Flg22诱导的海带孢子体防御反应初步研究

以鞭毛蛋白N端一个保守的22个氨基酸多肽（flg22）为激发子,研究其诱导海带孢子体防御反应的特征,以丰富植物分子病理学理论。采用Evans blue染色方法发现,flg22诱导后2 h内,未能观察到海带孢子体细胞死亡现象,诱导后4~10 h,观察到大量死亡的细胞。TUNEL（TdT-mediated dUTP-biotin nick and labeling）检测方法证实,受flg22诱导后海带孢子体有DNA断裂现象,而且3’-OH末端断裂的数量随诱导时间的延长而增多,并有从诱导部位向外扩散的趋势。运用Luminol荧光检测方法检测到受flg22诱导后海带孢子体H2O2释放量迅速增加,至3 h时达到峰值,约为20μmol/L。应用荧光染料2’,7’-二氢二氯荧光黄双乙酸钠（DCFH-DA）进行ROS组织学检测,发现flg22诱导后1 h即观察到绿色的荧光信号,信号强度随诱导时间的延长而增加,诱导后3 h信号最强,随后绿色荧光信号的强度逐渐减弱。ROS的产生趋势与Luminol荧光检测方法的结果相一致。结果表明,flg22也是诱导海带孢子体防御反应的有效激发子。