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甘露醇磷酸化酶基因的敲除对D-甘露醇合成的影响 被引量:3
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作者 赵雅童 何光明 +3 位作者 瓮茹茹 石爱琴 路福平 李玉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期118-124,共7页
为了探究甘露醇分解利用途径对甘露醇合成的影响,在重组菌株R1(K-12/pTrc99a-mdh)的基础上,通过CRISPR/Cas9 敲除E.coli PTS 系统中的cmtA、cmtB、mtlA 基因,阻断了E. coli K-12 中甘露醇的分解途径,获得了重组菌株R3(K-12/ΔcmtAΔcmtB... 为了探究甘露醇分解利用途径对甘露醇合成的影响,在重组菌株R1(K-12/pTrc99a-mdh)的基础上,通过CRISPR/Cas9 敲除E.coli PTS 系统中的cmtA、cmtB、mtlA 基因,阻断了E. coli K-12 中甘露醇的分解途径,获得了重组菌株R3(K-12/ΔcmtAΔcmtBmdh^+)和R5(K-12/ΔcmtAΔcmtBΔmtlAmdh^+)。与出发菌株R1 相比,R3 的生长速率没有降低,而R5 的生长速率明显下降。并且R5 在以甘露醇为唯一碳源的培养基上已无法生长,说明cmtA、cmtB、mtlA 三个基因全部敲除后,菌株已无法再利用甘露醇作为碳源进行生长。最后,构建的重组菌株R5,测得MDH 酶活力为258 U/mL,用高效液相色谱对胞外产物进行检测,可检测到少量的甘露醇,为进一步探究大肠杆菌合成甘露醇的调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 基因敲除 甘露醇 甘露醇脱氢酶 NADH
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NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的重组表达及甘露醇的转化条件 被引量:3
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作者 封志媚 赵雅童 +2 位作者 刘业学 路福平 李玉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期186-191,共6页
对NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的异源表达和对果糖的转化情况进行分析,为在细胞内构建甘露醇的合成途径奠定基础。构建重组菌株BL21(DE3)/p ET28a-mdh,对其进行诱导发酵后,通过His标签对目的蛋白进行纯化,并利用HPLC分析纯化后的甘露醇脱... 对NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的异源表达和对果糖的转化情况进行分析,为在细胞内构建甘露醇的合成途径奠定基础。构建重组菌株BL21(DE3)/p ET28a-mdh,对其进行诱导发酵后,通过His标签对目的蛋白进行纯化,并利用HPLC分析纯化后的甘露醇脱氢酶转化果糖生成甘露醇的情况。成功构建了NADPH依赖的甘露醇脱氢酶重组表达菌株BL21(DE3)/p ET28amdh,并对表达后的甘露醇脱氢酶进行了纯化,测得纯化后的甘露醇脱氢酶酶活力为270 U/m L。对酶法转化果糖得到甘露醇的转化条件进行优化,确定最佳的转化条件为:当底物浓度为300 g/L,反应初始p H5.8,温度40℃,NADPH终浓度为9 mmol/L时,甘露醇转化率可以达到97.4%。实现了NADPH依赖的甘露醇脱氢酶在大肠杆菌中的活性表达,为进一步研究大肠杆菌合成甘露醇的代谢调控提供了依据。 展开更多
关键词 甘露醇脱氢酶 NADPH 甘露醇 大肠杆菌 纯化
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冬雪
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作者 赵雅童 赵改芳(指导) 《小学生必读(中年级版)》 2022年第12期32-32,共1页
清晨,当我从睡梦中醒来,就闻到了一股清新的味道,啊!下雪了!妈妈告诉我,这是入冬以来的第一场雪。我站在窗前,一片白色的世界映入我的眼帘,地面上、屋顶上,像堆起了白色的浪花,又像是天空中的朵朵白云。到学校后,校园里热闹非凡,同学们... 清晨,当我从睡梦中醒来,就闻到了一股清新的味道,啊!下雪了!妈妈告诉我,这是入冬以来的第一场雪。我站在窗前,一片白色的世界映入我的眼帘,地面上、屋顶上,像堆起了白色的浪花,又像是天空中的朵朵白云。到学校后,校园里热闹非凡,同学们在晶莹洁白的冰天雪地里玩得热火朝天,女生们都在堆雪人,男生们则在打雪仗。虽然天气寒冷,但气氛却很热闹。坐在教室里望着窗外飘扬的雪花,雪花在空中翩翩起舞,一会儿像一片片洁白美丽的鹅毛,一会儿像一只只银色的蝴蝶,一会儿又像仙女洒下来的一片片洁白的鲜花。 展开更多
关键词 堆雪人 雪花 冰天雪地
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