松球壳孢菌菌落生长速度对比研究

利用 79个辽宁松球壳孢菌菌株与 4个A型和B型标准菌株及 4个美国菌株进行菌落生长速度对比研究发现 ,除个别菌株外 ,辽宁菌株的菌落生长速度显著慢于供试的A型标准菌株和美国菌株 ;美国菌株与A型标准菌株的菌落生长速度相近 ,显著快于B型标准菌株 ;辽宁菌株之间也有显著差别。同时发现 。

产蛋鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及其遗传变异和血清型分析

【目的】明确产蛋鸡源传染性支气管炎病毒(IBV)分离株(GX-YL170808)的结构基因及抗原变异情况,为广西种鸡场的传染性支气管炎(IB)防控提供科学依据。【方法】通过鸡胚尿囊液血凝试验、鸡胚侏儒化试验及3'端非编码区(3'-UTR)测序对分离株进行鉴定;采用RT-PCR扩增S1、E、M和N基因,以MegAlign和MEGA 6.0分别进行核苷酸序列相似性及系统发育进化树分析,运用RDP4和SimPlot对S1、E、M和N基因进行重组分析,利用NetNGlyc 1.0和NetOGlyc 4.0进行糖基化位点预测分析,并通过中和试验进行血清型鉴定。【结果】分离株的鸡胚尿囊液血凝试验呈阴性,鸡胚盲传5代后出现侏儒胚典型病变,其3'-UTR序列与IBV的3'-UTR序列相似性为99.13%;综合病鸡临床症状及其病理变化可确定该病毒为IBV,命名为GX-YL170808。GX-YL170808分离株S1、E、M和N基因的开放阅读框(ORF)长度分别为1620、327、675和1230 bp,对应编码540、109、225和410个氨基酸残基,与参考株的核苷酸序列相似性分别为60.4%~96.5%、81.8%~97.2%、85.6%~93.5%和85.7%~92.0%;GX-YL170808分离株的S1、M和N基因属于LX4型,而E基因属于LDT3型;4个结构基因内部均无重组区域;除S1基因同时具有N-糖基化和O-糖基化位点外,E、M和N基因均只有N-糖基化位点;S1蛋白裂解位点为HRRRR,与参考株LX4的裂解位点相同。GX-YL170808分离株属于血清4型,不同于常用的疫苗株H120(血清3型)和4/91(血清5型),也不同于广西主要侵害雏鸡的IBV优势血清型。【结论】产蛋鸡源IBV分离株并非疫苗株,其基因型和血清型均已发生变异,且该毒株的血清型不同于广西地区侵害雏鸡的优势血清型,提示了广西地区IB防控的严峻性及新型多价疫苗研发的紧迫性。

二棒粗轧机组立式轧机固定端轴承箱密封机构的改进

本文通过对二棒粗轧机组轧机立式机架固定端轴承箱密封机构进行分析、研究,对轴承箱密封机构部分备件进行了完善改进,到达解决轴承箱频繁烧损的难题,实现二棒生产线的高效生产的目标。

大鲵脾脏结节症病原菌的分离鉴定及药敏试验

为探究重庆地区中国大鲵(Andrias davidianus)脾脏结节症的病因及防控措施,本研究对发病大鲵进行了临床剖检及病理组织学观察,并采用微生物学方法从其肝脏、脾脏中分离病原菌,通过人工感染试验确定分离菌株的致病性,并对菌株的基本形态、理化特性、分子特征及药物敏感性等进行了系统研究。结果显示,患病大鲵脾脏有大量白色结节,质脆,病理切片发现脾组织有出血及丝网状纤维素分布,淋巴细胞部分消失;肝细胞肿胀、变性。从肝脏中分离到1 株病原菌,命名为KNL-1。人工感染试验发现,该菌对试验鲫鱼和大鲵均有较强的致病力,试验动物死亡率高达100%,大鲵发病症状与临床自然发病症状一致,确认为该病的致病菌。综合分离菌的16SrDNA 序列测定、培养特性、生化试验及BIOFOSUN-GN 系统鉴定结果,确定KNL-1 为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种(Aeromonas salmonicida ssp. masoucida)。药敏试验结果显示,该菌对头孢氨苄、卡那霉素、头孢他啶、头孢曲松、先锋霉素、新霉素、庆大霉素、左氧氟沙星、米诺环素、丁胺卡那霉素和氟苯尼考高度敏感;对氨苄西林、麦迪霉素和羧苄西林耐药。

C型禽偏肺病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立及应用

根据GenBank发表的禽偏肺病毒(aMPV)F基因序列,设计一对特异性引物,建立C亚型aMPV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。对该反应体系进行条件优化,建立了标准曲线,并进行特异性、敏感性及重复性试验,然后将建立的方法应用于临床样品和攻毒样品的检测。结果显示:标准曲线循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系;建立的方法只能检测出C亚型aMPV,最低可以检测到0.8×10~1拷贝/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于4%。应用建立的方法对43份临床样品检测,结果显示均为阴性;对42份35日龄SPF鸡人工感染后1～21 d的气管和肺脏样品进行检测,结果显示攻毒样品均为阳性。因此,研究建立的特异、灵敏、重复性好的C型aMPV实时荧光定量PCR方法,既可适合于该病的早期诊断和流行病学调查,又为该病毒的致病机制研究提供技术支撑。

鸡传染性支气管炎病毒纳米PCR检测方法的建立及初步应用

根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的3′端非编码区保守区域,设计并合成一对特异性引物,建立IBV纳米PCR检测方法,并进行了特异性、灵敏性和重复性试验,然后将建立的方法进行初步应用。结果显示:该方法特异性良好,能从4种不同基因型IBV核酸样品中检测到约346bp的目的条带,而对禽偏肺病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、马立克氏病病毒、禽白血病病毒、鸭肝炎病毒等其他病原检测结果均为阴性;敏感性试验表明,纳米PCR的最低检测浓度为1.01×10^-4ng/μL,其敏感性是普通PCR的10倍;重复性试验显示3次均能检出IBV核酸。纳米PCR方法的临床应用表明,送检样品及攻毒鸡样品的检出率分别达到50%(10/20)和60%(30/50),与普通PCR方法检测结果符合率为100%。研究建立的IBV纳米PCR检测方法具有较高的敏感性和良好的特异性,为IBV的临床诊断、病原检测和流行病学调查提供了新的技术手段。

广谱型鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

【目的】制备出广谱型鸡传染性支气管炎病毒(IBV)N蛋白单克隆抗体,为后续N蛋白保守区域表位鉴定及IBV通用型快速检测方法的建立打下基础。【方法】通过原核表达IBV广西优势血清型代表株GX-YL5的N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,选取血清效价在104以上的免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA筛选后通过小鼠腹水诱生法制备单克隆抗体,采用Western blotting、IFA及间接ELISA等进行效价、亚型、反应特异性、交叉反应谱鉴定,并将制备获得的单克隆抗体应用于免疫组化检测,检测SPF鸡人工感染4株IBV代表变异株(GX-NN130048、GX-NN160421、GX-QZ171023和GX-QZ170728)后不同时段内气管和肾脏中的带毒情况。【结果】制备获得的单克隆抗体N2D5效价大于217,其亚型为IgG2b;Western blotting和IFA鉴定结果表明单克隆抗体N2D5只与IBV发生阳性反应,与新城疫病毒(NDV)、传染性喉气管炎(ILTV)、禽偏肺病毒(a MPV)、传染性法氏囊病(IBDV)、禽白血病病毒(ALV)及马立克氏病毒(MDV)的反应结果均呈阴性;单克隆抗体N2D5能与国内流行的多种基因型及广西目前流行的7种血清型IBV发生交叉反应,包括常用标准株、疫苗株和野毒株。将制备获得的单克隆抗体N2D5应用于免疫组化检测,结果发现在3株鸡源IBV代表性变异株及1株鸭源分离株人工感染SPF鸡后不同时段内的气管和肾脏中均能检测到病毒信号,进一步证明其广谱性。【结论】基于杂交瘤技术制备获得的IBV单克隆抗体N2D5属于IgG2b亚型,具有特异性高、反应谱广的特点,且与IBV的结合能力强,可作为特异性诊断抗体应用于IBV临床诊断及病毒分布规律研究。

一例雏鹅感染鸭疫里默氏杆菌的病例报告

鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）感染是鸭、鹅、火鸡以及其他家禽和野禽的一种常见接触传染性疾病,又称为鸭传染性浆膜炎,主要感染1～7周龄的雏鸭。该病主要呈急性或慢性败血症形式,其特征是“三炎”病变,即纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎,以及脑膜炎和干酪性输卵管炎等。

金圣叹其人

是苏州水土关系，还是文化底蕴丰厚的原因，这块土地上历来文人荟萃，仅状元就出了50多位，文学家、教育家、天文学家、历史学家比比皆是，众多文人中使我最钦佩的是评论家——金圣叹。

椭圆周长的初等公式

寻找椭圆周长的代数公式是一个世界级难题。笔者经过二十年的苦苦追寻,在历经无数次失败之后,在科学的迷宫终于见到了一点亮光,积分中值定理为代数公式的存在奠定了坚定的基石,并最终找到了这一公式,同时还引出了一个新的数学常数,这在数学史上也是一个重大突破。

紫薇花开细无声

2013年夏秋热期特刖长。连续38℃以上1个多月，热浪还在滚滚延续。

一双绣花拖鞋

秋高气爽．万里无云．我把衣帽等物拿出来吹晒．箱底露出了一双绣花拖鞋．鞋面上绣着一对鸳鸯在池中徜徉．岸边绽开的红梅．斜伸水面。这画面顿时勾起我年轻时的一段回忆。

2009-2017年广西地区鸡传染性支气管炎流行病学调查

2009-2017年从广西地区采集了556份发病鸡群气管、肺脏以及肾脏样本,利用RT-PCR和基因测序等方法分离鉴定出64份鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)阳性样品,从检出率、发病日龄、季节、地域、症状和病变、与H120疫苗株的同源性等方面进行详细统计分析。结果显示:(1)2009-2017年间IBV检出率为11.5%,IBV单一感染检出率为35.9%,IBV混合感染检出率为64.1%,其中IBV与细菌混合感染率高达39.1%;(2)2~4周龄发病鸡群IBV检出率最高;(3)IB的高发阶段是当年的10月份到次年的4月份,具有明显的季节性;(4)广西14个地区中IBV检出率较高的地区分别为南宁市、钦州市、玉林市,检出率分别为14.7%、13.0%和9.9%;(5)IB症状和病变分别以呼吸道症状和肾脏肿大为主;(6)大部分IBV毒株(89.1%,57/64,)S1基因序列与H120疫苗株的相似性很低。本试验通过对广西地区近10年IBV流行病学调查,为今后广西防控IB提供科学依据,对国内其他地区制定有效的IB防控措施也具有重要的参考价值。

一株鸭源传染性支气管炎病毒的分离鉴定及结构蛋白基因和血清型分析

【目的】对从广西某鸭场发生呼吸道感染的11天龄樱桃谷肉鸭分离到的病毒株进行鉴定,并探索此鸭源病毒分离株的遗传变异情况。【方法】通过血凝试验、鸡胚接种实验、3?端非编码区(3'UTR)基因扩增与序列测定对分离株进行鉴定,并对该分离株的结构基因S1、E、M和N分别进行序列测定以及相似性、系统进化树分析和血清型鉴定。【结果】血凝试验为阴性,接种鸡胚盲传5代后出现侏儒胚,3?UTR基因测序结果表明为传染性支气管炎病毒(IBV)序列。该分离株S蛋白的裂解位点为RRSRR,S1、E、M和N基因与IBV毒株H120、4/91、LTD3核苷酸相似性分别为:78.6%–99.7%、85.4%–100.0%、91.6%–93.2%、86.7%–91.7%。除N基因存在点突变外,S1、E和M基因均存在氨基酸的突变、插入和(或)缺失。系统进化树分析显示,其S1基因属于4/91型,E、M和N基因均为LDT3型。血清型分析表明,该分离株的血清型不同于疫苗株H120和4/91。【结论】此鸭源病毒分离株为IBV,且该分离株的基因型与血清型均发生了变异。本研究结果暗示禽类传染性支气管炎的防控面临着更严峻的挑战。

啃老VS老肯

“啃”与“肯”都是人为的，被人“啃”从某种意义上来说是善意之举。成人了，好手好脚还去“啃”别人，那就可耻了。“啃”与“肯”仅是半字之差，可是意义不同，概念各异。前者是晚辈对老人的依赖；后者则是老人的自愿。友人从南京回来告诉我：金陵出现不少“啃老族”，机关里有位老同志1万多元离休金加上老伴儿的收入总共2万，可是二老每月钱到手就全都分给众多“下岗”儿孙。星期天三世同堂闹极了，儿女们再拖着他们的儿女来看望两老，二老忙得就像陀螺一样团团转，吃饭时一桌不够，二老只好另进“包厢”，三代人集聚一堂，真应了苏州人的一句老话“儿子不养爹孙子咬阿爷”，这算鸿福吗？

“忘我”与“忘年”

读过几年私塾的我，记得庄子“逍遥游”里有“忘我”的论述。意思是：不要“我”字当头，好事我不沾。要谦虚，要“忘我”。圣人的论述使人频生悟性。 然而，庄子的哲学是：“清净无为，顺应自然，恬淡名利。”如今移植到老年人生活中来，则是一种超凡脱俗，净化心灵的养生之道。 “忘我”者无私无欲，不嫉不怨，不为琐事磨合，不为儿孙苦苦地在打工，更不为自已的是非得失而无谓地悔恨，摆脱横向竞争的失落感。 己身虽存，一切身外之物，流水落花舂去也，烟消云散。

范仲淹与豆瓣汤

范仲淹和欧阳修都是文学大家，他们都留下了许多脍炙人口的诗词。我们曾在人教版四年级语文上册中学过“清风明月本无价，近水遥山皆有情”。这是一副写在苏州沧浪亭上的名联，上联“清风明月本无价”就是欧阳修的诗句，而北师版三年级语文下册中的《江上渔者》则出自范仲淹之手。一起来看看他们的故事。

母亲的眼镜

眼睛是人体的窗户、探照灯、显微镜。眼睛一旦失明，就看不到春花秋月。我的眼睛多次检查都是一类的视力。近年来不知怎么搞的，明明路灯是圆的而看上去却是长形的，圆的月亮外面多了一个圈，我怀疑眼睛视力出了问题，就去医院诊治，医生检查后说：“你的眼睛没问题。”

太湖奇石

古时大地震时，太湖底下的石灰岩礁石大量暴裂在湖中，经过千百年的波浪冲击、日晒雨淋、水的腐蚀、形成稀奇百怪的状态，这是大自然的雕塑艺术。据《扬州画舫录》记载：“太湖石乃太湖中石骨，浪激波涤，年久孔穴自生”。