年会经典

2001年12月6日,北京天伦王朝饭店二楼宴会厅内华灯齐教。贵实室内闪现出一些人们热悉的面孔,部分国内外著名企业的高层人士在此攀谈10时30分,铁术尔·达瓦买疑,杨汝岱及王梦查。舒惠国等国家及部委领导人陆续到场……

三氯乙烯药疹样皮炎患者体内补体等变化情况观察

目的探索三氯乙烯药疹样皮炎发病机制。方法对三氯乙烯药疹样皮炎患者部分免疫相关血液生化指标进行分析,观察各指标随病程变化情况。收集13例确诊三氯乙烯药疹样皮炎患者入院时和治疗1个月后血液生化检查中部分免疫相关指标(包括IgG、IgA、IgM、C3、C4等),比较治疗前后这些指标是否发生变化。结果治疗前C3含量和IgM含量明显低于治疗后(近似正常状态)(0.846vs1.402,0.818vs0.949,均P<0.05),其他指标差异无显著性。结论三氯乙烯药疹样皮炎患者病程中可能存在补体活化,从而引起脏器损伤。

三氯乙烯染毒小鼠免疫功能变化研究

目的 观察三氯乙烯对NIH小鼠染毒后免疫功能的变化。方法 给予NIH小鼠皮下三氯乙烯染毒后研究胸腺、脾、肝脏等脏器系数变化情况、进行足跖肿胀实验、脾细胞转化实验等。结果 三氨乙烯染毒小鼠胸腺、脾脏器系数未见明显变化。24 h、48 h时小鼠足跖肿胀系数明显高于溶剂对照组。80 mg/L三氯乙烯可抑制溶剂对照组脾淋巴细胞的增殖,但可促进三氯乙烯染毒组脾淋巴细胞增殖。结论 三氯乙烯可能诱导NIH小鼠产生迟发性变态反应。

小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验方法改进及应用

目的 对小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验方法进行改进 ,以达到染色体分裂相增多、铺展好、背景清晰的效果利于阅片 ,并将改进后方法应用于农药的致突变实验。方法 将原方法中分离曲细精管改为全睾剪碎 ,软化步骤提前 ,并改用 2 %柠檬酸钠软化 ;固定过程中去除大块组织 ,最终制备小鼠睾丸初级精母细胞染色体标本。结果 两次实验中 ,某农药各剂量组染色体畸变细胞率与阴性对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5) ;某农药各剂量组及阴性对照组染色体畸变细胞率与阳性对照组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 方法改进后可见大量分散铺展良好、背景清晰中期分裂相细胞 ,利于观察。

饮水中的强诱变剂MX

本文对饮水中３－氯－４－（二氯甲基）－５－羟基－２（５氢）呋喃酮的理化性质、生物作用及其去除方法等作一综述。重点讨论了它对于细菌及哺乳动物细胞ＤＮＡ的诱变性、致染色体畸变。

三甲基氯化锡引发低血钾症动物模型的研究

目的研究用三甲基氯化锡（ＴＭＴ－Ｃｌ）引发低血钾症动物模型的方法。方法给ＳＤ大鼠腹腔注射ＴＭＴ－ＣＩ，观察其半数致死剂量（ＬＤ５０）以及血钾、血钠、血氯水平与ＴＭＴ－ＣＩ的剂量和染毒时间的关系。结果ＴＭＴ－ＣＩ的ＬＤ５０为１４．７ ｍｇ／ｋｇ。随着剂量的增加，血钾水平显著下降，死亡明显加快；１０ ｍｇ／ｋｇ组血钾随着染毒时间增加而不断下降，至第６ｄ达到最低为 ４．８５ｍｍｏｌ／Ｌ，第 １１ｄ开始回升，但需到 ２８ ｄ后才恢复至正常水平。血钾下降的速度及程度与中毒表现有关。染毒后０．５ｈ动物血钠水平也明显下降，但２４ｈ后均恢复正常。结论采用ＴＭＴ－ＣＩ可以制作大鼠低血钾症动物模型。

三氯乙烯药疹样皮炎免疫相关基因易感性的研究

目的了解HLA-DM基因在三氯乙烯药疹样皮炎和正常对照者中的分布情况,探索三氯乙烯药疹样皮炎的易感性基因,为其危害防治提供依据。方法将病例组及对照组基因组DNA应用降落式PCR扩增,结合限制性片断长度多态性检测方法和直接测序,确定其DMA及DMB等位基因型和基因型,比较两组之间DMA和DMB等位基因型和基因型出现频率。结果病例组HLA-DMA*0101等位基因频率明显高于对照组(71·3%,对照组为55·0%,P<0·05);病例组HLA-DMB*0103等位基因频率明显高于对照组(P<0·05);对照组HLA-DMA*0102-*0102纯合子比例明显高于病例组(P<0·05);病例组HLA-DMB*0101-*0102杂合子比例明显低于对照组(P<0·05)。结论DM基因多态性可能与三氯乙烯药疹样皮炎的易感性有关。

性别对荷H_(22)肝癌小鼠肿瘤生长的影响

目的研究性别因素对H22荷瘤小鼠肿瘤生长情况的影响。方法取40只1个月龄昆明小鼠随机分为2组,每组20只,雌雄各半,腋下注射H22细胞,建立H22荷瘤模型,每天测量小鼠体重及肿瘤体积,接种18d处死后测量肿瘤组织的重量和体积,比较性别对小鼠体内肿瘤大小是否存在差异。结果雌性小鼠肿瘤重量为(2.63±1.62)g显著高于雄性小鼠肿瘤重量(1.26±0.87)g(P<0.05),雌性小鼠肿瘤体积(6.34±4.43)cm3显著大于雄性小鼠肿瘤体积(2.83±2.13)cm3(P<0.05)。结论H22荷瘤雌性小鼠肿瘤重量和体积均明显大于雄性小鼠。

衍生化气相色谱法同时测定尿中三氯乙烯的3种氯代乙酸代谢产物

建立了以三氯化铁为催化剂,乙醇与尿中三氯乙烯的3种代谢产物(一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸)乙酯衍生化的气相色谱测定方法。对乙酯衍生化温度、时间、三氯化铁用量、乙醇用量进行探讨,确定了最优化的衍生条件为4 mL尿样加入1.05 mmol三氯化铁、2 mL乙醇,90℃水浴50 min,经2 mL正己烷萃取后直接进样测定。尿中一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸的浓度分别在40～2 400、20～1 000、10～500μg/L范围内呈良好线性,相关系数分别为0.999 8、0.999 3和0.999 2,3种氯代乙酸在尿样中的平均加标回收率为104%、109%和106%。方法的检出限分别为4.67、1.32、0.27μg/L。该方法乙酯衍生化试剂低毒、低腐蚀性,反应条件温和,操作简便,已成功用于三氯乙烯职业暴露人群尿样中3种代谢产物的生物检测。

氯化饮水中有机提取物对大鼠和人肝肿瘤细胞(HepG2)的遗传毒性及脂质过氧化作用

The genotoxic effects of chlorinated drinking water(CDW) extracts were examined in human HepG2 hepatoma cells, liver cells and polychromatic erythrocytes (PCEs) of bone marrow of Wistar rats by using in vivo and in vitro micronucleus(MN) test and single cell gel electrophoresis(comet assay). The influence of CDW on the lipidperoxidation (LPO) in blood and tissue of rats was also studied. The results indicated a significant increase of the frequencies of MN in PCEs at the low concentration of CDW and in HepG2 at the high concentration of CDW. The increased DNA breakage caused by CDW was observed in rat liver cells and in HepG2 cells by using comet assay. The levels of malon dialdehyde(MDA) were significantly increased almost in all animals and in all organs tested. A dose dependent increases of MDA were observed in rat liver. It was demonstrated that CDW extracts caused genotoxic and oxidative damage on animals.

豚鼠最大值试验的方法学改进探讨

目的对豚鼠最大值试验(GPMT)的试验方法进行改进,提高GPMT法的可操作性和重复性。方法对试验剂量的确定、试剂的选择、试验动物与分组、受试物前处理、去毛方法、十二烷基硫酸钠(SLS)的应用、动物固定以及试验结果观察8个方面进行改进及完善。使用改进后的GPMT法对三氯乙烯(TCE)进行致敏试验2次。结果细化了试验剂量的确定方法和试剂、实验动物、受试物前处理和SLS的使用方法。明确了电动剃毛刀的去毛效果。确定了无刺激胶布法作为受试物固定的有效方法。皮肤过敏反应情况应在去除激发斑贴后5h开始进行观察。重复激发的致敏率和致敏强度均下降。TCE两次致敏率分别为52%和48%,且差异无显著性(P>0.05)。结论改进后的GPMT法提高了操作性,重复性好。

烯啶虫胺原药的亚慢性经口毒性的实验研究

目的了解烯啶虫胺原药的亚慢性经口毒性。方法按照CB15670-1995进行亚慢性经口毒性实验（90d喂养）。SPF级SD大鼠分成4组，每组22只，雌雄各半，体重80～96g，受试物掺进饲料中，实际摄入剂量分别为0、5．6、24．7、132．2mg·kg^-1·d^-1。结果实验结束时，中、高剂量组动物体重均降低；高剂量组雄性动物血清白蛋白降低，部分动物脏器（肝、肺、脑）有不同程度的病理表现，心、肝、肺、肾、脑、睾丸体比升高；中剂量组部分动物肺有不同程度的病理表现，肺体比升高；而低剂量组动物各观察指标（包括动物表现、体重、血常规、血生化、脏器系数和各主要脏器病理检查等）无明显异常发现。结论烯啶虫胺原药在SD大鼠亚慢性经口毒性的最大无作用剂量为5．6mg·kg^-1·d^-1。

右旋反式烯丙菊酯慢性经口毒性实验研究

目的 了解右旋反式烯丙菊酯的慢性经口毒性。方法 按国家标准方法 ,用无特定病源体 (SPF)级SD大鼠进行慢性经口毒性实验 (6个月喂养 ) ,每组 40只动物 ,雌雄各半 ,体重 50～ 70g ,共 4组 ,受试物掺进饲料中喂饲 ,实际摄入剂量分别为 0 (对照 )、2 3 3、9 66和 3 8 66mg kg- 1 d- 1。实验结束后留部分动物用普通饲料喂饲 1个月 ,以观察其恢复情况。结果 实验过程中各组动物未见明显毒性反应 ,体重无明显改变 ;中、高剂量组动物WBC降低 ,高剂量组动物淋巴细胞比例降低 ,其它 7个血常规指标基本正常 ;血液生化检查除中、高剂量组动物白 /球蛋白比升高外 ,其它 8个指标并无明显改变。高剂量组部分动物脏器 (心、肝、脾、肺、肾、脑 )有不同程度的病理表现 ,中剂量组部分动物脏器 (肝、脾、肺、脑 )有不同程度的异常表现 ;高剂量组动物卵巢脏器系数升高。结论 一定剂量的右旋反式烯丙菊酯对SD大鼠WBC、血蛋白有一定的影响 ,可引起部分脏器的病理改变。慢性 (6个月 )经口毒性的最大无作用剂量为 2 3 3mg kg- 1 d- 1。

人外周静脉血血清蛋白质双向凝胶电泳条件优化

目的优化人外周静脉血血清蛋白质的双向凝胶电泳条件。方法血清总蛋白经去除白蛋白、IgG和丙酮沉淀去盐分处理后,固相pH梯度等电聚焦(IEF)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)进行蛋白质电泳,对蛋白质的上样量、固相pH梯度(IPG)胶条的pH值范围、凝胶浓度、水化上样液体积和IEF程序及其参数等条件进行优化。结果将50～100μg蛋白质溶解于终体积为350μl水化上样液,应用pH4～7的IPG胶条和浓度12%的SDS-PAGE凝胶进行双向电泳,经优化电泳电流、时间等参数后,建立了合适的双向凝胶电泳条件,得到比较理想的蛋白质二维图谱。结论优化了血清蛋白质双向凝胶电泳条件,为进一步开展血清差异蛋白质组学研究奠定基础。

顺式和反式氯氰菊酯拟雌激素样作用探讨

目的通过体内和体外实验相结合的方法,探讨顺式氯氰菊酯和反式氯氰菊酯是否具有拟雌激素样作用。方法进行去势大鼠子宫增重实验、小鼠子宫增重实验和乳腺癌细胞株(MCF-7)细胞增殖实验。结果两种子宫增重实验中两种受试物均未观察到子宫质量增加,而阳性对照组可见到明显子宫增重作用。两种受试物在10-8~10-10mol/L均导致MCF-7细胞明显增殖,与溶剂对照组比较均有统计学意义(P<0.05)。结论两种受试物在体内实验中未见明显雌激素样作用;在体外细胞实验中似乎具有拟雌激素样作用。

^(60)Coγ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线

目的 建立60 Coγ射线照射离体人血诱发染色体畸变的剂量 -效应曲线。方法 采集健康成人外周静脉血 ,60 Coγ射线照射 ,照射吸收剂量为 0～ 5 0Gy ,剂量率为 0 3 8Gy/min。采用开始加入秋水仙碱法进行细胞培养 48h。制片后观察淋巴细胞中染色体型非稳定性畸变 ,包括双着丝粒体、着丝粒环、无着丝粒断片等。用双着丝粒体加着丝粒环对剂量进行曲线拟合。结果 离体外周血经60 Coγ射线照射后 ,在 0～ 5 0Gy范围内“双 +环”率与剂量在不同剂量范围建立的回归方程为 :0～ 0 5Gy ,y =0 0 0 2 17+0 0 82 83D2 ;0～ 1 0Gy ,y =0 0 0 14 6+0 .0 93 10D2 ;0～ 5 0Gy ,y =0 0 485 1D2 .1860 1;0 5～ 5 0Gy ,y =0 0 4848D2 .18645。结论 成功建立了60 Coγ射线照射离体人外周血诱发染色体畸变剂量效应曲线。

S-生物烯丙菊酯亚慢性经口毒性和致突变性研究

目的研究农药S生物烯丙菊酯的致突变性和亚慢性经口毒性。方法按GB156701995的方法进行Ames试验、小鼠骨髓微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验和大鼠亚慢性经口毒性试验。结果Ames试验各条件下均为阴性(0.5、5、50、500、5000μg/皿)。S生物烯丙菊酯2～40mg/kg剂量组骨髓微核细胞率和10～40mg/kg剂量组睾丸精母细胞染色体畸变率与阴性对照组比较差异均无显著性。亚慢性经口毒性试验中,各剂量组(2.9～38.5mg·kg-1·d-1)在一般状态、体重、脏器系数等指标均基本正常;高剂量组动物和中剂量组动物部分脏器(脑、心、肝、肾、肺、脾、睾丸)有不同程度的病理表现;经综合分析,S生物烯丙菊酯在本试验对SD大鼠亚慢性经口的最大无作用剂量为2.9mg·kg-1·d-1。结论本受试物在本试验剂量下无致突变作用,亚慢性经口的最大无作用剂量可为本农药安全性评价和进一步试验提供依据。