CRISPR靶向切割毒力因子tcdB基因抑制致病艰难梭菌生长

目的应用CRISPR/Cas9系统对艰难梭菌主要毒力因子tcdB基因进行切割,达到特异性抑制致病艰难梭菌生长的效果。方法在线设计针对tcdB的sgRNA,分别将sgRNA与Cas9单独或共同作用于tcdB基因扩增产物,验证体外切割效能;分别将穿膜肽(CPP)-sgRNA或单独的sgRNA与CPP-Cas9单独或共同作用于产毒艰难梭菌,通过监测菌液A值和菌落计数,观察对细菌生长的抑制效果。同样的方法处理肠道其他细菌,验证特异性。结果sgRNA和Cas9共同作用可把tcdB扩增产物有效切割,而单独加入sgRNA或Cas9均无切割作用;单独加入CPP-sgRNA、CPP-Cas9、CPP对细菌生长没有影响;CPP-sgRNA与CPP-Cas9共同作用,无细菌生长;单独sgRNA与CPP-Cas9共同作用,细菌生长轻度受抑。用同样的方法将CPP-sgRNA+CPP-Cas9处理肠道其他细菌后,菌液A值和菌落计数与空白对照无差别。结论建立的针对tcdB的sgRNA与Cas9混合可在体外高效切割tcdB基因,抑制细菌生长;CPP可提高sgRNA转染进入细菌的效率。

血细胞分布直方图的分析与临床应用

目的探讨研究血细胞分布直方图的特点,总结归纳其临床意义,对某些感染性疾病、不同类型的贫血及血液相关的一些疾病的诊断和治疗提供参考依据。方法用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管采集静脉血2mL,充分混匀,用Sysmex血细胞分析仪进行分析,得出血细胞分布直方图。结果分析太原市中心医院2016年10月份1 200例进行血常规检测的患者的血细胞分布直方图,归纳得出以下特点:白细胞体积分布直方图在发生感染,白血病时,会有峰值高低的变化和分布宽度的改变;红细胞体积分布直方图在不同类型贫血患者中的表现有较大差异,可辅助鉴别贫血类型;血小板体积分布直方图在血小板相关性疾病发生及治疗时会呈特征性改变。结论血细胞直方图图形的改变和很多病的发生和发展都有紧密的联系,比如感染、白血病、各种类型贫血及血小板异常等。并且,图形的改变还与仪器,试剂以及标本类型和采取标本的手法有一定关系。在必要情况下,需进行血涂片镜检,从而为临床提供更为可靠的诊断依据。

2012-2022年某综合医院门诊男性患者人乳头瘤病毒感染状况和基因型分布

目的分析某综合医院门诊男性患者人乳头瘤病毒感染状况和基因型分布.方法收集2012年1月-2022年12月解放军总医院第一医学中心门诊送检的5078例男性首次就诊标本,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法对HPV进行检测,分析其亚型分布及感染特征.结果受检男性患者共检出HPV阳性1737例,总体阳性率34.21%.按亚型频次分布,低危型HPV6/11是最常见的感染亚型,占53.83%,其次是高危型以HPV16、52、51、58为主,分别占13.59%、10.02%、9.15%和8.35%;按感染状态分析,单纯高危型感染占比45.60%,高低危混合型感染占比20.26%;单一感染1198例,占68.97%;多重感染539例,占31.03%;多重感染中,二重、三重、四重感染的感染率较高,分别为21.13%、6.10%和2.53%,且多重感染中的高低危混合型占比均高于单纯低危型和单纯高危型(P<0.05);按年龄分布,>20~30岁感染阳性率最高,达38.57%.就诊患者疾病呈现多样化,尖锐湿疣和泌尿系感染位居前两位,占比51.01%和13.47%.结论11年间HPV总体感染率整体呈下降趋势,单纯低危型感染率呈下降趋势,但高危型感染率整体呈上升趋势.为预防HPV感染,应重视男性HPV检测和治疗意识,推荐男性接种HPV疫苗.