冠状病毒研究小组(CSG)建议把新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2(严重急性呼吸综合征冠状病毒2),既没有与疾病名称一致,也没有完全真实地显示该病毒本身的特征,因而立即引发关注和争议。基于COVID-19的病原学、流行病学和临床特征的基本信息,建议将新型冠状病毒命名为“人类冠状病毒2019”(human coronavirus 2019,简称HCoV-19)。文章回顾并评价了CSG的命名方法,指出他们使用基于基因序列信息进行病毒命名的方法并不合适,建议采用传统的联系疾病的病毒命名方法对具有明显疾病特点的病毒如2019-nCoV进行命名。

獭兔的冬季饲养与管理

目前，国外对优质獭兔皮的需求量很大。獭兔开发有着十分广阔的市场前景。獭兔生长快，周期短．肉用和皮用俱佳，有很高的经济价值。獭兔皮的价格可以说是跌荡起伏．经过几年的低谷之后，今年价格义重新反弹。如何生产优质的獭兔皮．对獭兔养殖者来说是最重要的。特别是在冬季．如果饲养管理不当．不但造成了因饲料消耗量增加、患病死亡率增高而加大开支．

浅谈生物实验教学中学生能力的培养

生物学实验课是生物教学中的重要环节，通过生物学实验可以提高学生的创造能力和动手能力，提高学生发现问题，分析问题和解决问题的能力。并且培养学生实事求是的科学态度．生物学实验是培养学生的操作能力、观察能力、分析问题和解决问题能力以及调动学生学习生物学兴趣的重要手段．下面，笔者就生物实验教学中如何培养学生的能力谈几点个人看法．

獭兔的冬季饲养与管理

在冬季,如果饲养管理不当,不但造成因饲料消耗增加、患病死亡率增高而加大开支,而且严重影响毛皮质量.冬季的獭兔饲养管理及疾病防治应抓好以下工作:

毛泽东军事思想科学价值之管见

近年来,有些人受资产阶级自由化思潮的影响,任意贬低毛泽东军事思想的地位和作用;还有的人对毛泽东军事思想缺乏研究,或知之甚少。仅仅看到战争形势发生了一些变化,就轻意地提出了毛泽东军事思想过时的种种观点,从而,放松了对毛泽东军事思想的学习和研究。针对这种情况,很有必要对毛泽东军事思想的科学价值和指导作用进行新的认识,以便使其更好地指导我国新时期的军队建设,提高国防的威慑能力,充分做好未来战争的准备。

FGL2拮抗新型冠状病毒鼠株MA17感染

目的通过新冠病毒小鼠适应性毒株MA17感染老年WT C57BL/6和Fgl2基因敲除小鼠,鉴定Fgl2基因敲除是否可以拮抗MA17毒株感染。方法使用MA17毒株感染老年WT小鼠和Fgl2基因敲除小鼠,记录生存率及体质量变化,通过H&E染色、免疫组化及Masson染色鉴定感染小鼠的炎性浸润及纤维化形成。结果与WT对照小鼠相比,Fgl2基因敲除小鼠表现出显著的生存率延长,体质量无明显下降,肺组织纤维蛋白原沉积减少以及肺纤维化显著改善。结论Fgl2基因敲除小鼠可以拮抗新型冠状病毒鼠株MA17感染引起的血栓及纤维化形成。

以开放的军事外交营造和谐世界

军事外交服从和服务于国家政治、外交和军事战略。国家的社会性质不同,对外政策不同,军事外交的目的和方式也不同。军事和外交是国家推行对外政策的两个最重要的手段,二者往往相辅相成,由此孕育了军事外交的生长。当今世界,军事外交成为国际政治中的一个重要领域,成为贯彻和谐世界的有益手段,以开放军事外交营造和谐世界,对于维护地区和世界的和平与稳定有着重要意义。

运用党的军事理论创新成果指导国防和军队建设

本文回顾了我党运用军事创新理论推进国防和军队建设发展的历史,总结其成功经验;剖析了新世纪新阶段国防和军队建设面临的新挑战和新机遇,阐发了胡锦涛主持中央军委工作以来提出的加强国防和军队建设的一系列新思想、新观点及其对指导国防和军队建设的重要意义;探讨了运用党的军事理论创新成果指导国防和军队建设应把握的若干问题。

沿着科学发展道路开创国防和军队现代化建设新局面

党的十七大为国防和军队建设的改革发展作出了新的战略部署,其中关于始终不渝走和平发展道路,走出一条中国特色军民融合式发展路子,加快机械化和信息化复合发展的思想,深刻揭示了国防和军队建设与国家发展、民族振兴、军队职责使命的内在联系,对新世纪新阶段开创国防和军队现代化建设新局面具有重大战略指导意义,是国防和军队建设必须做好的一篇大文章。