Wortmannin对胰腺癌细胞增殖和生存的影响

目的:观察Wortmannin对胰腺癌PANC-1、CFPAC-1细胞株增殖、凋亡的影响,探讨Wortmannin抗肿瘤的作用机制。方法:采用噻唑盐比色法(MTT)、平板克隆试验、流式细胞分析测定Wortmannin对PANC-1、CFPAC-1细胞增殖、凋亡的影响。结果:用不同浓度Wortmannin培养CFPAC-1细胞24、48、72h后,其最大增殖抑制率分别为:10.6%、30.3%、18.9%(P<0.05),且呈明显的计量依赖效应,而Wortmannin对PANC-1细胞无明显抑制作用。Wortmannin可明显抑制CFPAC-1细胞克隆的形成(P<0.01),对PANC-1细胞克隆形成也有一定的抑制作用(P<0.05)。但Wortmannin对两株细胞均无诱导凋亡的作用。结论:Wortmannin通过阻断PI3K/Akt信号通路抑制胰腺癌细胞株增殖,达到抗肿瘤的作用;不同的细胞系对Wortmannin的敏感性不同。

Plk1基因及其与胰腺癌的关系

Plk1是一种丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，1994年由Golsteyn等首先克隆发现，与果蝇的Polo和酵母的Cdc5具有较高同源性。Plkl是Polo激酶家族Plks（Polo—likekinase）的成员。该家族是一个保守的蛋白激酶家族，主要包括裂殖酵母的Plol，出芽酵母的Cdc5，果蝇的Polo，爪蟾蜍的Plx1和哺乳动物细胞的4种激酶Plk1、Plk2（Snk）、Plk3（Prk／Fnk）、Plk4（Sak）。目前研究发现，Plk1与胰腺癌的发生发展密切相关，正成为胰腺癌诊治研究的新热点。

器官移植教学中的伦理问题思考

随着器官移植教学的广泛开展,在教学中常会遇到一系列复杂的伦理道德问题。本文分析了教学中可能出现的伦理问题,提出应立足我国国情,以发展的眼光看待问题,在教学中以法律为准绳,以道德为支撑,正确引导,同时注意学员伦理决策能力的培养。

器官移植教学的困境与对策

由于我国的国情及器官移植的特殊性,器官移植教学在现阶段陷入了困境。如何在目前形势下提高器官移植教学的质量,是摆在医学教育工作者面前的严峻课题。

器官保存液中聚乙二醇对人红细胞聚集性和血液流变学的影响

背景:聚乙二醇作为一种非渗透性大分子物质,在器官保存液中可发挥保护细胞膜、维护细胞骨架完整性、防止细胞水肿、抗脂质过氧化和免疫调节的作用。目的:探讨器官保存液中的聚乙二醇对人红细胞聚集性和血液流变学的影响。设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-10在解放军第二军医大学附属长征医院器官移植科完成。材料:抽取接受体格检查的6名健康志愿者的肘前静脉血。方法:在抽取的新鲜血液中按5:1的稀释比分别加入生理盐水、器官保存液及含不同相对分子质量、不同浓度聚乙二醇的多器官保存液,按加入液体的不同分为:生理盐水组、器官保存液组、不添加聚乙二醇的保存液组、20聚乙二醇1,10,30g/L和35聚乙二醇1,10,30g/L组。主要观察指标:室温下通过魏氏法检测红细胞沉降率、自动血液流变仪检测血液流变学指标、光镜观察红细胞聚集的形态学改变,分析聚乙二醇对人红细胞聚集性和血液流变学的影响。结果:不含胶体的保存液对红细胞聚集无影响,含低浓度聚乙二醇的保存液对红细胞聚集性和血液流变学的影响较小,器官保存液组、20聚乙二醇30g/L,35聚乙二醇10g/L和35聚乙二醇30g/L的保存液则可显著加快红细胞沉降率,降低红细胞变形能力,引起红细胞明显聚集。结论:器官保存液中的聚乙二醇可引起红细胞聚集,降低红细胞变形能力,其相对分子质量越大,浓度越高,促进红细胞聚集的作用越明显,对血液流变学的影响越大。

复方果糖电解质注射液在肾移植后多尿期补液中的临床应用研究

目的 观察复方果糖电解质注射液在肾移植术后多尿期的补液效果。方法 回顾性分析2004年1月－2013年12月上海长征医院1279例肾移植后多尿期的补液治疗方案，均采用复方果糖电解质注射液补液，监测患者的血电解质、血糖、尿糖、二氧化碳结合力（CO2CP）及肾功能变化情况。结果 肾移植后多尿期尿量峰值出现在术后3～9h，其中最高尿量达到2500ml/h。血钠、钾、氯均在正常范围，血钙处于正常范围的下限，CO2CP在正常范围，血肌酐浓度随时间推移而明显下降。术前患者血糖均控制在正常范围内，术后血糖水平略有上升，但多处于正常范围上限或者稍高于正常值，且术后1周内未出现血糖的剧烈波动。尿糖受手术的影响更小，术后无升高趋势。结论 复方果糖电解质注射液可较好地维持肾移植后多尿期的水、电解质和酸碱平衡，并能有效解决传统循环补液治疗存在的液体种类多、操作繁琐和高血糖等问题。

肾移植后外周血CD4^+及CD8^+T细胞亚群计数的临床意义

背景:临床上常以流式细胞检测受者外周血CD4、CD8细胞比值来揭示与排斥或感染相关的关系。目的:探讨肾移植后排斥或感染时外周血CD4+及CD8+T细胞(简称CD4和CD8细胞)亚群计数的变化和意义。方法:应用流式细胞仪检测肾移植121例受者CD4、CD8细胞数进行检测。根据入院病情将患者分为移植后正常组、急性排斥组、肺部感染组进行观察。结果与结论:移植后正常患者和急性排斥患者相比,CD4、CD8细胞数差异均无显著性意义(P>0.05)。肾移植后肺部感染患者CD4、CD8细胞数则均显著低于移植后正常组(P<0.001)。当感染控制、症状改善时,CD4、CD8细胞数显著升高(P<0.001)。说明肾移植后CD4和CD8细胞计数可以作为免疫状态的参考,其对于感染的参考价值大于排斥,动态观察分析有助于指导治疗。

自制新型多器官保存液低温保存小型猪肾

背景:在前期实验的基础上,此次实验成功配制了含聚乙二醇的新型上海多器官保存液。目的:以普通器官保存液为对照,验证自制含聚乙二醇的上海多器官保存液低温保存小型猪肾的效果。设计、时间及地点:随机分组,对照实验观察,2006-05/2007-07在解放军器官移植研究所移植实验室完成。材料:健康成年实验用巴马小型猪12头。自制新型新型上海多器官保存液,主要含聚乙二醇,相对分子质量20000。pH7.43±0.10,渗透压825～900kPa,UW液,购自美国Bristol-Myers Squibb公司。方法:巴马小型猪肾分别以4℃器官保存液或上海多器官保存液原位灌注后离体保存24,48,72h。保存终点测保存液pH值及乳酸脱氢酶含量,左肾取标本行组织学检查,右肾采用体外非循环猪肝/肾灌注系统灌注30,60,120min测灌注液乳酸脱氢酶含量。灌注终点取肾皮质标本测丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性。主要观察指标:光镜、电镜观察肾冷保存后的形态学变化;灌注液及保存液乳酸脱氢酶含量;肾皮质标本测丙二醛浓度和超氧化物歧化酶活性;肾组织细胞凋亡指数。结果:保存48,72h后,器官保存液组保存液pH值高于上海多器官保存液组(P<0.05)。保存72h终点保存液及再灌注30,60,120min灌注液中乳酸脱氢酶活性器官保存液组高于上海多器官保存液组(P<0.05)。同时间点两组肾组织光镜、电镜下形态学改变、肾皮质凋亡指数、超氧化物歧化酶、丙二醛含量差异均无显著性。结论:新型上海多器官保存液对小型猪肾脏低温保存效果与普通器官保存液基本一致,对缺氧代谢器官细胞内酸中毒的缓冲能力以及对低温和缺血再灌注损伤的保护作用优于普通器官保存液。

被动免疫治疗在肾移植术后重症肺部感染患者救治中的应用

目的探讨被动免疫治疗在肾移植术后重症肺部感染患者救治中的有效性和安全性。方法对2007年8月至2009年10月间51例肾移植术后重症肺部感染患者(被动免疫组)采用以胸腺肽和丙种球蛋白为主的被动免疫治疗,选取2005年1月至2007年7月间52例肾移植术后重症肺部感染患者作为对照组。两组均采取停用基础免疫抑制剂同时给予广谱、降阶梯抗感染治疗,被动免疫组根据病情加用胸腺肽和丙种球蛋白,监测外周血CD4+淋巴细胞计数变化,并观察患者临床症状、体征及胸部CT变化。结果被动免疫组存活47例,4例死亡,存活率为92.2%(47/51),感染控制时间(12.8±2.7)d,存活患者住院时间为(27.3±7.0)d;对照组存活39例,13例死亡,存活率为75.0%(39/52),感染控制时间(17.7±4.2)d,存活患者住院时间为(36.3±9.1)d。被动免疫组存活率高于对照组,存活患者的感染控制时间和住院时间少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。被动免疫组所有患者均未出现急性排斥反应,对照组出现4例。被动免疫组和对照组存活患者CD4+细胞计数呈上升趋势,两组死亡患者CD4+细胞计数呈下降趋势。结论胸腺肽联合丙种球蛋白的被动免疫治疗,可以有效提高肾移植术后重症肺部感染患者的治愈率、减少病死率,期间监测CD4+细胞计数变化对于指导治疗和预后判断具有重要参考价值。

活体肾移植供、受者46例生活质量调查

背景：如何能让肾移植供、受者在术前尽量避免心理顾虑，同时在术后保持较高的生活质量，了解供、受者的生活质量及其影响因素非常必要。目的：调查分析活体肾移植术后供、受者的生活质量及心理状态。设计、时间及地点：问卷调查，于1999-09／2007-12在解放军第二军医大学长征医院器官移植中心完成。对象：选择在解放军第二军医大学长征医院器官移植中心行活体肾移植术后长期随访的供、受者46对，手术均获成功；供者身体健康均无明显肾功能异常，受者移植肾功能正常。手术时间为4个月～9年。方法：取得同意后采用由作者一对一提问和填写问卷，供、受者回答的形式。主要观察指标：采用健康调查简表评价46对活体肾移植供、受者的生活质量，并分别与国内常模、同期血液透析患者比较：采用汉密顿焦虑量表及抑郁自评量表评价供、受者的心理健康状态。结果：①受者肾移植术后健康调查简表评分除在社会功能领域与血液透析患者无明显差异外，其他领域均高于血液透析患者（P〈0．05）；6名受者术后存在轻度焦虑症状。②供者与国内常模在躯体功能、生理职能、躯体疼痛、总体健康及情感职能领域均无显著差异，但活力及心理健康领域评分明显高于常模（P〈0．05）：供者均无焦虑障碍。结论：术前进行必要的心理指导，术后定期随访，活体肾移植供、受者可获得较高的生活质量。

26例活体肾移植供者术后长期安全性观察

目的:评价活体肾移植供肾者术后长期安全性。方法:随访26例活体肾移植供者术后2～8(4.27±2.11)年血肌酐、血压、尿蛋白的变化.并评价供肾对供者心理学的影响。结果:供者术后血肌酐较术前明显升高(P<0.01),但仍在正常范围内。且一直稳定在一定水平;供者术后血压与术前相比无明显差异;1例供者在术后1个月复查发现微量蛋白尿.经休息后好转。其他供者尿常规检查均为阴性;无1例死亡。1例供者对当初供肾行为表示后悔,觉得供肾对自己带来了一定的心理压力。结论:对于健康供者而言,无偿捐献一侧肾脏是安全可行的,不会给供者带来明显的生命威胁及心理负担,但术前对供者进行安全性评估及术后长期随访是十分必要的。

Plk1与MUC4在胰腺癌中的表达与临床意义

目的:探讨胰腺癌中Plk1、MUC4表达的意义。方法:应用免疫组化EnVision两步法检测33例胰腺癌及其癌旁组织、3例胰腺浆液性囊腺瘤,3例黏液性囊腺瘤,5例慢性胰腺炎中Plk1、MUC4的表达。结果:胰腺癌中Plk1、MUC4的阳性表达率分别为72.7%(24/33)、51.5%(17/33),与胰腺癌患者的年龄、性别、临床分期、组织学分级、淋巴结的浸润、肿瘤的部位无显著相关(P>0.05)。癌旁组织、慢性胰腺炎和良性胰腺肿瘤组织中Plk1、MUC4表达均为阴性。结论:Plk1、MUC4在胰腺癌中表达具有一定肿瘤特异性,可能是胰腺癌治疗的两个理想靶目标。

夫妻间肾移植10例临床分析

为总结夫妻间肾移植经验,探讨近期效果,回顾性分析了2005-10/2008-06上海长征医院器官移植科10例夫妻间肾移植临床及随访资料,随访时间为6-38个月。所有供者均为妻子,年龄29-42岁,平均（34.4±4.0）岁,身体健康,均为开放手术取肾,7例取左肾,3例取右肾。受者均为首次肾移植,年龄30-45岁,平均年龄（35.8±4.6）岁,原发病均为慢性肾小球肾炎。供受者ABO血型相同,HLA配型5个抗原错配2例,完全错配8例。术后采用环孢素A或他克莫司、霉酚酸酯及强的松三联抗排斥治疗。所有供者移植后1周内出院,出院时血肌酐平均（78.9±15.2）μmol/L,随访期间肾功能均正常。受者移植后2例发生急性排斥反应,经激素冲击抗排斥治疗后逆转,无移植肾功能延迟恢复及其他并发症。出院时血肌酐（98.1±30.1）μmol/L,随访期间肾功能稳定。总之,夫妻间肾移植具有较好的近期效果,在缺少尸体或亲属供肾的情况下,夫妻间肾移植可以作为尿毒症患者早期肾移植治疗的选择。

CYP3A5基因多态性与肾移植受者术后早期他克莫司个体化应用的研究

目的观察CYP3A5基因多态性对肾移植受者术后早期他克莫司（tacrolimus，Tac）浓度/剂量比值（blood drug concentration/dose，C/D）的影响，探讨适合不同基因型受者的Tac起始剂量。方法按CYP3A5基因型将157例肾移植受者分为表达组（CYP3A5*1/*1型和CYP3A5*1/*3型患者，72例）、不表达组（CYP3A5*3/*3型患者，85例）。比较不同基因型患者之间术后Tac C/D比值、急性排斥反应与药物不良反应的发生率；记录不同基因型患者起始Tac剂量及达到肾移植术后早期有效目标药物浓度（7～14μg/L）的间隔时间。结果 CYP3A5表达组患者术后7、14、30天的C/D比值均低于不表达组（均P＜0.05），术后1个月组间急性排斥反应发生率差异无统计学意义（P＞0.05），而不表达组药物不良反应发生率高于表达组（P＜0.05）；表达组及不表达组患者术后起始剂量无明显差异（分别为0.129、0.132 mg/kg，P＞0.05）。但表达组患者达到目标浓度时间较不表达患者明显缩短（P＜0.05）。结论受CYP3A5基因多态性影响，*1/*1和*1/*3型患者早期要达到目标血药浓度，需提高该组患者的起始用药剂量，而*3/*3型患者则应适当降低起始剂量。根据CYP3A5基因多态性作为Tac个体化用药的依据，可以减少早期急性排斥反应及不良反应发生率，提高肾移植的临床效果。

Plk1在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 研究胰腺癌组织标本及细胞系中Plk1的表达及临床意义。方法 应用免疫组化EnVision两步法检测33例胰腺癌及其癌旁组织、3例胰腺浆液性囊腺瘤、3例黏液性囊腺瘤、5例慢性胰腺炎的石蜡标本中Plk1的表达。用半定量RT—PCR检测5例新鲜胰腺癌组织及其癌旁组织中Plk1 mRNA的表达。用Westernblot检测两株胰腺癌细胞PANC1和CFPAC1中Plk1表达。结果 胰腺癌组织中Plk1的阳性表达率为72、7％（24／33），其表达与胰腺癌患者的年龄、性别、临床分期、组织学分级、淋巴结转移、肿瘤的部位无显著相关（P〉0.05）。癌旁组织、慢性胰腺炎和良性胰腺肿瘤组织中Plk1的表达均为阴性。5例新鲜胰腺癌组织中都有Plk1mRNA的高表达，两株胰腺癌细胞中也有Plk1蛋白的表达。结论 Plk1在胰腺癌中的表达具有一定肿瘤特异性，有可能成为胰腺癌诊治的理想靶标。

婴幼儿供肾儿童肾移植50例临床应用分析

目的探讨目前儿童肾移植中婴幼儿供肾的临床应用情况。方法回顾性分析了50例婴幼儿供肾儿童肾移植的临床资料和随访情况。结果根据移植术式的不同分为单肾移植组（37例）和双肾整块移植组（13例）。单肾移植组的术后并发症包括血管栓塞1例（占2.7%）,输尿管梗阻1例（占2.7%）,肾功能延迟恢复17例（占45.9%）和急性排斥反应（AR）4例（占10.8%）。双肾整块移植组患者的术后并发症包括血管栓塞4例（占30.8%）,尿瘘2例（占15.4%）,肾功能延迟恢复2例（占15.4%）,AR2例（占15.4%）。单肾移植组术后随访3~31个月,人、肾的存活率分别为100%和94.6%,末次随访时血肌酐为（67.9±23.1）μmol/L;双肾整块移植组术后随访4~44个月,人、肾存活率分别为100%和76.9%,末次随访时血肌酐为（56.2±18.7）μmol/L。结论婴幼儿供肾在儿童肾移植中的应用可有效缓解我国移植器官短缺的问题,值得进一步深入研究。

肢体保存技术的研究现状及进展

肢体再植和移植是挽救创伤性肢体离断的首选治疗方法,而安全有效的肢体保存是肢体再植和移植成功的关键。静态低温保存技术是目前肢体保存的金标准,但保存时间较短,已无法满足临床的需要。随着近年来器官保存领域的快速发展,一些新的保存技术如深低温冷冻保存、过冷保存和机械灌注保存等相继出现,但目前这些技术多应用于实体器官的保存,而在包括肢体在内的带血管的复合组织移植移植物保存方面的研究较少。本文就静态低温保存及机械灌注保存在肢体保存中的研究现状及进展进行综述,以期为肢体保存技术的临床应用提供参考,促进肢体再植和移植的发展。

实体器官移植中供者来源感染的研究进展

随着外科手术技术、免疫抑制药物和抗菌药物的发展,器官移植越来越成熟、安全,已经成为器官衰竭患者的首选治疗方案。尽管国内移植数量再创新高,但是供者来源数量仍然远远不能满足尿毒症患者的移植需求,随着器官来源日益短缺,越来越多的边缘供者器官被采用,一定程度上缓和了供受者之间的需求矛盾,同时供者来源的感染（donor derived infection,DDI）的发病率也在逐渐增多。

儿童肾移植受者的免疫抑制管理

近年来,随着器官分配政策、外科手术技术及围手术期管理等方面的不断进步,儿童肾移植疗效逐渐提高,但免疫抑制管理对于儿童肾移植的长期预后仍十分重要。由于儿童在生理、心理、免疫系统和药物代谢等方面的特点不同于成人,其免疫抑制管理亦有特殊之处。因此,在实际临床工作中,需根据儿童肾移植受者的特点,有针对性地选择合适的免疫抑制剂并制定个体化的免疫抑制方案。本文从儿童肾移植受者免疫抑制治疗的特点、免疫抑制剂的选择、糖皮质激素减撤、免疫监测以及用药依从性管理等方面进行探讨,以期为优化儿童肾移植的免疫抑制管理,改善儿童肾移植受者的预后提供参考。