SIRT1调控TIMP1在促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞肿瘤样侵蚀作用机制的研究

目的探讨SIRT1如何通过阻止转录因子特异性蛋白1(Sp1)与TIMP1启动子(pTIMP1)结合来抑制TIMP1,促进类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞肿瘤样侵袭的机制。方法免疫组化法(ICH)测量RA或膝关节损伤患者的滑膜组织中SIRT1和TIMP1水平,免疫印迹实验研究RA滑膜成纤维细胞中乙酰组蛋白H3(AcH3)和乙酰组蛋白H4(AcH4)表达,荧光素酶报道基因系统来确认Sp1对TIMP1转录的调节;大鼠关节组织行H&E染色后,观察其滑膜增殖、炎细胞浸润和软骨破坏。结果 SIRT1能够抑制RA滑膜成纤维细胞中TIMP1的表达。RA滑膜成纤维细胞中AcH3和AcH4的表达低于对照组(P<0.05),且其SIRT1的下调显著增加了结合AcH3(或AcH4)的TIMP1启动子的复制(P<0.05)。SIRT1的组蛋白去乙酰化减弱Sp1转录因子和TIMP1启动子间的亲和力,进而抑制RA滑膜成纤维细胞中TIMP1启动子的转录。SIRT1的清除显著缓解了CIA大鼠的软骨侵蚀。结论 RA滑膜中升高的SIRT1阻碍Sp1与TIMP1启动子的结合,进而抑制TIMP1表达,为治疗RA提供了一种新的策略。

静脉注射小剂量IFN-γ对异体骨髓间充质干细胞治疗胶原诱导关节炎小鼠的实验研究

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的最佳方法。方法不同时间点给CIA小鼠静脉注射BMSCs,观察诱导42 d各组小鼠的关节炎临床评分和病理学评分;监测CIA小鼠诱导不同时间点的干扰素-γ(IFN-γ)浓度;进一步观察免疫第28天IFN-γ联合BMSCs对CIA小鼠的疗效。结果 PBS注射组、BMSCs 14 d注射组、BMSCs 21 d注射组、BMSCs 28 d注射组的CIA小鼠关节炎临床评分分别为(9.2±0.5)分、(5.6±0.41)分、(10.2±0.53)分、(7.5±0.40)分(P<0.05);关节破坏病理评分分别为(7.3±0.5)分、(2.9±0.3)分、(10.2±0.6)分、(5.6±0.4)分(P<0.05);故与仅注射PBS相比,第14天和第28天注射BMSCs可显著缓解CIA小鼠的关节炎症,第21天注射BMSCs则加重小鼠的关节炎症。BMSCs 14 d注射组和BMSCs 28 d注射组,血清中IFN-γ的浓度分别为(500.14±34.0)pg/mL和(480.22±36.7) pg/mL;CIA小鼠血清中IFN-γ浓度在免疫第14天和第28天达到最高峰。PBS注射组、BMSCs注射组、BMSCs+IFN-γ28 d注射组、IFN-γ注射组对CIA小鼠关节破坏影响的病理评分分别为(7.8±0.3)分、(5.4±0.3)分、(4.6±0.2)分、(8.0±0.4)分(P<0.05)。结论 IFN-γ联合BMSCs可显著提高BMSCs对CIA的治疗效果。