BMI与局部晚期口腔鳞癌患者预后及诱导化疗效果的相关性研究

目的:评估身体质量指数(BMI)与局部晚期口腔鳞癌患者长期预后及TPF诱导化疗效果的关系。方法:纳入前期Ⅲ期临床试验253例局部晚期口腔鳞癌患者的10年随访数据。采用SPSS 23.0软件包中的单因素和多因素Cox回归模型以及Kaplan-Meier方法进行生存分析。结果:253例患者基线期BMI范围在13.16~34.66 kg/m^(2)。患者BMI与吸烟状态高度相关(P<0.001);与临床淋巴结分期(cN)有明显相关性,其中较高的BMI患者通常具有较早的cN分期(P<0.05)。Kaplan-Meier分析表明,患者的BMI与总生存率(OS,P=0.014)、无瘤生存率(DFS,P=0.009)、无局部复发生存率(LRFS,P=0.013)和无远处转移生存率(DMFS,P=0.015)显著相关。多因素Cox回归分析发现,BMI是OS(P=0.015)、DFS(P=0.010)、LRFS(P=0.015)和DMFS(P=0.016)的独立预后因子。BMI与诱导化疗疗效相关性分析发现,仅BMI正常、临床Ⅳa期口腔鳞癌患者接受TPF诱导化疗者具有更好的OS(HR:0.425,95%CI:0.187~0.966,P=0.041)和DMFS(HR:0.425,95%CI:0.187~0.966,P=0.041)。结论:局部晚期OSCC患者BMI是其预后的独立预测因素。与BMI正常患者相比,偏瘦的患者临床预后可能更差,而超重和肥胖的患者预后更好。局部晚期OSCC患者中,BMI正常的临床Ⅳa期患者更易从TPF诱导化疗中获益。

基于基线期dNLR水平对局部晚期口腔鳞癌患者生存的预后预测—10年临床回顾

目的:探讨基线期中性粒细胞与淋巴细胞比率(derived neutrophils to lymphocyte ratio,dNLR)预测局部晚期口腔鳞癌患者生存预后的价值。方法:纳入临床试验项目(NCT01542931)中接受标准治疗的局部晚期口腔鳞癌患者的基线数据和10年长期随访数据。通过绘制受试者工作曲线及计算曲线下面积,以约登指数确定预后最好时dNLR的截断值,并以此值将所纳入患者分为高dNLR组和低dNLR组,以Kaplan-Meier生存分析和单因素、多因素Cox比例风险模型,比较2组患者的生存差异和风险因素。主要结局指标是总生存时间(overall survival,OS),次要结局指标是无瘤生存时间(disease-free survival,DFS)、无局部复发生存时间(local recurrence-free survival,LRFS)和无远处转移生存时间(distant metastasis-free survival,DMFS)。采用SPSS 25.0软件包对数据进行统计学分析。结果:纳入局部晚期口腔鳞癌患者115例,平均年龄(54.5±10.7)岁,平均随访时间(80.3±55.5)个月;dNLR的截断值为1.555。多因素Cox比例风险模型显示,dNLR是局部晚期口腔鳞癌患者生存的独立预测指标(OS:HR=1.172,95%CI:1.028~1.337,P=0.018;DFS:HR=1.123,95%CI:1.001~1.282,P=0.050;LRFS:HR=1.137,95%CI:1.002~1.291,P=0.047;DMFS:HR=1.162,95%CI:1.020~1.324,P=0.024)。结论:dNLR是局部晚期口腔鳞癌患者生存的独立预测指标,基线期dNLR越低,患者远期总体预后越好。

ANXA1对口腔鳞癌TPF化疗敏感性的影响及作用机制探讨

目的:探讨ANXA1在口腔鳞癌TPF化疗中的作用机制。方法:构建ANXA1过表达及低表达细胞系,通过细胞增殖、细胞毒性实验、实时荧光定量PCR和Western免疫印迹方法,分析ANXA1在TPF化疗中的作用,并探讨ANXA1通过上皮-间质转化(EMT)通路在TPF化疗中的作用机制。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:过表达口腔鳞癌细胞系ANXA1后,细胞生长速率降低,细胞周期减慢,对TPF诱导化药物敏感性降低,口腔鳞癌细胞出现EMT;低表达口腔鳞癌细胞系ANXA1后,细胞生长速率增快,细胞周期加快,对TPF化疗药物敏感性增加,口腔鳞癌细胞出现逆EMT。结论:在口腔鳞癌TPF化疗中,ANXA1过表达导致细胞出现EMT,对化疗敏感性降低。

人口腔鳞状细胞癌细胞系TSCC2016的建立及生物学特性分析

目的:建立一株口腔鳞状细胞癌细胞系TSCC2016,明确其生物学特性,为研究口腔鳞状细胞癌的发病机制和临床治疗提供工具。方法:选取新鲜的口腔鳞状细胞癌患者手术标本,采用组织块培养法,建立口腔鳞状细胞癌细胞系TSCC2016,观察其细胞形态和生长特性,对其表面标记、细胞核型和裸鼠成瘤等进行检测。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:TSCC2016的传代已经超过100代。细胞生长稳定,形态为均一的多角形上皮细胞,具有典型的口腔鳞状细胞癌细胞特点。细胞STR分型结果表明,TSCC2016细胞为原代培养出的口腔鳞状细胞癌细胞,无其他肿瘤细胞系污染。TSCC2016细胞的成瘤性较好,成瘤率为100%,瘤体生长较快。结论:成功建立了一株口腔鳞状细胞癌细胞系TSCC2016,为口腔鳞状细胞癌的基础研究提供了一个稳定的细胞株。

还原型谷胱甘肽稳态在腭裂发生中的作用

目的 :观察还原型谷胱甘肽稳态的改变对腭中嵴上皮细胞形态及腭裂发生率的影响,探讨氧化自由基在四氯二苯二噁英(TCDD)致畸过程中的作用。方法:将GD10的SPF级C57BL/6J孕鼠随机分为4组,TCDD组:腹腔注射生理盐水和TCDD灌胃;TCDD+丁硫氨酸-亚砜胺(BSO)组:腹腔注射BSO 4 h后给予TCDD灌胃;BSO组:腹腔注射BSO和玉米油灌胃;对照组:腹腔注射生理盐水和玉米油灌胃。光学显微镜和电子扫描电镜下观察胎鼠腭胚突的发育及细胞表面形态。统计各组小鼠在GD17的腭裂发生率。免疫组织化学方法检测各组腭中嵴上皮各时期CYP1A1蛋白的表达。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计分析。结果:TCDD成功构建高致畸率的腭裂模型。BSO增加了5%的腭裂发生率,但是相对于TCDD组无显著差异(P>0.05)。TCDD组腭胚突上抬时间较对照组推迟1 d,添加BSO的TCDD组腭胚突上抬过程较正常组减慢。电镜下胚胎发育的各发育时期,腭中嵴上皮表面TCDD组与对照组有显著差异。免疫组织化学检测发现,TCDD组腭中嵴上皮可见CYP1A1高表达。结论:扰乱体内还原型谷胱甘肽稳态,可能会减少对小鼠体内氧化自由基的消耗,从而影响腭胚突的融合,继而加速了TCDD的毒性,影响腭裂发生。

TP53截断突变作为局部晚期口腔鳞癌诱导化疗预测性生物标志物的探讨

目的:检测TP53在局部晚期口腔鳞癌患者中的突变情况,探讨TP53截断突变能否作为生物标志物筛选诱导化疗获益患者。方法:选择2008—2014年收治的101例局部晚期口腔鳞癌患者,收集患者临床病理信息、肿瘤及正常对照新鲜冷冻或石蜡包埋样本。采用Ion Torrent PGM平台进行高通量测序,通过生物信息学软件进行突变识别及注释,采用SPSS 23.0软件包进行统计学分析。结果:101例患者中,男74例,女27例,中位年龄59岁,中位随访时间为34.9个月。平均测序深度肿瘤样本为2366乘,正常对照样本为2225乘。在73例患者中,检测出102个TP53非同义突变(等位基因频率≥3%)。与42例手术组口腔鳞癌患者相比,诱导化疗组(59例)无远处转移生存率较好(P=0.090),但总生存率无显著差异。亚组分析显示,带有TP53截断突变的患者可以从诱导化疗中得到无远处转移生存获益(P=0.038)。结论:本研究未发现诱导化疗能整体提高局部晚期口腔鳞癌患者的生存期,但TP53截断突变可作为潜在的预测性生物标志物,筛选诱导化疗无远处转移生存获益的患者。

Stathmin表达与局部晚期口腔鳞癌患者TPF诱导化疗远期疗效的相关性分析

目的:验证微管解聚蛋白(Stathmin)能否预测口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者从多西紫杉醇、顺铂、5氟尿嘧啶(TPF)诱导化疗中远期获益。方法:收集2008年3月—2010年12月入组TPF诱导化疗临床试验的256例OSCC患者的远期随访结果。收集患者肿瘤活检标本,进行Stathmin免疫组织化学染色并评分。根据Stathmin表达评分进行亚组预后分析。采用SPSS 13.0软件包将Stathmin和其他基线特征进行单因素、多因素和Cox回归模型预后分析。结果:Stathmin的表达可预测OSCC患者对TPF诱导化疗的反应,Stathmin低表达的OSCC患者从TPF诱导化疗中获益,而高Stathmin表达的OSCC患者不能获益于TPF诱导化疗。Stathmin的表达是独立的预测因子。结论:Stathmin是独立的预测OSCC诱导化疗疗效的生物标志物,基于Stathmin筛选指导OSCC患者接受TPF诱导化疗的后续临床研究具有重要意义。

长春新碱对口腔鳞癌中Stathmin调控作用的实验研究

目的:先前的研究发现,微管解聚蛋白(Stathmin)是潜在的指导局部晚期口腔鳞癌诱导化疗的生物标志物,本研究旨在进一步探索长春新碱对Stathmin的调控作用以及其作为TPF化疗替代药物的潜能。方法:构建Stathmin过表达及敲减稳转细胞系,通过细胞增殖试验、q-PCR、Western免疫印迹、皮下移植瘤等实验方法,采用SPSS 23.0软件包进行统计学差异分析。结果:长春新碱可抑制口腔鳞癌细胞系Stathmin的表达。高表达Stathmin后,口腔鳞癌细胞系对长春新碱的敏感性提高。针对高表达Stathmin的口腔鳞癌细胞系移植瘤,长春新碱具有良好的抑瘤效果。结论:对于高表达Stathmin的口腔鳞癌,长春新碱是潜在的替代化疗药物。

可利霉素对口腔鳞癌细胞生物学活性的影响

目的:体外评价可利霉素对口腔鳞状细胞癌的抗肿瘤活性。方法:梯度浓度可利霉素分别处理口腔鳞状细胞癌细胞(HN6/HB96细胞系),采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,绘制生长曲线;采用划痕实验分析细胞迁移能力;采用平板克隆形成实验分析细胞克隆形成能力;采用流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡。采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:可利霉素浓度依赖性抑制HN6/HB96的体外增殖,随着药物浓度增加,细胞迁移和克隆形成能力显著下降(P<0.05);可利霉素使处理过的口腔鳞状细胞癌细胞G1期比例显著升高,S期和G2/M期比例显著下降,细胞周期阻滞于G1期(P<0.001)。可利霉素诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡,随着药物浓度增加,细胞凋亡率显著上升(P<0.01)。结论:可利霉素体外抑制口腔鳞状细胞癌细胞的生物学活性,为可利霉素用于口腔鳞状细胞癌的治疗提供了实验依据。