黄芪甲苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的研究

目的探讨黄芪甲苷(AST)诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的作用。方法对第2代BMSCs进行传代培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度AST在24、48、72 h时对BMSCs的增殖作用。取第4代BMSCs分为BMSCs组、5-氮杂胞苷组(5-AZA组)和AST组,5-AZA组和AST组分别加入浓度为10μmol/L的5-AZA和浓度为100μmol/L的AST诱导液进行诱导,采用荧光倒置相差显微镜观察诱导后各组细胞的形态变化。通过Real-time q PCR法检测诱导后各组结蛋白(Desmin)、α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)、肌钙蛋白I(cTnI)mRNA表达水平;采用Western blotting法检测各组肌钙蛋白T(cTnT)表达水平。结果 100μmol/L AST亚组孔72 h时BMSCs增殖情况好于24、48 h时及其他浓度AST亚组孔各时间点(P<0.05)。荧光倒置相差显微镜观察显示AST体外诱导SD大鼠BMSCs形态分化类似心肌样细胞。5-AZA组、AST组Desmin、α-SCA、cTnI mRNA表达水平表达高于BMSCs组(P<0.05),且AST组以上蛋白mRNA表达水平高于5-AZA组(P<0.05)。与BMSCs组组比较,5-AZA组和AST组cTnT表达水平升高(P<0.05);与5-AZA组比较,AST组cTnT表达水平下降(P<0.05)。结论浓度为100μmol/L的AST作用72 h时能够在体外诱导BMSCs向心肌样细胞分化,但分化效果弱于5-AZA。

针刺治疗眼病的适应证

一般从医学的角度来讲,适应证是对某种治疗方法,或者检查手段而言,指某些处置、治疗措施或药物作用产生良好影响,特指对疾病过程有加速好转和痊愈的作用。笔者在临床实践中应用针刺治疗眼科疾病取得了一定的效果,而选择针刺治疗眼科疾病的适应证尤为重要。如有些眼病可以应用中药、西药和针刺治疗;有些眼病需要应用中药、

低氧下血管内皮细胞生长因子转染人骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞的分化

背景:已有研究发现血管内皮细胞生长因子可诱导骨髓间充质干细胞分化为内皮细胞,但在机体损伤的低氧环境下,血管内皮细胞生长因子基因是否可促进骨髓间充质干细胞定向诱导分化为血管内皮样细胞?目的:观察低氧环境下,经血管内皮细胞生长因子诱导的人骨髓间充质干细胞是否能够向血管内皮样细胞分化。方法:在含体积分数5%O2环境中,将第3代人骨髓间充质干细胞分组培养,对照组以常规培养基培养,实验组以含血管内皮细胞生长因子载体的腺病毒诱导液培养。培养2周后,进行形态学观察及表面相关分子检测,ELISA检测细胞培养上清液中血管内皮细胞生长因子及内皮型一氧化氮合成酶因子水平,RT-PCR和Western blotting检测内皮素和前列环素蛋白表达。结果与结论:(1)对照组细胞数量较多,呈拥挤状,排列不齐,呈纤维样生长;实验组细胞多呈三角形或多边形,集落状生长,呈铺路石子样;(2)对照组CD31为阴性表达,CD105为阳性表达且阳性率为99.7%,表明细胞仍呈现骨髓间充质干细胞的表型。实验组CD31表达明显上升,阳性率为30.33%;CD105表达下降,阳性率为58.11%,呈现典型的内皮细胞表型;(3)与对照组比较,实验组内皮素、血管内皮细胞生长因子及内皮型一氧化氮合成酶表达增高(P<0.01),前列环素表达降低(P<0.01);(4)结果表明在低氧环境下,血管内皮细胞生长因子具有促使人骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞分化的能力。

骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌钾离子通道蛋白和细胞因子的影响

背景:研究表明,骨髓间充质干细胞移植可以有效改善心肌梗死后的心功能,移植后的骨髓间充质干细胞可能对心肌电生理有一定影响,但目前相关的研究甚少。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心肌钾离子电压门控通道蛋白和心肌梗死相关细胞因子的影响,为进一步探索骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死引起心律失常的相关机制提供研究基础。方法:将40只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、细胞培养液组和骨髓间充质干细胞组。通过冠状动脉左前降支结扎建立心肌梗死模型,并于建模成功15-20 min后在梗死区周围采用四点法注射100μL骨髓间充质干细胞悬液(含1×10~6个骨髓间充质干细胞)和100μL细胞培养液。细胞移植4周后获取心脏标本,采用苏木精-伊红染色观察梗死心肌组织病理形态并计算梗死面积,采用Westernn blot检测钾离子电压门控通道蛋白Kv1.2和Kv1.5和心肌细胞特异性蛋白cTnT的表达,利用免疫组化方法检测梗死区心肌细胞凋亡因子Caspase-3、自噬因子Bcl-2和一氧化氮及超氧化物歧化酶的表达。结果与结论:(1)与模型组相比,骨髓间充质干细胞组心肌梗死面积减小(P<0.05),cTnT、Kv1.5和超氧化物歧化酶表达水平均提高(P<0.05),Caspase-3、Bcl-2和Kv1.2表达水平均降低(P<0.05);(2)与细胞培养液组比较,骨髓间充质干细胞组心肌梗死面积减小(P<0.05),cTnT、Kv1.5和超氧化物歧化酶表达水平均提高(P<0.05),Caspase-3、Bcl-2和Kv1.2表达水平均降低(P<0.05);(3)结果提示,骨髓间充质干细胞移植提高了心肌抗氧化能力,减少了细胞凋亡和自噬,促进钾离子通道蛋白Kv1.5的表达。

中医药针刺治疗糖尿病性视网膜病变

消渴内障是指由消渴病引起的内障眼病…，消渴病中晚期可引起睛珠混浊、眼底出血、水肿、渗出等病变。本病为双眼先后或同时发病，可对视力造成严重影响。《秘传证治要诀·三消》云：“三消久之，精血既亏，或目无视，或手足偏废如风疾……。”

含组织激肽释放酶1表达载体诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化

目的探讨组织激肽释放酶1(KLK1)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法选取2015年3—7月购买的大鼠BMSCs,将大鼠BMSC细胞分为3组即正常组、组织激肽释放酶1组、5-Aza组。采用RT-PCR分别对诱导培养后的大鼠BMSCs进行心肌细胞特异性蛋白Actin、c-Tn I和Desmin的检测,并用Western blot免疫印迹分析c-Tn T蛋白表达量。结果 RT-PCR检测显示,5-Aza诱导的BMSCs(1.964±0.805)在心肌特异性蛋白Actin RNA、c-Tn I RNA和Desmin RNA的表达均高于空白组(1.000±0.000)(P<0.05),KLK1诱导组(2.633±0.582)以上蛋白的RNA表达量又显著高于5-Aza诱导组(P<0.05)。Western blot结果显示,5-Aza诱导组c-Tn T蛋白的表达(0.799±0.101)高于空白组(0.112±0.001)(P<0.001),KLK1诱导组(1.294±0.134)显著高于5-Aza组。差异有统计学意义(P<0.001)。结论 5-Aza能有效使BMSCs向心肌样细胞诱导分化,KLK1也能诱导BMSCs向心肌样细胞分化。KLK1较5-Aza诱导的BMSCs在心肌细胞特异性蛋白RNA表达,心肌特异性蛋白T表达其心肌特异性更为突出。

针灸治疗上睑下垂的研究进展

上睑下垂系指提上睑肌和米勒平滑肌的功能不全或消失,或其他原因所致的上睑部分或全部不能提起所造成的下垂状态,属于中医的＂上胞下垂＂、＂睑废＂等范畴。中医认为其病因病机是脾气虚弱：若久病体衰、年老体弱、饮食不节等均可致脾气虚弱,清阳不升,脉络空虚;命门火衰：先天禀赋不足,命门火衰,致中气不足,主肌无力,约束失用;风邪袭络：肌腠空虚,风邪乘虚袭,风痰阻络,胞睑筋脉弛缓不用而致下垂;气血瘀滞：

中医药辨证治疗上睑下垂的临床分析

上睑下垂系指上睑部分或全部不能提起所造成的下垂状态，即在向前方注视时上睑缘遮盖角膜上部〉角膜1／5。轻者不遮盖瞳孔，只影响外观，重者部分或全部遮盖瞳孔，妨碍视功能。中医称谓“上胞下垂”，严重者称“睑废”。《诸病源候论·目病诸侯》首载“其皮缓纵，垂覆于目，则不能开，世呼为目，亦名侵风”。《目经大成·睑废》中以“手攀上睑向明开”说明上胞下垂的严重症状。

组织激肽释放酶1转染骨髓间充质干细胞的病毒感染复数选择

背景:血管舒缓素即组织激肽释放酶1,是组织激肽释放酶-激肽系统重要组成部分之一。有研究表明血管舒缓素通过促进血管新生,抑制心肌炎症产生等发挥其对心血管系统的保护作用,但并未从干细胞诱导分化方面进行探讨。目的:实验利用已构建的腺病毒载体,将其携带的血管舒缓素基因转染到大鼠骨髓间充质干细胞上,观察其是否成功转染及转染率如何。方法:以腺病毒作为载体,将目的基因血管舒缓素转染到大鼠骨髓间充质干细胞上,并采用荧光显微镜、四甲基偶氮唑盐法和流式细胞技术观察病毒对细胞的转染效果,以确定最佳的病毒感染复数。结果与结论:荧光显微镜下观察到腺病毒携带的血管舒缓素目的基因成功转染到大鼠骨髓间充质干细胞上;流式细胞仪结果显示转染率跟病毒感染复数值的大小有关系,当病毒感染复数为150时,转染率为80.8%;四甲基偶氮唑盐法结果提示,病毒感染复数为200时,细胞生长受到明显的抑制。结果证实,腺病毒介导的血管舒缓素能成功转染到大鼠骨髓间充质干细胞上,且最佳的病毒感染复数为150。

高校传媒体系的现状及其与社会传媒体系的相互作用——以广西高校为研究个案

中国的高校传媒伴随着新媒体时代的进步,纵横发展且声色并茂,集纳了平面媒体、视声媒体、网络媒体等平台的优势,在高校人才教育、学科发展、行政管理等方面纵横贯通功能巨大。但实际操作过程中却发现,广西众多高校忽略高校传媒的发展现象普遍,缺乏把这些传媒予之以血脉,视之为平台总系统的举措。高校传媒体系的提出,应以全局角度把高校各种传媒方式都放置于系统之中,充分探索系统各平台的利弊,发挥各自优势促进高校传媒系统化的形成。

黄芪注射液联合骨髓间充质干细胞对心梗模型大鼠在IL-3、IL-6、Caspase-3以及VEGF表达的影响

目的:研究黄芪注射液联合骨髓间充质干细胞对心梗模型大鼠在IL-3、IL-6、Caspase-3以及VEGF表达的影响。方法:采用结扎左冠脉法造心梗模型大鼠,造模成功后,干细胞组在心尖部注射骨髓间充质干细胞,黄芪组注射黄芪注射液,以及联合干预大鼠模型,对比各组实验动物在IL-3、IL-6、Caspase-3以及VEGF表达的影响。结果:ELISA检测血清IL-3,正常组较模型组高表达,黄芪组及黄芪联合BMSCs组较模型组表达升高(P<0.05);IL-6检测结果为正常组较模型组低表达,黄芪组以及黄芪联合BMSCs组表达低于模型组(P<0.05);Caspase-3的结果为正常组较模型组低表达,黄芪组以及黄芪联合BMSCs组表达低于模型组(P<0.05);VEGF检测结果,正常组与模型组比较低表达,黄芪组及黄芪联合BMSCs组与模型组比较表达升高(P<0.05)。结论:黄芪注射液对心梗模型大鼠IL-3、VEGF促进表达作用较突出,黄芪注射液联合BMSCs在Caspase-3、IL-6抑制表达作用较明显。

多种癌细胞Nesprin 1蛋白的表达

目的通过比较Nesprin 1在不同癌细胞中的表达程度,为Nesprin 1与多种癌细胞之间的关系做初步探讨。方法采用Western blotting方法检测Nesprin 1在人宫颈癌细胞(Hela)、人肺癌细胞(H-125)、人乳腺癌细胞(HCC-1937)、人膀胱癌细胞(5637)、人肝癌细胞(Hep G2)、人胃癌细胞(BGC-823)、人结肠癌细胞(HCT 116)、人食管癌细胞(Eca-109)、小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(Raw 2647)等癌细胞当中的表达。结果各癌细胞组GAPDH均有表达,Nesprin 1各组表达量不同,从强到弱顺序为HCC-1937>H-125>HCT116=Eca-109>RAW2647>BGC-823>Hep G2>Hela>5637,其中人膀胱癌细胞5637的表达不明显。结论 Nesprin 1蛋白可在多种癌细胞中表达,膀胱癌细胞中表达不明显。

中药针刺治疗上睑下垂的研究进展

上睑下垂[1]指上睑部分或全部不能提起所造成的下垂状态,即在向前方注视时,上睑缘遮盖角膜上部超过角膜1/5.轻者不遮盖瞳孔,影响外观,重者部分或全部遮盖瞳孔,妨碍视功能.其是目前眼科临床上常见的疑难眼病,中医眼科称为＂上胞下垂＂.

眉三针治疗上睑下垂

眉三针是指丝竹空、鱼腰、攒竹3个穴位[1],笔者在临床上应用眉三针治疗上睑下垂、麻痹性斜视及眼底病变等,取得较满意效果,现介绍如下。1丝竹空1.1穴名简释丝竹,即细竹;空,空隙。眉毛状如细竹,穴在眉梢之陷隙处。1.2定位[2]正坐或仰卧,在面部,当眉梢凹陷处。1.3局部层次解剖皮肤→皮下组织→眼轮匝肌,

国内高等外语教育“SPOC+翻转课堂”教学模式研究现状——基于CNKI中核心论文的内容分析

以CNKI数据库中收录的关于SPOC教学模式与外语翻转课堂的结合研究的39篇核心期刊论文为研究对象,采用内容分析法,对文献年代及期刊分布情况、研究主题、研究方法、理论依据等维度进行文献统计与分析,探究“SPOC+翻转课堂”教学模式的研究热点和存在问题。研究发现,“SPOC+翻转课堂”研究正处于从理论研究向应用研究的发展期,未来研究需进一步创新理论依据,深化师生行为研究,完善教学情境创设,推动一流金课建设,构建个性化翻转课堂新范式。

淫羊藿苷对去势雌性高血压大鼠内皮祖细胞的类雌激素保护作用研究

目的探索淫羊藿苷对去势雌性高血压大鼠体重、血压、心率及内皮祖细胞功能的影响。方法9周龄去势雌性京都Wistar大鼠(Wistar Kyoto rats,WKY)10只,9周龄去势雌性自发高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)50只,以WKY大鼠为空白组,SHR组大鼠随机分为模型组、雌激素组、淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组、淫羊藿苷低剂量+雌激素受体抑制剂组,分别给予相应药物8周。自给药起每周检测各组大鼠体重,检测给药前及给药8周后各组大鼠平均动脉压及心率,并于给药8周后麻醉状态下腹主动脉取血提取外周血内皮祖细胞,处死大鼠后分离其后肢提取大鼠骨髓内皮祖细胞。体外鉴定并培养内皮祖细胞,并进行内皮祖细胞活性及NO分泌水平检测。结果(1)给药8周后,雌激素组大鼠体重与模型组相比明显下降(P<0.05);(2)给药前,与空白组比较,其他各组平均动脉压明显升高(P<0.05);给药8周后,模型组平均动脉压与空白组比较明显升高(P<0.05)。与模型组比较,雌激素组、淫羊藿苷低剂量及高剂量组平均动脉压明显下降(P<0.05);与淫羊藿低剂量组比较,淫羊藿低剂量+雌激素受体抑制剂组血压明显升高(P<0.05);(3)与给药前比较,给药8周后各组心率均明显升高(P<0.05);给药8周后,淫羊藿苷低剂量及高剂量组心率与模型组比较皆明显下降(P<0.05);(4)给药8周后,与空白组相比,模型组骨髓及外周血的内皮祖细胞活性及NO分泌能力明显下降(P<0.05);与模型组相比,雌激素组、淫羊藿苷低剂量及高剂量组均明显升高(P<0.05);与淫羊藿低剂量组比较,淫羊藿低剂量+雌激素受体抑制剂组明显下降(P<0.05)。结论淫羊藿苷作为一种植物类雌激素对去势雌性高血压大鼠血压、心率及内皮祖细胞具有保护作用。

5-Aza诱导BM-MSCs移植对大鼠心肌梗死面积、相关细胞因子及钾离子通道蛋白的影响

目的观察5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对大鼠心肌梗死面积、相关细胞因子及钾离子通道蛋白表达的影响。方法大鼠随机分为对照组、模型组、阴性对照组(细胞培养液)、BM-MSCs组和5-Aza-BM-MSCs组。冠状动脉结扎建立心肌梗死模型,采用4点注射法进行细胞移植。HE染色观察梗死心肌组织病理,免疫组化检测梗死区caspase-3、beclin-2、VEGF、PGI2、超氧化物歧化酶(SOD)、IL-3、IL-6和TNF-α的表达;Western blot检测钾离子通道Kv1.2和Kv1.5蛋白的表达。结果1)与对照组相比,模型组心肌梗死面积明显增大,caspase-3、beclin-2、VEFG、PGI2、IL-3、IL-6和TNF-α表达水平提高(P<0.05);SOD、Kv1.2和Kv1.5表达水平降低(P<0.05);2)与模型组相比,BM-MSCs组和5-Aza-BM-MSCs组心肌梗死面积明显减小,caspase-3、beclin-2、IL-3、IL-6和TNF-α表达水平降低(P<0.05),Kv1.5、VEGF、PGI2、和SOD表达水平提高(P<0.05),Kv1.2 BM-MSCs组表达降低而5-Aza-BM-MSCs组表达提高(P<0.05);3)与BM-MSCs组比较,5-Aza-BM-MSCs组心肌梗死面积减小,caspase-3、和IL-6表达水平降低(P<0.05),Kv1.2、VEGF和SOD表达水平均提高(P<0.05)。结论5-Aza-BM-MSCs可以更有效的减少炎性反应与细胞凋亡,促进新生血管生成,提高心肌抗氧化能力,减少心肌梗死面积,促进钾离子通道蛋白Kv1.2的表达。

孕产保健期孕妇学校的干预对孕产妇围产结局和母乳喂养率的影响

目的:对孕产保健期学校的干预在孕产妇围产结局、母乳喂养率中的影响效果进行调查。方法:以我院50例接受保健期孕妇学校干预的孕妇为观察组,以未接受孕妇学校干预的50例孕妇为对照组,对比两组孕妇围产期结果以及母乳喂养率。结果:观察组患者自然分娩率高于对照组,统计有差异(P<0.05)。观察组无新生儿窒息、产后出血、早产病例,对照组新生儿窒息发生率与观察组比较存在差异(P<0.05);对照组产后1个月母乳喂养率、产后3个月母乳喂养率均低于对照组,统计有差异(P<0.05)。结论:孕产保健期孕妇学校干预能够改善孕产妇妊娠结局,提升母乳喂养率。

黄芪主要活性成分及其提取物对鼠骨髓间充质干细胞增殖作用的影响

目的研究黄芪注射液、黄芪甲苷及黄芪多糖对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖的影响。方法将黄芪注射液、黄芪甲苷及黄芪多糖添加入大鼠BMSC培养基中,并利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测培养不同时间(24,48,72h)后的细胞活性。结果 MTT法检测结果显示0.05g/ml浓度的黄芪注射液、100μmol/L的黄芪甲苷及1mg/ml的黄芪多糖后,大鼠BMSC的细胞活性均明显高于未添加组(P<0.05)。结论适宜浓度的黄芪注射液、黄芪甲苷和黄芪多糖可显著促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖。

低氧环境下黄芪甲苷促进人骨髓间充质干细胞分泌血管内皮细胞相关因子的实验研究

目的观察在低氧环境下,黄芪甲苷能否诱导人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向血管内皮样细胞分化,提高BMSCs经血管内皮生长因子(VEGF)诱导分化后的血管内皮样细胞的功能。方法将人BMSCs分为4组:对照组(单纯人BMSCs培养)、VEGF组(含VEGF载体的腺病毒的完全培养基加入人BMSCs)、黄芪甲苷组(含黄芪甲苷粉剂加入人BMSCs)和联合诱导组(含黄芪甲苷粉剂和VEGF载体的腺病毒的完全培养基加入人BMSCs),5%O2干预2周,对分化的细胞进行形态学观察,流式细胞仪检测细胞表型CD31和CD105的表达,ELISA检测细胞培养上清液中VEGF及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)因子的含量,Real-time PCR和Western blot检测内皮素(ET)和前列环素(PGI)的表达。结果 (1)2周后,镜下观察对照组与黄芪甲苷组细胞形态无明显变化,VEGF组和联合诱导组细胞似铺路石子样生长。(2)流式结果显示,对照组与黄芪甲苷组细胞不表达CD31,高表达CD105;VEGF组和联合诱导组细胞高表达CD31,低表达CD105,且VEGF组CD31表达高于联合诱导组(P<0.05),而CD105低于联合诱导组(P<0.05)。(3)ELISA检测发现,与对照组比较,各干预组的VEGF及eNOS因子表达均增高(均P<0.05),且大小顺序为VEGF组>联合诱导组>黄芪甲苷组。(4)RT-PCR及Western blot检测发现,与对照组比较,各干预组ET水平均升高(P<0.05),PGI表达量均降低(P<0.05);且联合诱导组ET蛋白表达水平最高,VEGF组PGI表达量最低。结论在低氧环境下,黄芪甲苷促进人BMSCs分泌VEGF相关因子;黄芪甲苷联合VEGF可以促进VEGF诱导分化后的血管内皮样细胞分泌ET。