酸性棕SR分光光度法测定血清白蛋白

在BrittonRobinson酸性缓冲溶液中,加入非离子表面活性剂阿拉伯胶,能使酸性棕SR(ASR)与血清白蛋白形成复合物,最大吸收波长为610nm,比ASR红移165nm。采用分光光度法研究了该结合反应的最佳条件,并据此建立了一种测定血清蛋白的新方法。λ=610nm时,εBSA=623×104L·mol-1·cm-1,εHSA=723×104L·mol-1·cm-1;牛血清白蛋白(BSA)在0～910mg·L-1,人血清白蛋白(HSA)在0～952mg·L-1范围内服从比尔定律。检出限分别为BSA572mg·L-1,HSA515mg·L-1。对6个人血清蛋白总量平行6次测定,相对标准偏差18%～44%,回收率936%～1091%,并对5只小白鼠的血清蛋白总量进行了测定。

酸性棕NR分光光度法测定血清白蛋白

采用分光光度法研究了酸性棕NR与血清白蛋白的结合反应。在Brit ton Robinson(B-R)(pH2.50)缓冲溶液中,酸性棕NR与血清白蛋白结合生成沉淀,探讨了该结合反应的最佳条件,并据此建立了一种高灵敏度的测定血清白蛋白的新方法。牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)分别在28.0～112.0mg/L、24.4～122.0mg/L范围内服从比尔定律,其表观摩尔吸光系数分别为:1 44×106L·mol-1·cm-1(BSA)、1.32×106L·mol-1·cm-1(HSA)。对7个人血清样品蛋白总量平行测定6次,相对标准偏差0.83%～3.02%,回收率90.90%～109.80%,且与医院双缩脲法结果基本一致。

蛋白质的偶氮胂Ⅲ-钡(Ⅱ)配合物光谱探针测定

研究了偶氮胂Ⅲ-Ba（Ⅱ）配合物与牛血清白蛋白（BSA）三体系复合物的吸收光谱，建立了一种新的蛋白质定量分析方法。研究发现，在表面活性剂阿拉伯树胶（gumarobic）存在下的酸性溶液中，偶氮胂Ⅲ-Ba（Ⅱ）配合物与BSA发生反应形成三元复合物，引起吸收光谱发生红移，吸收峰明显增高。摩尔吸光系数为ε611=1．01×10^6 L·mol^-1·cm^-1，BSA的质量浓度在0—67mg／L范围内服从比尔定律。用摩尔比法研究了此配合物与BSA的最大结合数为51。该法灵敏度高，选择性好，用于实际血清样品总蛋白的测定，与双缩脲法相关性良好。

酸性棕染料与蛋白结合反应的研究(Ⅰ)

采用分光光度法研究了酸性棕SR(ASR)在不同酸度条件下的吸收光谱,并研究了其与牛血清白蛋白(BSA)的结合反应,探讨了结合反应的机理,考察了表面活性剂对结合反应的影响.实验证明:ASR存在着两种平衡结构;在酸性水溶液中能与牛血清白蛋白结合生成沉淀,随着ASR浓度的变化,结合反应产物也发生变化;表面活性剂对结合反应有较大的影响,非离子表面活性剂阿拉伯胶的加入可使沉淀完全转化为结构稳定的可溶物,使ASR作为一种新型、廉价的染料应用于蛋白的定量分析成为可能,拓宽了染料结合法的应用范围.

偶氮胂Ⅲ—Ba(Ⅱ)共振散射光谱法测定人血清蛋白

在pH 3.0~3.8的BR缓冲溶液中,偶氮胂Ⅲ-Ba（Ⅱ）与蛋白质结合形成复合物,导致体系的共振散射信号增强,据此建立了蛋白质测定的共振散射光谱法。结果表明,在优化的实验条件下,牛血清白蛋白（BSA）的线性范围为0~1.0 mg/L,检出限为21.4μg/L;将该法用于人血清中蛋白质的测定,与医院测定结果基本一致;方法的批内精密度为2.8%（n=6）,批间精密度为3.5%（n=6）,回收率为96.0%~100.0%。

荧光光谱法研究偶氮胂Ⅲ与牛血清白蛋白的相互作用

目的为了研究偶氮胂Ⅲ与牛血清白蛋白(BSA)在不同pH条件下(pH=2.0～9.0)的相互作用机理。方法采用荧光光谱法研究偶氮胂Ⅲ对BSA荧光的影响,通过计算获得作用机理的诸多信息。结果偶氮胂Ⅲ对BSA有较强的荧光猝灭作用,猝灭机制为生成复合物的静态猝灭;偶氮胂Ⅲ与BSA间的结合常数在pH 3.0～5.0最大,结合位点数为1;pH=3.5和4.5时偶氮胂Ⅲ与BSA色氨基酸残基间的结合距离在4.10 nm左右;两者主要靠静电引力结合;金属离子Mg2+、Ba2+和Ca2+对两者结合作用有影响。结论偶氮胂Ⅲ及偶氮胂Ⅲ-Ba2+、偶氮胂Ⅲ-Ca2+可作为优良的光谱探针,用于蛋白质的定量测定。

偶氮胂Ⅰ分光光度法测定血清钙

在pH9．5的三乙醇胺缓冲介质中，以偶氮胂Ⅰ为显色剂，8-羟基喹琳-5-磺酸为掩蔽剂，分光光度法测定了血清钙，对最佳反应条件和方法性能进行了系统研究。该法显色络合物最大吸收波长为570nm，线性范围0～0．058mmol／L；当回收样品的钙浓度分别为3．33，4．34，5．06mmol／L时，回收率分别为101％，101％，93％；中值和低值批内变异系数（CV）分别为0．0124和0．0142；与偶氮胂Ⅲ法比较，Y=0．02＋0．98x，r=0．9558，两种方法无显著性差异；镁浓度为2．0mmol／L时无显著干扰。该法具有灵敏度高、简便、快速、试剂单一稳定的优点，适合血清钙的手工测定和自动分析。

5-Br-PADCAP直接光度法测定血清未饱和铁结合力

为建立简便、灵敏的双试剂自动化分析法测定血清未饱和铁结合力（UIBC），在表面活性剂存在下，用2-（5-溴-2-吡啶偶氮）-5-[（N，N-二羧基甲基）氨基]苯酚（5-Br-PADCAP）为显色剂测定血清UIBC。结果表明，线性范围0～90μmol/L，平均回收率101.57％，批内变异系数（CV）和批问变异系数分别为0.028、0.046，与日本和光UIBC测定试剂盒比较具有良好的相关性，线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0133X-0.3356，r=0.9961。108例健康人血清UIBC含量为31.65～50.81μmol／L（χ±2s）。用5-Br-PADCAP双试剂自动化分析法测定血清UIBC方法简便、灵敏可靠，适合临床应用。

以5-Br-PADCAP为显色剂计算法测定血清总铁结合力

目的:建立以5-Br-PADCAP为显色剂计算法测定血清总铁结合力(TIBC)。方法:通过测定血清铁和血清未饱和铁(UIBC)含量,以血清铁和血清UIBC含量之和计算血清TIBC含量。结果:该法线性范围0～140μmol/L,平均回收率为98.5%,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.032、0.043,与临床检验操作规程推荐的方法比较具有良好的相关性,线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0228X+1.05,r=0.9801。65例健康男性血清TIBC含量为45.7～74.2μmol/L(x±2s),57例健康女性血清TIBC含量为51.4～75.2μmol/L(x±2s)。结论:以5-Br-PADCAP为显色剂计算法测定血清总铁结合力TIBC,方法简便、灵敏可靠,适合临床应用。

秦皮甲素、秦皮乙素与血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱法研究了中药有效成分秦皮甲素、秦皮乙素与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)的相互作用。结果表明:秦皮甲素、秦皮乙素对血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其荧光猝灭为单一的静态猝灭过程,其作用机制属能量转移机制。求得不同温度下反应的结合常数K。由反应焓变、熵变确定它们间的结合主要是静电引力。依据非辐射能量转移机理,求出了其结合位置和能量转移效率。

两种喹诺酮类抗生素对亚心形扁藻的毒性效应研究

研究了恩诺沙星和盐酸环丙沙星两种喹诺酮类抗生素对亚心形扁藻的毒理学效应。经多组不同浓度的两种抗生素处理后,分别对扁藻的96EC50、叶绿素和胞外聚合物(EPS)进行分析。结果表明,两种抗生素在低浓度时对扁藻生长具有促进作用,而在高浓度时体现抑制毒性作用。高浓度时,抗生素浓度越高对扁藻的生长、叶绿素和胞外聚合物抑制效果越明显,但当浓度达到一定高度后,抑制会达到其阈值。恩诺沙星和盐酸环丙沙星对扁藻的半生长抑制率分别为19.8 mg/L和28.7 mg/L。

溴甲酚紫与血清白蛋白的相互结合反应

应用荧光光谱法研究了水溶液体系中,溴甲酚紫与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用.结果表明溴甲酚紫对血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其荧光猝灭主要为静态猝灭,从荧光猝灭结果求得不同温度下溴甲酚紫与BSA,HSA的结合常数K,发现随反应温度上升K值下降.由反应焓变、熵变,确定了溴甲酚紫与血清白蛋白的结合主要是静电引力.依据非辐射能量转移机理,测定了不同温度下溴甲酚紫与血清白蛋白相互结合时,其给体-受体间距离和能量转移效率.进一步证实了该反应为单一静态猝灭过程,且阐明了其猝灭机理是通过能量转移产生的.

2956例温州地区儿童全血铅水平测定

目的调查温州地区1个月～13岁儿童铅水平以及铅中毒情况。方法采用原子吸收法，检测2956名儿童的全血铅水平，并比较不同年龄组男女童的血铅水平。结果本组儿童全血铅水平为60．30±29．57μg／L，男、女血铅水平分别为65．55±31．23μg／L、57．72±26．78μg／L；全血铅浓度≥100μg／L者，占总调查人数的10．77％，不同年龄的全血铅水平及不同性别的全血铅水平存在一定程度的差异。结论男童血铅水平显著高于女童（t＇=6．98，P〈0．05），男童铅中毒检出率明显高于女童（X^2=18．99，P〈0．001），无论男童、女童，全血铅浓度高峰以及≥100μg／L者的高峰均出现在5岁组。

自配复合型防霉剂对变色移膜革防霉效果的研究

根据所报道的各种防霉剂特性,自配了针对变色移膜革的复合型防霉剂。从霉变的变色移膜革上分离出各种霉菌,在验证了单成分防霉剂防霉效果的基础上,试验各成分的最佳组合。通过抑菌圈法、最低抑菌浓度(MIC)法及皮革厂实际应用,证实该自配复合型防霉剂对变色移膜革有较好的防霉效果。

苯酚磺酞类酸性染料与牛血清白蛋白的结合反应

应用荧光光谱法研究了水溶液体系中,苯酚磺酞类酸性染料苯酚红、甲酚红、氯酚红、溴酚红、甲酚紫与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用.实验表明:苯酚磺酞类酸性染料对牛血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其荧光猝灭主要为静态猝灭,从荧光猝灭结果中求得不同温度下各种染料与BSA的结合常数K,发现染料取代基的引入使K值增大,且随反应温度上升K值下降.由染料与BSA反应焓变、熵变,确定染料与BSA的结合主要是静电引力.依据非辐射能量转移机理,探讨了不同温度下该类染料与BSA相互结合时,其给体-受体间距离和能量转移效率,进一步证实了该类反应为单一静态猝灭过程,且阐明了其猝灭机理是通过能量转移产生的.

蛋白质光度法定量分析研究现状

本文综述了吸光光度法、荧光光度法、共振散射光度法定量分析蛋白质的研究现状,参考文献86篇。

温州市1～13岁儿童血铅水平调查

随机抽取了温州市1～13岁的散居和集居儿童共2 038名,其中男1 404名,女634名,于2004年1月至2005年6月进行了静脉血铅测定.结果显示,温州市1～13岁儿童血铅为(60.30±29.57)μg/L,血铅含量≥100 μg/L 者,占总调查人数的10.99%,不同年龄的血铅水平及不同性别的血铅水平均存在差异.

Nitro-PAPS直接光度法测定血清锌

目的建立一种快速、简便、灵敏的血清锌分光光度测定法。方法在非离子型表面活性剂Tween-80及TritonX-100存在下，用水溶性试剂2-（5-硝基-2-吡啶偶氮）-5-[N-正丙基-N-（3-磺酸丙基）氨基]苯酚二钠（简称Nitro—PAPS）作显色剂直接光度法测定血清锌。结果本法显色络合物最大吸收波长为580nm，线性范围达71．2μmol／L，表观摩尔吸光度为1．38×10^5L／（mol·cm），回收率为98．2％-101、9％，批内变异系数（cv）为2．4％，批间CV为3、5％，与原子吸收分光光度法（AAS）比较，Y=0．997X4-0．17，P〉0、05，r=0．9913，60例健康人血清锌含量为（9．3—20．9）μmol／L（x±2s）。结论本法血清用量少，不必去蛋白，具有操作快速、简便、结果灵敏可靠等优点，适用于血清锌的手工测定和自动分析。

以5-Br-PADAP为显色剂计算法测定血清总铁结合力

建立了以5-Br—PADAP为显色剂计算法测定血清总铁结合力（TIBC）的方法，通过测定血清铁和血清未饱和铁（UIBC）含量，以血清铁和血清UIBC含量之和计算血清TIBC含量。该法线性范围0～168μmol／L，平均回收率为100．4％，批内变异系数（CV）和批间变异系数分别为0．031、0．046，与临床检验操作规程推荐的方法比较具有良好的相关性，线性回归方程和相关系数分别为y=0．9978x＋1．26，r=0．9745。65例健康男性血清TIBC含量为47．61～76．24μmol／L（x±2s），57例健康女性血清TIBC含量为52．56～77．45μmol／L（x±2s）。以5-Br—PADAP为显色剂计算法测定血清总铁结合力TIBC方法简便、灵敏可靠，适合临床应用。