实验用荣昌猪SLA-1等位基因鉴定及分子遗传特征分析

旨在明确实验用荣昌猪SLA遗传背景,深入研究SLA-1分子相关的抗原递呈和免疫应答机制,本研究对27头荣昌猪采集抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,设计特异性引物对SLA-1基因进行RT-PCR扩增、克隆和测序,对获得序列的分子特征进行分析。结果显示,荣昌猪中共获得11个SLA-1等位基因,其中,9个为新等位基因,全部获得GenBank登录号和ISAG SLA命名委员会官方命名,SLA-1^(*)24:01等位基因在该群体中频率最高。SLA-1基因编码区全长1086 bp,存在127个核苷酸多态位点,非同义单核苷酸多态性位点数高于同义单核苷酸多态性位点数。核苷酸多样度为0.0449,单倍型多样度为1,平均核苷酸差异数为48.782,G+C含量为64.9%。SLA-1基因编码的361个氨基酸中,有75个氨基酸变异位点;第2和第3外显子编码区多态性最高,且第2外显子区域的氨基酸变异程度高于第3外显子区,组成抗原肽结合槽6个口袋的33个关键氨基酸位点中,11个在人与荣昌猪之间高度保守,与β2-微球蛋白结合的19个关键氨基酸位点中,10个保持一致,CD8分子与MHC结合的关键氨基酸位点中,只有225(Thr/Ser)和228(Thr/Met)位点不同。同源性和系统进化树分析表明,SLA-1^(*)10:03和SLA-1^(*)18:03分别与人HLA-A^(*)02:01和HLA-A^(*)11:01等位基因的同源性最高,荣昌猪与亚洲野猪、巴马小型猪和融水小型猪等亚洲猪种具有较近的亲缘关系。本研究成功获得了中国地方猪种荣昌猪SLA-1基因,发现其具有极为丰富的多态性,为揭示荣昌猪的SLA遗传背景和开展异种移植研究奠定了遗传学基础。

公猪的饲养管理

1饲养原则 提供所需的营养以使精液的品质最佳，数量最多；为了交配方便，延长使用年限，公猪体重不应太大，这就要求限制饲养。最好选用特制公猪料，日喂2次，每头喂2．5～3．0kg／d，适当补充维生素，配种期每天补喂一枚鸡蛋，每餐不要喂得过饱，以免猪饱食贪睡，不愿运动造成过肥，喂鸡蛋于喂料前进行。

母猪的管理要点

1后备母猪的饲养管理要点 1.175kg后备母猪当后备母猪体重达到75kg时,饲喂母猪料,最好是专门的后备母猪料,适当调整饲料配方,以保证后备母猪适宜的肥瘦度。1.2105kg后备母猪这时需要接种疫苗并用公猪诱情刺激,每种疫苗接种时间最好间隔7d。

分娩舍饲养管理技术操作规程

1工作目标 按计划完成母猪分娩接产任务。2工作内容2．1产房彻底冲洗消毒，做好接收临产母猪的一切准备。

SPF大白猪和长白猪群体生理生化特性分析

目的研究分析SPF大白猪、长白猪生殖生理和血液生理生化特性。方法常规方法测定SPF大白猪、长白猪群体10项生殖生理指标、19项血液生理和18项血液生化指标,统计分析各指标在不同群体、不同年龄、不同性别间的差异。结果 SPF大白猪、长白猪生殖生理指标和血液大部分生理生化指标差异不显著(P>0.05),个别指标如血液生理指标GRAN、HGB、RDW、PLT、PCT,血液生化指标ALKP、CHOL、TBIL、BUN在品种间、不同年龄以及不同性别之间差异显著(P<0.05),但其偏离正常值范围较小。结论 SPF大白猪、长白猪在生殖生理和血液生理生化等方面基本稳定,与其他实验用小型猪相比差异不大,本研究为其标准化饲养、动物模型的构建以及封闭群猪群遗传质量的评价提供了重要的基础数据。

实验用SPF大白猪和长白猪SLAⅡ类基因多态性研究

目的研究实验用SPF大白猪和长白猪SLA II类基因的多态性。方法分别采集15头SPF大白猪和22头长白猪抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,反转录后RT-PCR扩增DQB1、DRB1和DQA基因并进行测序,分析获得的SLA II类等位基因序列多态性。结果 3个基因共获得25个等位基因,包括8个DQB1,10个DRB1和7个DQA,全部获得ISAG SLA命名委员会的官方命名,其中3个等位基因首次提交完整序列,命名为DQB1*02:12(KU754590)、DQB1*02:03(KU754591)和DRB1*06:07(KU754601),3个DQA等位基因为新发现等位基因。SPF大白猪和长白猪DQB1等位基因与外源性抗原结合的15个氨基酸中,共有5个氨基酸具有高度保守性;DRB1等位基因的16个外源性抗原识别位点中,仅1个位点高度保守;DQA等位基因19个抗原结合位点中,有11个高度保守。SLA II类基因氨基酸序列分子进化树表明,3个基因分别聚为两大类,与国外Yucatan小型猪具有较近的亲缘关系,而与其他猪种未表现明显遗传距离相隔。结论成功鉴定了大白猪和长白猪的25个SLA II类等位基因,发现其具有较为丰富的多态性,所获得SLA II类等位基因在其他品种猪也广泛分布,具有多样性,这一研究结果对大白猪和长白猪发展为经典实验动物模型具有重要作用。

实验用公牛去势术

1去势目的 为了使牛性情更加温顺，减少相互间的打斗以及对人的攻击，便于保定，保证实验安全稳定的进行。

T—P二联自家高免血清制备方法及临床应用

猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻在冬春季节猪群中多发。受外界多种因素的影响，病毒在不断地变异，使得这两种病的流行没有明显的季节性，一年四季都有发生。临床表现为发病突然，传播迅速，很快波及全群。尤其哺乳猪和断乳仔猪症状明显，出现精神沉郁，食欲减退或废绝、先呕吐，

母猪发情与配种

1发情 1．1发情时间 母猪发情周期平均21d（18—24d），经产母猪一般断奶后一周内（3—7d），可再次发情排卵，配种受孕，每次发情持续时间为3～5d，后备母猪比经产母猪持续时间长。

公猪的调教与采精

1公猪的调教 （1）清洗公猪的腹部及包皮部,挤出包皮积尿,按摩公猪的包皮部。（2）诱发爬跨：用发情母猪的尿液、阴道分泌物或其他公猪的精液涂在假母台上,也可用其他公猪的尿或口水涂在假母台上,目的是刺激诱发公猪爬跨假母台。（3）上述方法都不奏效时,可把发情母猪赶到假母台旁边,让公猪空爬几次,在公猪很兴奋时赶走发情母猪,诱发其爬假母台。