靶向G蛋白偶联受体的肽类药物

G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)是哺乳动物体内最大的细胞膜表面受体家族,具有7次跨膜螺旋结构。人类基因组编码约800种不同类型的GPCRs,广泛参与了代谢性疾病及肿瘤等多种重大疾病的病理过程,使之成为药物研发的热门靶点。肽是介于氨基酸和蛋白质之间的一类物质,由两个至几十个氨基酸通过肽键连接而成,是涉及生物体内多种细胞功能的生物活性物质。迄今为止,研究者已鉴定出7000余种天然肽,分别作为激素、神经递质、生长因子、离子通道配体和抗生素等发挥功能。肽类药物因具有作用机制明确、安全性好、生产成本低等多重独特优势及其在空间结构上近乎无限的可能性而逐渐受到重视。近年来,基于对GPCR结构的理解不断深入,靶向GPCR的肽类药物发展迅猛,新药不断上市。目前为止,美国食品和药物管理局(FDA)已批准上市近50种靶向GPCR的肽类药物,用于治疗代谢性疾病、神经系统疾病和癌症等多种疾病。肽类药物的研发经历了人体肽开发、天然肽开发和生物技术开发3个阶段。目前,已上市的靶向GPCR肽类药物大多是对人体天然内源性多肽类配体的改造与修饰。本文归纳了近年来研发成功已上市的靶向GPCR肽类药物,并简要总结了目前肽类药物的研发策略及未来潜在的发展方向,旨在为更多靶向GPCR肽类药物的研发提供参考。

直面现实 审慎合作——从国际政治长周期规律看新世纪中国外交的角色选择

一个国家，特别是一个大国在国际体系中扮演何种角色，首先取决于它对时代发展的判断以及它所制定的外交政策，同时也取决于国际体系中其它大国所扮演的角色。主观与客观的矛盾本身就决定厂角色选择的艰巨与复杂，然而我们却始终无法回避这一问题。中国作为一个历史上和文化上的大国。如果希望塔怏发展成为一个现实的大国，就必须抓住柏限的资源和机遄，对内搞好经济建社，对外选择恰当的角色，力争经过较长时间的努力，创造出相对宽松有利的国际环境。

在哺乳动物细胞内基于线性双链DNA"与门"基因线路构建纳米抗体文库

目的在哺乳动物细胞内基于线性双链DNA"与门"基因线路构建纳米抗体文库。方法应用基于线性双链DNA的"与门"逻辑基因线路构建纳米抗体文库,首先通过PCR扩增将互补决定区(CDR)随机序列引入上、下游线性双链DNA,将其共转染至HEK293T细胞,转染48 h后,经RNA提取、cDNA合成、PCR扩增、高通量测序和数据处理步骤,鉴定"与门"形成的纳米抗体文库序列,对本策略进行了分析与评价。结果深度测序共测得4 173 356条序列,其中约88.18%的序列为纳米抗体文库序列。文库核酸序列最丰富的序列长度为264 bp,为理论设计长度。后续在264 bp序列中鉴定出22 172种纳米抗体序列,且CDR1~3序列中的核苷酸频率符合NNK模式。结论本研究开发了一种基于线性双链DNA"与门"逻辑基因线路在哺乳动物细胞中构建纳米抗体文库的新方法。

纳米抗体在G蛋白偶联受体研究中的应用

G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)含7次跨膜螺旋,是人体最大的膜蛋白受体家族,在多种疾病的进程中起关键作用,也是非常重要的药物靶点。目前上市药物中有30%~40%为靶向GPCRs药物。纳米抗体(nanobody)又称为单域抗体(single-domain antibody,sdAb),因其分子质量小、生化性能良好、与“裂缝或空腔”亲和力高等特性,成为研究GPCRs的重要工具。且纳米抗体具有较长的互补决定区3(complementarity determining region 3,CDR3)环,可使其深深地插入受体的配体结合口袋中,与GPCRs高效结合。本文归纳了纳米抗体的特性及其在GPCRs研究中的相关应用,并简要介绍了目前靶向GPCRs纳米抗体的产生途径,为纳米抗体在GPCRs研究应用方面提供新的思路和方法。