奥芬达唑干混悬剂对黄牛线虫的驱除试验

应用奥芬达唑干混悬剂分别按5、101、5mg/kg.bw剂量口服给药,驱除黄牛自然感染线虫,投药后14d粪检结果:15mg/kg剂量试验组虫卵(幼虫)转阴率、减少率均为100%;10mg/kg剂量对消化道线虫虫卵转阴率90%,减少率99.9%,原圆科线虫幼虫转阴率90%,减少率94.6%;5mg/kg剂量对消化道线虫虫卵转阴率80%,减少率99.2%,对原圆科线虫幼虫转阴率70%,减少率91.1%;而对照组同期检查虫卵(幼虫)给药前后无明显变化。第21d剖检结果:15mg/kg1、0mg/kg、5mg/kg剂量总计驱虫率分别达99.2%、97.4%和95.7%。均达到了高效。

鸭坦布苏病毒E蛋白主要抗原区域的原核表达与鉴定

根据GenBank中发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)基因序列,设计合成一对特异性引物,RT-PCR扩增966bp E基因片段并克隆至pMD18-T载体中,经鉴定正确后,将其定向克隆至pET30a表达载体中,经鉴定正确后,重组阳性质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。采用镍离子亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,Western blot检测证明该重组蛋白可与抗血清发生反应。

牛病毒性腹泻病毒重组E2蛋白PPA-ELISA方法的建立及临床应用

用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白为包被抗原,辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白(PPA)为二抗,建立了检测BVDV血清抗体的E2-PPA-ELISA方法。研究选取特异性良好的E2抗原,确定了最佳工作条件为:E2蛋白抗原的最适包被质量浓度为16.0μg/mL,酶标二抗的工作浓度为1∶2 000,血清稀释度为1∶40时效果最佳。通过重复性试验、特异性试验和敏感性试验证明,与用BVDV全病毒为抗原的IDEXX ELISA试剂盒相比,建立的E2-PPA-ELISA抗体检测方法具有较好的重复性、敏感性和特异性。对285份不同地区采集的血清样本进行检测,阳性检出率为33.4%,与IDEXX ELISA试剂盒的检出率无明显差异。表明该方法为BVDV的快速诊断和流行病学调查提供一种快速、简便的血清学诊断方法,适合规模化养牛场BVDV的抗体监测以及流行病学调查。

应用RT-PCR方法检测鸭病毒性肝炎新型和I型病毒

鸭病毒性肝炎病毒是危害养鸭业的重要病毒性传染病,主要感染低日龄雏鸭,临床上分离到的病原主要为鸭病毒性肝炎I型病毒和鸭病毒性肝炎新型病毒,为了加快本病的检测速度,尽快确诊病原,根据GeneBank上两种毒株的基因组序列,选择两种毒株的差异基因序列分别设计了一对特异性的检测引物,将两对引物放在一个PCR反应体系中,两种毒株分别进行特异性扩增,根据扩增片段的大小进行鉴别,建立了可以同时检测鸭病毒性肝炎病毒I型和新型毒株的复合RT-PCR方法,该检测方法快速,特异性强,灵敏性高,可以用于鸭病毒性肝炎病毒的分型鉴别检测。