三氧化二砷增强TRAIL杀伤人A549细胞的作用及机制研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)增强重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人非小细胞肺癌细胞(A549)的作用及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测As2O3及联合TRAIL对人A549的IC50值;不同浓度As2O3与TRAIL联合作用48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR检测Survivin、Caspase-3 mRNA表达变化。结果 As2O3有抗肿瘤活性,IC50值为(42.44±0.66)μmol.L-1;As2O3与TRAIL联用时IC50值为(7.04±0.19)μmol.L-1;As2O3协同增强TRAIL的抗肿瘤活性,CDI值为0.94。联合药物组作用48h后,随As2O3浓度增高Survivin mRNA的表达降低,Caspase-3mRNA的表达增强。结论 As2O3是有效的化疗药物,通过下调Survivin mRNA的表达,上调Caspase-3 mRNA的表达,逆转A549的耐药性,协同TRAIL增强对肺癌细胞的杀伤作用。

三氧化二砷增强TRAIL对肺癌移植瘤抑制作用的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对裸鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用及可能机制。方法:将裸鼠肺癌移植瘤模型随机分为生理盐水组、TRAIL组、ATO组及TRAIL+ATO组,称瘤重并计算抑瘤率,用RTPCR检测NF-κB、Caspase-3、Survivin基因表达变化。结果:与生理盐水组比较,ATO组对裸鼠肺癌移植瘤具有抑制作用,联合用药具有协同增效作用,抑制NF-κB表达,下调Survivin mRNA,上调Caspase-3的表达。结论:ATO可能通过NF-κB通路,下调Survivin,上调Caspase-3增强TRAIL对裸鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用。

ATO联合TRAIL对肺癌裸鼠移植瘤抑制作用及机制研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合三氧化二砷(ATO)对裸鼠肺癌移植瘤的抑制作用及其可能机制。方法将裸鼠肺癌移植瘤模型随机分为阴性对照组、TRAIL组、ATO低剂量组(ATO1组)、ATO高剂量组(ATO2组)、TRAIL联合ATO组,称取瘤质量并计算抑瘤率,采用免疫组化法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达。结果与阴性对照组比较,ATO1组、ATO2组对裸鼠肺癌移植瘤均具有抑制作用,TRAIL联合ATO组具有协同增效作用,并且上调Caspase-3的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ATO能增强TRAIL对裸鼠肺癌移植瘤的抑制作用,其机制可能与促进Caspase-3表达有关。

As_2O_3对TRAIL抑制人肺癌A549细胞增殖及调节DR4 mRNA、DR5 mRNA表达作用的影响

目的观察三氧化二砷(As2O3)对人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抑制人肺癌A549细胞增殖作用的影响及机制。方法体外培养A549细胞至对数生长期后随机分为As2O3组、TRAIL组、联合组及对照组,As2O3组分别加入1、10μmol/L As2O3,TRAIL组加入100μg/L TRAIL,联合组分别加入1μmol/L As2O3+100μg/L TRAIL、10μmol/L As2O3+100μg/L TRAIL,对照组加入DMEM培养液。四组均继续培养24、48、72 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长情况,计算细胞增殖抑制率(IR);用RT-PCR法检测死亡受体4(DR4)mRNA、死亡受体5(DR5)mRNA表达变化。结果联合组IR显著高于As2O3组及TRAIL组,尤以作用48 h和72h为著(P均<0.05);联合组DR4 mRNA和DR5 mRNA表达均明显强于As2O3组及TRAIL组(P均<0.05)。结论 As2O3可增强TRAIL对A549细胞增殖的抑制作用,机制可能为上调DR4 mRNA和DR5 mRNA表达;此为肺癌的临床靶向治疗提供了依据。

三氧化二砷逆转A549细胞对TRAIL耐药的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)逆转人非小细胞肺癌A549细胞对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)耐药的机制。方法将处于对数生长期的A549细胞分为对照组(仅加入DMEM)及实验组,实验组又分为As2O3组(1μmol/LAs2O3处理)、TRAIL组(100μg/L TRAIL处理)及联合组(1μmol/L As2O3、100μg/L TRAIL联合处理)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测A549细胞核因子kappa B(NF-κB)、caspase-3、survivin mRNA的表达。结果作用24、48、72h后,联合组A549细胞的增殖抑制明显增强(P<0.05),且呈时间依赖性。As2O3、TRAIL联合作用48h可明显下调NF-κB、survivin mRNA,上调caspase-3mRNA的表达。结论 As2O3通过NF-κB通路下调survivin,上调caspase-3,从而增强TRAIL诱导A549细胞的凋亡。

三氧化二砷联合TRAIL抑制肺癌A549细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抑制肺癌A549细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法采用不同浓度的As2O3与TRAIL联合作用于体外培养的肺癌A549细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和Hoechest染色观察检测其对A549细胞的抑制作用。以流式细胞术检测其对A549细胞的凋亡诱导作用和细胞周期。结果不同浓度的As2O3与TRAIL联用对A549细胞增殖的抑制作用均比单药组强。联合用药组从形态学观察及流式细胞术结果显示联合用药组可检测到大量凋亡A549细胞,明显多于单药组;并将A549细胞阻滞在G2/M期。结论 As2O3与TRAIL联用于人肺癌A549细胞可协同抑制其增殖,机制可能是将细胞阻滞在G2/M期;并可诱导细胞凋亡。

MAGE-As蛋白及mRNA在肺癌患者的表达水平变化及其临床意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原(MAGE)-As蛋白及mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法:选取2015年1月至2020年1月在我院治疗的非小细胞肺癌患者88例,同时选取癌旁组织作为对照,采用Western blot检测肺癌和癌旁组织MAGE-As蛋白表达,RT-PCR检测肺癌和癌旁组织MAGE-As mRNA表达。结果:非小细胞肺癌组织MAGE-As蛋白及mRNA相对表达量分别为(0.343±0.101)和(0.728±0.112),明显高于癌旁组织(P<0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期肺癌组织MAGE-As蛋白相对表达量为(0.385±0.102),明显高于Ⅰ~Ⅱ期肺癌组织(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤直径、病理类型、分化程度肺癌组织MAGE-As蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期、中低分化程度肺癌组织MAGE-As mRNA相对表达量为(0.762±0.112)和(0.742±0.107),明显高于Ⅰ~Ⅱ期和高分化肺癌组织(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤直径、病理类型肺癌组织MAGE-As mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);肺癌组织MAGE-As mRNA高表达和低表达患者中位总生存期为33个月和44个月,MAGE-As mRNA高表达和低表达患者生存率有所差异(P<0.05)。MAGE-As蛋白高表达和低表达患者中位总生存期差异比较无统计学意义(P>0.05)。结论:MAGE-As蛋白及mRNA在非小细胞肺癌中表达上调,与病情严重程度有关,同时MAGE-As mRNA高表达患者预后较差。

淫羊藿素对人肺腺癌细胞诱导破骨细胞前体细胞向破骨细胞分化的影响及机制

目的探讨淫羊藿素对人肺腺癌细胞(A549细胞)诱导破骨细胞前体细胞(RAW264.7细胞)向破骨细胞(OC)分化的影响及机制。方法常规培养RAW264.7细胞、A549细胞,加入不同浓度淫羊藿素干预后,用MTT法筛选淫羊藿素5、10μmol/L两个浓度进行实验。RAW264.7细胞、A549细胞共培养7 d,将RAW264.7细胞随机分为对照组、淫羊藿素低剂量组、淫羊藿素高剂量组,分别加入0.01%DMSO、5μmol/L淫羊藿素、10μmol/L淫羊藿素干预48 h,以不加A549细胞的RAW264.7细胞作为阳性对照组。用抗酒石酸磷酸酶法观察各组OC的数量,流式细胞术测算OC凋亡率,实时荧光定量PCR法检测OC中AMPK、mTOR、CTSK mRNA表达,Western blotting法检测OC中AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果与对照组比较,5μmol/L淫羊藿素组、10μmol/L淫羊藿素组OC数量少(P均<0.05);与5μmol/L淫羊藿素组比较,10μmol/L淫羊藿素组OC数量少(P<0.05)。与对照组比较,5μmol/L淫羊藿素组、10μmol/L淫羊藿素组OC凋亡率高(P均<0.05);5μmol/L淫羊藿素组与10μmol/L淫羊藿素组OC凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,5μmol/L淫羊藿素组、10μmol/L淫羊藿素组OC中CTSK mRNA相对表达量低、AMPK mRNA相对表达量高、mTOR mRNA相对表达量低(P均<0.05);与5μmol/L淫羊藿素组比较,10μmol/L淫羊藿素组OC中CTSK mRNA表达低、AMPK mRNA相对表达量高、mTOR mRNA相对表达量低(P均<0.05)。与对照组比较,5μmol/L淫羊藿素组、10μmol/L淫羊藿素组OC中AMPK、p-AMPK蛋白相对表达量高,mTOR、p-mTOR蛋白相对表达量低(P均<0.05);与5μmol/L淫羊藿素组比较,10μmol/L淫羊藿素组OC AMPK、p-AMPK蛋白相对表达量高,mTOR、p-mTOR蛋白相对表达量低(P均<0.05)。结论淫羊藿素可抑制A549细胞诱导RAW264.7向OC分化,其作用机制可能与AMPK/mTOR信号通路有关。

肺癌A549细胞诱导RAW264.7破骨细胞分化中AMPK信号通路的作用

目的:探讨AMPK信号通路在体外肺癌细胞诱导破骨细胞分化中的作用。方法:将肺癌A549细胞与RAW264.7细胞共培养后随机分为阴性对照组、阳性对照组、AICAR组,药物干预后行TRAP染色观察破骨细胞的分化,流式细胞仪观察破骨细胞细胞凋亡情况,qPCR检测破骨细胞AMPK、mTOR和CTSK mRNA的表达,Western blot检测破骨细胞AMPK、p-AMPK、mTOR和p-mTOR蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,AICAR组破骨细胞数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);对诱导破骨细胞凋亡的作用无差异;上调AMPK的mRNA和蛋白表达,下调mTOR的mRNA和蛋白表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:AICAR可以抑制肺癌细胞诱导破骨细胞分化,而AMPK/mTOR信号通路可能参与了肺癌细胞诱导破骨细胞分化过程。

经鼻高流量氧疗与无创正压通气治疗老年慢阻肺合并Ⅱ型呼吸衰竭的临床研究

目的:探讨经鼻高流量氧疗(HFNC)和无创正压通气(NIV)治疗老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并Ⅱ型呼吸衰竭的疗效差异。方法:回顾性分析79例老年COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者的临床资料,其中34例患者接受HFNC进行呼吸支持治疗,记为HFNC组,另外45例接受常用的NIV治疗,记为NIV组,两组基础治疗和基础护理均相同。观察两组治疗成功率、有创机械通气率、住院时间、并发症率和28 d病死率等治疗结局,并比较治疗前后心率(heart rate,HR)、呼吸频率、动脉血气分析指标(MAP、PaO2、PaCO2)变化。结果:HFNC组治疗成功率82.35%(28/34)、有创机械通气率11.76%(4/34)与NIV组的75.56%(34/45)、17.78%(8/45)比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组HR、呼吸频率、MAP、PaCO2均明显下降,PaO 2明显升高(P<0.05),且HFNC组上述监测指标改善均优于NIV组(均P<0.05);HFNC组住院时间(8.39±1.58)d短于NIV组的(10.08±2.04)d,并发症率17.86%低于NIV组的44.12%(P<0.05),组间28 d死亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HFNC和NIV均能有效纠正老年COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者低氧血症和和高碳酸血症,但HFNC改善效果更佳,且并发症少,住院时间更短,是一种安全有效的呼吸支持方式。

大跨度钢箱梁转体桥S0^(#)梁段施工技术研究

为进一步分析钢箱梁转体桥安装难度大、施工精度要求高的施工难题,本文以青岛新机场高速连接线3标涉铁工程大跨度宽幅钢箱梁转体桥为研究背景,分析大跨度钢箱梁转体桥的施工关键技术。基于S0^(#)梁段在拼装焊接中的施工工序、墩顶墩旁支架设计、S0^(#)梁段和墩梁固结的施工质量控制关键点,对钢箱梁转体桥的施工技术进行分析,并采用数值计算手段对施工方案的合理性进行验证。现场施工结果和数值计算表明,本工程采用的大跨度宽幅变截面钢箱梁S0^(#)梁段施工工艺能够保证施工安全。

CXCL12/CXCR4通路在人肺腺癌细胞诱导破骨细胞前体细胞向破骨细胞分化中的作用

目的探讨趋化因子12(CXCL12)/趋化因子受体4(CXCR4)通路在人肺腺癌细胞诱导破骨细胞前体细胞向破骨细胞分化中的作用及其可能的分子机制。方法以小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7为破骨细胞前体细胞,随机分为干预组和对照组。两组均在Transwell小室的下室接种RAW264.7细胞,上室接种人肺腺癌细胞A549;干预组在小室内分别加入含12.5、25.0、50.0、100.0µg/mL CXCR4竞争性拮抗剂AMD3100的培养基,对照组仅加入培养基;培养7 d后取两组细胞,行抗酒石酸碱性磷酸酶(TRAP)染色并计数分化成的破骨细胞数量,qPCR检测Transwell下室破骨细胞标志基因组织蛋白酶K(CTSK)、降钙素受体(CTR)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、破骨细胞分化因子受体(RANK)mRNA,ELISA法检测小室上清液CXCL12、白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)。结果干预组在12.5、25.0、50.0、100.0µg/mL AMD3100处理后,RAW264.7细胞向破骨细胞分化数量分别为(81±3)、(49±3)、(34±3)、(11±2)个,均低于对照组的(99±5)个(P均<0.05);且随着AMD3100处理浓度的增加,RAW264.7细胞向破骨细胞分化数量逐渐减少(P均<0.05)。与对照组比较,干预组在不同浓度AMD3100干预后破骨细胞标志基因CTSK、CTR、TRAP、RANK mRNA表达减少,小室上清液CXCL12、IL-6、TNF-α水平降低(P均<0.05);且随着AMD3100处理浓度的增加,破骨细胞各标志物表达逐渐减少,小室上清液CXCL12、IL-6、TNF-α水平逐渐降低(P均<0.05)。结论抑制CXCL12/CXCR4通路可减少人肺腺癌细胞诱导破骨细胞前体细胞向破骨细胞分化,该作用可能是通过减少IL-6、TNF-α表达实现的。

上跨多条既有线钢箱梁桥高墩位转体施工技术与实践

某2×120 m钢箱梁转体桥上跨6条既有铁路,根据工期和施工现场等具体情况,对钢箱梁钢管支架进行了设计,采用支撑格构式管桁架,设计出了拼装、滑动、移动兼滑动3种支架形式。为最大程度减小倾覆风险,防止对铁路营业线造成安全风险,基础形式采用系梁桩基连接形式增强支架整体稳定性及抗倾覆性,并对支架的施工要点进行了分析和总结,为以后类似施工提供借鉴。

探讨工民建结构设计中的抗震设计

工民建结构设计属于是建筑结构设计领域中的重点和难点内容,尤其是在抗震设计过程中,可以对整个建筑结构产生影响。本文对工民建结构抗震设计常用方法进行总结,并从选择合适的施工场地、对工民建结构进行合理设计、借助设计管理的强化提升抗震设计质量三方面,论述了工民建结构抗震设计的措施。

三氧化二砷通过抑制NF-κB增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及对核转录因子-kappaB(NF-κB)表达的影响。方法采用As2O3、TRAIL单用和联合作用于体外培养的A549细胞,以四甲基偶氮唑蓝比色法测细胞增殖抑制率和流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测NF-κBmRNA的表达,Western blot检测NF-κB蛋白的表达,酶联免疫吸附(ELISA)检测NF-κB的活性。结果 As2O3与TRAIL联用对A549细胞增殖的抑制作用均比单药组强(P<0.05);联合用药组诱导凋亡作用强于单药组(P<0.05);联合用药组明显抑制NF-κB表达,并抑制其活性(P<0.05)。NF-κB mRNA、蛋白及其活性与细胞凋亡率呈负相关(P均<0.05)。结论 As2O3可能通过NF-κB通路,增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体与肺癌治疗

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）是近年新发现的一种凋亡诱导配体，可以激活多信号传导途径诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞没有杀伤作用。TRAIL能诱导肺肿瘤细胞发生凋亡而对正常细胞没有毒性，这为肺癌的治疗提供了新的途径。

做好人大代表述职工作

人大代表向选民或者原选举单位述职,接受评议,是人大代表接受选民监督的重要途径。选举法规定:"全国和地方各级人民代表大会的代表,受选民和原选举单位的监督。选民或者选举单位都有权罢免自己选出的代表。"代表法也规定:"代表应当采取多种方式经常听取人民群众的意见,