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甘露醇磷酸化酶基因的敲除对D-甘露醇合成的影响
被引量:
3
1
作者
赵雅童
何光明
+3 位作者
瓮茹茹
石爱琴
路福平
李玉
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期118-124,共7页
为了探究甘露醇分解利用途径对甘露醇合成的影响,在重组菌株R1(K-12/pTrc99a-mdh)的基础上,通过CRISPR/Cas9 敲除E.coli PTS 系统中的cmtA、cmtB、mtlA 基因,阻断了E. coli K-12 中甘露醇的分解途径,获得了重组菌株R3(K-12/ΔcmtAΔcmtB...
为了探究甘露醇分解利用途径对甘露醇合成的影响,在重组菌株R1(K-12/pTrc99a-mdh)的基础上,通过CRISPR/Cas9 敲除E.coli PTS 系统中的cmtA、cmtB、mtlA 基因,阻断了E. coli K-12 中甘露醇的分解途径,获得了重组菌株R3(K-12/ΔcmtAΔcmtBmdh^+)和R5(K-12/ΔcmtAΔcmtBΔmtlAmdh^+)。与出发菌株R1 相比,R3 的生长速率没有降低,而R5 的生长速率明显下降。并且R5 在以甘露醇为唯一碳源的培养基上已无法生长,说明cmtA、cmtB、mtlA 三个基因全部敲除后,菌株已无法再利用甘露醇作为碳源进行生长。最后,构建的重组菌株R5,测得MDH 酶活力为258 U/mL,用高效液相色谱对胞外产物进行检测,可检测到少量的甘露醇,为进一步探究大肠杆菌合成甘露醇的调控机制奠定基础。
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关键词
基因敲除
甘露醇
甘露醇脱氢酶
NADH
下载PDF
职称材料
NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的重组表达及甘露醇的转化条件
被引量:
3
2
作者
封志媚
赵雅童
+2 位作者
刘业学
路福平
李玉
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第8期186-191,共6页
对NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的异源表达和对果糖的转化情况进行分析,为在细胞内构建甘露醇的合成途径奠定基础。构建重组菌株BL21(DE3)/p ET28a-mdh,对其进行诱导发酵后,通过His标签对目的蛋白进行纯化,并利用HPLC分析纯化后的甘露醇脱...
对NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的异源表达和对果糖的转化情况进行分析,为在细胞内构建甘露醇的合成途径奠定基础。构建重组菌株BL21(DE3)/p ET28a-mdh,对其进行诱导发酵后,通过His标签对目的蛋白进行纯化,并利用HPLC分析纯化后的甘露醇脱氢酶转化果糖生成甘露醇的情况。成功构建了NADPH依赖的甘露醇脱氢酶重组表达菌株BL21(DE3)/p ET28amdh,并对表达后的甘露醇脱氢酶进行了纯化,测得纯化后的甘露醇脱氢酶酶活力为270 U/m L。对酶法转化果糖得到甘露醇的转化条件进行优化,确定最佳的转化条件为:当底物浓度为300 g/L,反应初始p H5.8,温度40℃,NADPH终浓度为9 mmol/L时,甘露醇转化率可以达到97.4%。实现了NADPH依赖的甘露醇脱氢酶在大肠杆菌中的活性表达,为进一步研究大肠杆菌合成甘露醇的代谢调控提供了依据。
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关键词
甘露醇脱氢酶
NADPH
甘露醇
大肠杆菌
纯化
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职称材料
冬雪
3
作者
赵雅童
赵改芳(指导)
《小学生必读(中年级版)》
2022年第12期32-32,共1页
清晨,当我从睡梦中醒来,就闻到了一股清新的味道,啊!下雪了!妈妈告诉我,这是入冬以来的第一场雪。我站在窗前,一片白色的世界映入我的眼帘,地面上、屋顶上,像堆起了白色的浪花,又像是天空中的朵朵白云。到学校后,校园里热闹非凡,同学们...
清晨,当我从睡梦中醒来,就闻到了一股清新的味道,啊!下雪了!妈妈告诉我,这是入冬以来的第一场雪。我站在窗前,一片白色的世界映入我的眼帘,地面上、屋顶上,像堆起了白色的浪花,又像是天空中的朵朵白云。到学校后,校园里热闹非凡,同学们在晶莹洁白的冰天雪地里玩得热火朝天,女生们都在堆雪人,男生们则在打雪仗。虽然天气寒冷,但气氛却很热闹。坐在教室里望着窗外飘扬的雪花,雪花在空中翩翩起舞,一会儿像一片片洁白美丽的鹅毛,一会儿像一只只银色的蝴蝶,一会儿又像仙女洒下来的一片片洁白的鲜花。
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关键词
堆雪人
雪花
冰天雪地
原文传递
题名
甘露醇磷酸化酶基因的敲除对D-甘露醇合成的影响
被引量:
3
1
作者
赵雅童
何光明
瓮茹茹
石爱琴
路福平
李玉
机构
省部共建食品营养与安全国家重点实验室工业微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期118-124,共7页
基金
国家重点研发计划(2016YFD0400803)
文摘
为了探究甘露醇分解利用途径对甘露醇合成的影响,在重组菌株R1(K-12/pTrc99a-mdh)的基础上,通过CRISPR/Cas9 敲除E.coli PTS 系统中的cmtA、cmtB、mtlA 基因,阻断了E. coli K-12 中甘露醇的分解途径,获得了重组菌株R3(K-12/ΔcmtAΔcmtBmdh^+)和R5(K-12/ΔcmtAΔcmtBΔmtlAmdh^+)。与出发菌株R1 相比,R3 的生长速率没有降低,而R5 的生长速率明显下降。并且R5 在以甘露醇为唯一碳源的培养基上已无法生长,说明cmtA、cmtB、mtlA 三个基因全部敲除后,菌株已无法再利用甘露醇作为碳源进行生长。最后,构建的重组菌株R5,测得MDH 酶活力为258 U/mL,用高效液相色谱对胞外产物进行检测,可检测到少量的甘露醇,为进一步探究大肠杆菌合成甘露醇的调控机制奠定基础。
关键词
基因敲除
甘露醇
甘露醇脱氢酶
NADH
Keywords
gene knockout
mannitol
mannitol dehydrogenase
NADH
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的重组表达及甘露醇的转化条件
被引量:
3
2
作者
封志媚
赵雅童
刘业学
路福平
李玉
机构
天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第8期186-191,共6页
基金
国家重点研发计划专项项目(2016YFD0400803)
文摘
对NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的异源表达和对果糖的转化情况进行分析,为在细胞内构建甘露醇的合成途径奠定基础。构建重组菌株BL21(DE3)/p ET28a-mdh,对其进行诱导发酵后,通过His标签对目的蛋白进行纯化,并利用HPLC分析纯化后的甘露醇脱氢酶转化果糖生成甘露醇的情况。成功构建了NADPH依赖的甘露醇脱氢酶重组表达菌株BL21(DE3)/p ET28amdh,并对表达后的甘露醇脱氢酶进行了纯化,测得纯化后的甘露醇脱氢酶酶活力为270 U/m L。对酶法转化果糖得到甘露醇的转化条件进行优化,确定最佳的转化条件为:当底物浓度为300 g/L,反应初始p H5.8,温度40℃,NADPH终浓度为9 mmol/L时,甘露醇转化率可以达到97.4%。实现了NADPH依赖的甘露醇脱氢酶在大肠杆菌中的活性表达,为进一步研究大肠杆菌合成甘露醇的代谢调控提供了依据。
关键词
甘露醇脱氢酶
NADPH
甘露醇
大肠杆菌
纯化
Keywords
mannitol dehydrogenase
NADPH
mannitol
Escherichia coli
purification
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
TQ223.166 [化学工程—有机化工]
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职称材料
题名
冬雪
3
作者
赵雅童
赵改芳(指导)
机构
河北省元氏县槐阳学区槐阳中心小学
不详
出处
《小学生必读(中年级版)》
2022年第12期32-32,共1页
文摘
清晨,当我从睡梦中醒来,就闻到了一股清新的味道,啊!下雪了!妈妈告诉我,这是入冬以来的第一场雪。我站在窗前,一片白色的世界映入我的眼帘,地面上、屋顶上,像堆起了白色的浪花,又像是天空中的朵朵白云。到学校后,校园里热闹非凡,同学们在晶莹洁白的冰天雪地里玩得热火朝天,女生们都在堆雪人,男生们则在打雪仗。虽然天气寒冷,但气氛却很热闹。坐在教室里望着窗外飘扬的雪花,雪花在空中翩翩起舞,一会儿像一片片洁白美丽的鹅毛,一会儿像一只只银色的蝴蝶,一会儿又像仙女洒下来的一片片洁白的鲜花。
关键词
堆雪人
雪花
冰天雪地
分类号
G624.203 [文化科学—教育学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘露醇磷酸化酶基因的敲除对D-甘露醇合成的影响
赵雅童
何光明
瓮茹茹
石爱琴
路福平
李玉
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
3
下载PDF
职称材料
2
NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的重组表达及甘露醇的转化条件
封志媚
赵雅童
刘业学
路福平
李玉
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
下载PDF
职称材料
3
冬雪
赵雅童
赵改芳(指导)
《小学生必读(中年级版)》
2022
0
原文传递
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