新型Taq Man-MGB探针在结核分枝杆菌实时PCR检测中的应用

为建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的结核分枝杆菌DNA定性定量检测方法 ,以TaqMan探针技术为基础 ,运用TaqMan MGB探针 ,实时检测临床标本中的结核分枝杆菌DNA .用来自临床标本的DNA及克隆于载体的IS6 1 1 0序列检测所建立方法的有效性 .结果显示 ,所建立方法的最低检测限度为 1个基因拷贝 反应 ,在每反应 1 0 0 ～ 1 0 8拷贝范围内 ,Ct 值同DNA量的对数呈线性关系 .同一模板不同时间或同一时间不同管内扩增 ,所得Ct 值恒定 .用该方法检测 37例结核分枝杆菌培养阳性的痰液标本 ,敏感度为 1 0 0 % ;用该方法检测 1 6例TB系列阴性参考品 ,特异性为1 0 0 % .结果表明 。

新型MGB探针在沙眼衣原体实时PCR检测中的应用

为建立基于TaqMan MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测方法 ,探讨其临床应用价值 ,用PCR法扩增沙眼衣原体隐蔽质粒pLVG44 0 2 464～ 2 980nt段 ,并克隆入 pMD18 T载体用作参比模板 ,设计一对引物和一个TaqMan MGB探针 ,优化反应条件 ,建立沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统 ,并运用该系统同时应用连接酶链式反应 (LCR)法对临床标本进行检测 .结果显示所建立的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统 ,最低检测限度为 1DNA拷贝每反应 ;在 10 0 ～ 10 9DNA拷贝每反应范围内 ,Ct 值 (每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数 )和DNA拷贝数呈线性关系 (r >0 990 ) ;对临床标本检测结果同LCR分析结果吻合率为 10 0 % .以上结果表明 ,所建立的基于TaqMan MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统具有敏感性高、特异性强和线性检测范围广等特点 。

差异显示反转录PCR技术研究进展

分析一对细胞或组织在不同状态下基因表达的差异,已成为分子生物学研究领域的热点之一.近年来,用于识别差异表达基因的方法已发展起来多种.DDRTPCR是近年来较为广泛应用的一种技术.理论上,DDRTPCR技术比较简单,但实施起来却存在着假阳性率高,凝胶中单条cDNA带成分不均一,所获cDNA仅代表着mRNA3′UT区(约300bp)以及一些低拷贝数mRNA不能有效被呈现等问题.对DDRTPCR技术的改良也主要集中在解决这些问题方面.

人胃癌细胞一种高表达基因的克隆及序列测定

采用DDRT PCR法 ,以人胃上皮细胞GES 1为对照 ,从人胃癌细胞SGC 790 1中克隆高表达基因 ,并对所克隆的基因进行斑点杂交分析 ,序列测定 ,序列相似性分析及开放读框分析 .斑点杂交分析结果表明所获克隆YA6 1为人胃癌细胞SGC 790 1中高表达基因 .序列相似性分析结果表明该基因序列为一新基因序列 .GenBank收录号为AF2 2 0 415 .开放读框分析结果表明该基因序列有一完全开放读框 .

PCR法从痰液中快速检测结核分枝杆菌

目的：建立一种从痰液中检测结核分枝杆菌简便、快速且灵敏的方法．方法：用碱液化、水洗和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００热裂解法从痰液中制备结核分枝杆菌ＤＮＡ，进行ＰＣＲ反应，并将该方法同其它几种方法进行比较．结果：该方法同抗酸性染色镜检法有显著差异，同酚／氯仿法具有相似的灵敏度．结论：用该方法从痰液中检测结核分枝杆菌具有灵敏、简便和快速等特点．

HeLa细胞中可溶性MHCⅠ产生于晚期内体

可溶性主要组织相容性复合体I （ soluble major histocom-patibility complex class I , sMHC I ）,近年来逐渐成为研究热点。该类分子II司造血系统恶性肿瘤疾病相关…，在患者的m清中，其水平显著升高。柜功能E，sMHCI可通过诱导凋亡的方式清除抗肿瘤细胞，具有免疫逃逸分子功能，然而其产生机制还不清楚。

对中国传统文化和合性的反思(之一)

文章着重对历史上中国一元化的封建专制的政治结构及政教高度合一的文化结构下的儒家的“天人合一”作一深层反思,用历史的、中西的文化比较的方法,找到儒家传统文化的独特内涵及其与历史与自身的一脉相承性,从历史命脉和自身的文化命脉上把握儒家文化和合性及这种和合文化中积极的方面及其隐藏的消极因素,及其对国民性及中国文化发展的巨大深远的影响。在反思中凸现当代国民性建设的重要性。从深层次反思中国传统的儒家文化是构建新时代国民性及中国文化的关键,也是文章写作的立意所在。

肿瘤个体化医疗——路在何方?

药能救人,也能杀人。同样的药对有的人安全有效,对有的人却无效,甚至会发生不良反应。药物反应的差别最终引起了医学史上的一场个体化医疗革命。研究表明,除了性别、年龄等因素外,遗传因素是引起药物反应差异的主要原因。基于现有化疗药物的肿瘤药物基因组学研究在各个领域正如火如荼地展开,通过仔细分析,发现这条路虽愿望良好,但过程曲折、代价昂贵、价值有限,而且是以瘤为本。那么肿瘤个体化医疗该如何实现呢?要实现肿瘤个体化医疗,药物研发不能再走以药为本和以瘤为本的路线,而是走以人为本的路线,即先应用药物基因组学从特定人群寻找药物设计靶标,再围绕靶标进行个体化药物研发,最后以特定人群为药物临床试验对象完成新药研发过程。

道与技--解读庄子的“无为”境界

庄子阐发的人的技艺活动并非着力于对现实层面的人的技能活动的描述,而是为了展示人的自然无为的达道境界。庄子并非断然否定技,他只是反对被机心所裹挟的技。庄子所揭示的技中蕴含的自然无为的达道境界,既是天人合一的生存境界,也是人的自然自由的美的生存意境,表达了庄子对人的本真生存、人的自由的人性化的生存形态的追求,具有超越的现实意义。

关于实施期刊品牌战略的思考

在社会主义市场经济的条件下，品牌是一个行业赖以生存和发展的基础，是一个行业的成功之道，是企业占领市场和获取高利润的金钥匙。品牌效应成为当前各行各业经济活动中生死攸关的重大战略问题。品牌战略不仅只限于工业企业而是涉及各个行业领域，作为社会主义市场经济传媒的重要工具——期刊业要想有更大的发展、长盛不衰，就必须实施品牌战略。

庄子的自然主义意蕴(之二)

此篇文章紧接着上一篇本栏目发表的文章,对庄子的自然主义继续加以探讨。通过对庄子的世界观、生命态度、认识理论中的自然主义做层层剖析,进一步揭示庄子自然主义的独特意蕴,展示其独特的对人类生存的自然主义的形上探索、理想追求和自然主义的超越境界和生存智慧。这不仅是对闲世的狭隘和局限的生存态度的批判,也是人生永恒的参照。它是中国传统文化的自然主义的重要内容之一,对中国文化的人文精神产生了深远的的影响。

对中国传统文化和合性的反思(之二)

文章着重对历史上中国一元化的封建专制的政治结构及政教合一的文化结构下的道家的"天人合一"思想的和合性作一深层反思,用历史的方法、中西文化比较以及传统儒家文化与传统道家文化比较的方法,把握传统道家文化和合性的独特内涵、其内涵所具有的一脉相承性及其文化的和合性的历史命脉,并从中找到传统道家文化和合性的积极方面和其隐藏的消极因素,找到其对中国国民性和中国文化发展的巨大的深远的影响,在反思中凸现当代国民性建设的重要性。从深层次反思中国传统的道家文化是构建新时代国民性及中国文化的关键。