IFN-γ通过激活STAT3促进甲状腺上皮细胞分泌CXC趋化因子配体10(CXCL10)

目的探讨γ干扰素(IFN-γ)对甲状腺细胞分泌趋化因子的作用及机制。方法 HE染色检测桥本甲状腺炎组织中淋巴细胞浸润情况,免疫组织化学染色检测IFN-γ的表达。用500 U/mL IFN-γ处理Nthy-ori 3-1甲状腺细胞后,利用Western blot法检测信号转导子及转录激活子3(STAT3)及磷酸化的STAT3的水平。用STAT3抑制剂Stattic处理后,ELISA测定CXC趋化因子配体10(CXCL10)的变化,TranswellTM法检测淋巴细胞的迁移能力。结果与正常甲状腺组织比较,桥本甲状腺炎组织中淋巴细胞浸润较多,IFN-γ表达水平较高。与对照组比较,IFN-γ处理增加甲状腺细胞p-STAT3水平,增加CXCL10分泌和淋巴细胞迁移,而Stattic处理后CXCL10分泌减少,淋巴细胞迁移减少。结论 IFN-γ激活STAT3促进甲状腺上皮细胞分泌趋化因子,增加淋巴细胞的迁移。

EGCG对甲状腺癌细胞增殖和摄碘能力的影响

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对甲状腺癌细胞增殖和摄碘能力的影响。方法:用不同浓度的EGCG处理甲状腺癌W3细胞株48 h后,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测W3细胞增殖能力,流式细胞术、免疫荧光法检测钠-碘转运体(sodium iodide symporter,NIS)的变化,摄碘能力实验检测W3细胞摄碘能力。结果:与对照组比较,随着EGCG浓度的增加,W3细胞的增殖能力逐渐降低(P<0.01),NIS的表达逐渐增加(P<0.01),呈浓度依赖性。摄碘实验显示,在一定浓度范围内,EGCG明显促进W3细胞对碘的吸收能力(P<0.01)。结论:EGCG能抑制甲状腺癌细胞的增殖能力,通过上调NIS的表达促进甲状腺癌细胞株的摄碘能力。

小窝蛋白-1敲减对人甲状腺上皮细胞趋化因子mRNA表达的影响

目的:探讨小窝蛋白-1(Caveolin-1)RNA干扰慢病毒对人甲状腺上皮细胞Nthy-ori3-1趋化因子mRNA表达的影响。方法:采用分子克隆技术,根据Caveolin-1的短发夹RNA序列,构建pLKO.1-Caveolin-1重组质粒,将其或空载质粒与慢病毒包膜质粒pMD2.G和包装质粒psPAX2共转染人胚肾上皮293T细胞。48 h后收集病毒液并感染Nthy-ori 3-1细胞,用嘌呤霉素筛选出阳性细胞,于倒置显微镜下观察Nthy-ori 3-1细胞的生长情况;荧光实时定量PCR和蛋白质印迹检测Caveolin-1的敲减效果;荧光实时定量PCR检测CXC趋化因子配体10(CXCL10)、CC趋化因子配体20(CCL20)mRNA表达水平。结果:慢病毒感染后的Nthy-ori 3-1细胞生长状态良好,Caveolin-1的表达显著降低。抑制Nthy-ori 3-1细胞中Caveolin-1表达后,其CXCL10、CCL20的mRNA表达水平显著上调。结论:成功构建Caveolin-1 RNA干扰慢病毒,Caveolin-1可能通过影响某些趋化因子的表达,参与桥本甲状腺炎的发生。

IL-23通过PI3K/AKT途径诱导甲状腺上皮细胞凋亡

目的探讨白细胞介素23(IL-23)对人甲状腺上皮细胞增殖、凋亡的影响。方法用(10、50、100)ng/m L IL-23处理Nthy-ori 3-1甲状腺上皮细胞24 h后,用MTT法检测细胞增殖能力改变,藻红蛋白标记的膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexinⅤ-PE/7-AAD)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡水平变化,Western blot法检测磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、Bcl-2、Bcl-x L、活化caspase-3蛋白的水平。结果与对照组相比,随着IL-23剂量增加,甲状腺上皮细胞的增殖能力逐渐下降;IL-23下调PI3K/AKT信号蛋白的磷酸化水平并促进甲状腺上皮细胞凋亡。结论 IL-23通过调节PI3K/AKT途径促进甲状腺上皮细胞凋亡。

术前HPR、LCR和CEA水平在结直肠癌中的临床价值分析

目的探讨术前血红蛋白/血小板比值(HPR)、淋巴细胞/C反应蛋白比值(LCR)、癌胚抗原(CEA)与结直肠癌患者临床特征的关系及对结直肠癌的诊断价值。方法将2018年1月至2020年12月于该院治疗的110例结直肠癌患者纳入研究作为结直肠癌组。另外,选取同期结直肠炎患者62例作为结直肠炎组,以及94例体检健康者作为健康对照组。通过血常规和C反应蛋白(CRP)的检测结果计算纳入研究者HPR、LCR,检测纳入研究者血清CEA水平。分析HPR、LCR、CEA与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤浸润程度、有无淋巴结转移、TNM分期、有无远端转移等临床特征的关系。结果结直肠癌组HPR、LCR均低于结直肠炎组和健康对照组,而CEA水平高于结直肠炎组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅳ期患者HPR、LCR低于Ⅲ期及Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05),而CEA水平高于Ⅲ期及Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05)。Ⅲ期患者LCR水平低于Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05),而Ⅲ期患者HPR、CEA与Ⅰ+Ⅱ期患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,与单项检测和两项联合检测比较,HPR、LCR、CEA联合用于结直肠癌诊断的AUC(0.850)最大。在单项检测中,LCR的灵敏度最高(78.2%),CEA有最高的特异度(82.3%)。HPR、LCR和CEA的水平与结直肠癌患者有无远端转移及TNM分期有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。此外,HPR水平的变化与结直肠癌患者肿瘤浸润程度有关(P<0.05),CEA与有无淋巴结转移有关(P<0.05),LCR则与以上两者均有关(P<0.05)。结论HPR、LCR水平与结直肠癌患者的临床特征相关且对结直肠癌的诊断有潜在价值,与CEA联合使用能提高对结直肠癌诊断的灵敏度。