一株鹅源腐生葡萄球菌的分离鉴定、药敏试验、耐药基因及毒力基因检测

目的:查明某养殖户送检的以腿部肿胀为特征的16日龄病鹅病原菌,分析其抗生素耐性、毒力基因携带情况。方法:取病鹅腿部肿胀处的组织液,进行病原菌分离鉴定、药敏试验、耐药基因及毒力基因检测。结果:从病鹅腿部肿胀处的组织液中分离培养到1株球状、不规则排列的G_(+)菌。通过16S rRNA基因序列分析,确定为腐生葡萄球菌。药敏试验显示该菌对妥布霉素、庆大霉素、环丙沙星敏感,对链霉素、复方新诺明等药物耐药。耐药基因检测得出该菌含有卡那霉素类耐药基因aadA1、头孢菌素类耐药基因blaCMY-2、磺胺类耐药基因sul1。毒力基因检测得出该菌携带肠毒素基因seb、耐热核酸酶基因nuc、溶血素基因hla、毒素休克综合征毒素1基因TSST-1。结论:该鹅患病部分病原菌为腐生葡萄球菌,毒力强,治疗时应优先选用妥布霉素。

“任务驱动”教学法在动物微生物学实习实训中的应用初探

为提高动物微生物学实习实训课程的教学效果,培养满足现代社会需求的动物医学、动植物检验检疫和动物科学专业本科人才,采用“任务驱动”教学法整合教学内容,引导学生进行自主学习,提升学生专业综合素质。

鹅源阪崎杆菌分离鉴定及相关耐药与毒力基因检测

目的:查明送检病死鹅的死亡原因,对其进行病原菌分离鉴定及其耐药性与毒力基因检测。方法:对病死鹅的肝脏组织进行病原菌的分离鉴定、药敏试验和耐药基因与毒力基因检测。结果:从病死鹅的肝脏组织中分离到1株单个存在、中等大小的革兰氏阴性杆菌。同源性分析结果显示,该分离菌为阪崎杆菌。药敏试验结果显示,该菌对头孢哌酮舒巴坦敏感,对沙拉沙星、氟苯尼考、头孢噻呋钠等中度敏感,对庆大霉素、头孢呋辛、安普霉素不敏感。耐药基因检测显示,该菌含有β-内酰胺酶类耐药基因blatem-1、卡那霉素类耐药基因aadA 1、喹诺酮类耐药基因qnr、磺胺类耐药基因sul 1,不含有头孢菌素类耐药基因blaCMY-2。该菌被检出克罗诺杆菌的外膜蛋白毒力基因ompx、克罗诺杆菌血浆纤溶酶原激活物毒力基因cpa、免疫相关蛋白毒力基因sip。结论:送检病死鹅是因为感染阪崎杆菌导致的死亡,该菌含有多个耐药基因和多种毒力基因。

兔源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了对疑似感染巴氏杆菌的病死兔进行病原的分离、鉴定并分析其耐药情况,本试验对送检的病死兔进行剖检,结合传统分离培养及16S rRNA和荚膜抗原A(capA)基因的PCR扩增等鉴定病原菌,PCR方法扩增其23个毒力基因,最后进行药敏试验。结果显示,分离菌在血琼脂培养基的菌落特征为光滑、湿润、半透明、灰白色、圆形、露珠状,染色镜检可观察到革兰阴性、两端染色较深的红色短杆菌。PCR扩增及测序结果显示,该分离菌株的16S rRNA和capA基因与多杀性巴氏杆菌Q菌株(GenBank登录号:CP033597)同源性分别为99.86%和100%。23个毒力基因中仅pfhA、oma 87、fur、pmHAS基因检测出目的条带,其余19个毒力基因均未检出。该分离菌株对环丙沙星、氧氟沙星、头孢拉定、氨苄西林、卡那霉素、阿米卡星、庆大霉素、红霉素和多黏菌素B共9种药物敏感,对四环素、复方新诺明和克林霉素等耐药。结果表明本试验从病死兔中分离鉴定出1株荚膜血清A型的多杀性巴氏杆菌,可选用环丙沙星和红霉素等进行治疗。该结果可为临床巴氏杆菌病的治疗提供一定的理论依据。

猪源绿色气球菌的分离与鉴定

对安徽省凤阳县某生猪养殖场送检的病死猪肝脏样品进行病原的分离与鉴定。将病死猪肝脏组织接种至血琼脂培养基上进行病原菌的分离纯化、染色镜检、生化试验,以及16S rRNA基因的PCR扩增和测序分析。结果显示,分离菌在血琼脂培养基上呈灰白色、圆形小菌落,菌落周围有草绿色的不完全溶血现象;染色镜检发现分离菌为革兰氏阳性的二联或四联球菌;生化试验表明分离菌对葡萄糖、乳糖和蔗糖均能分解产酸不产气,甲基红试验为阳性,二乙酰和吲哚试验为阴性;PCR测序分析表明,分离菌与猪源绿色气球菌719菌株的16S rRNA基因序列(GenBank登录号为:MN513224)的相似性高达99.86%,与GenBank中的10株绿色气球菌参考菌株的同源性为99.2%~99.3%,与绿色气球菌的多个菌株位于同一大分支上,遗传亲缘关系较近。结果表明,从养殖场送检的病死猪肝脏组织中分离鉴定出1株绿色气球菌AHFY菌株,为该病的临床诊断及防控提供依据。

兽医微生物学课程教学设计改革——以病毒的形态和结构为例

兽医微生物学课程研究内容广泛,是兽医学、微生物学、公共卫生学等重要的基础学科,实践性和应用性极强,其教学效果直接影响到后续专业核心课程的学习。课程改革需要从教学理念、教学内容、教学方法、考核方式等各教学环节进行综合改革,因此,以“病毒的形态和结构”为例,从教学设计的四大基本问题:“为什么学”“学什么”“怎么学”以及“学得怎样”,依次对学习目标、学习内容、教学方法以及学习评价进行重点介绍。

壳聚糖对5种细菌体外的抑制试验

为开发利用壳聚糖,选择两种不同性质壳聚糖进行体外抑菌试验。将白色壳聚糖(Ⅰ组)和褐色壳聚糖(Ⅱ组)的乙酸溶液、褐色壳聚糖水溶液(Ⅲ组)用无菌蒸馏水分别稀释至10,5,2.5,1.25 g/L和0.625 g/L,用相应稀释度乙酸溶液(Ⅳ组)作对照组。对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、绿脓杆菌、鸡伤寒沙门菌进行体外抑菌试验。结果表明,在体外,壳聚糖对上述5种细菌的生长均有不同程度的抑制作用,不同性质的壳聚糖和同一性质不同浓度的壳聚糖抑菌效果不同。

病死猪大肠埃希菌与变形杆菌的分离鉴定和药敏试验

为弄清安徽五河某养猪场送检病死猪的病因,采集病死猪肝脏组织进行病原分离培养,生化试验及药敏试验,扩增其16SrRNA序列。结果显示,从病死猪肝脏中分离到2株革兰阴性杆菌,16SrRNA序列分析结果显示,1株菌与埃希菌属大肠埃希菌(登录号:KY367384.1)的同源性达到100%;另1株与变形杆菌属普通变形杆菌(登录号:EF426446.1)同源性达到99.9%。药敏试验结果显示,2株菌均对米诺环素较敏感,养殖户使用3d后,该猪场疫情即得到了控制。

羔羊大肠杆菌分离鉴定及其致病性、耐药表型和耐药基因检测

目的:对皖北地区羊养殖场中所采集的37份腹泻羔羊粪便样本进行病原菌的分离鉴定,并对其耐药性及耐药基因进行测定。方法:将采集样本进行病原菌分离鉴定并进行同源性分析,通过药敏试验测定分离菌药物敏感性并对其耐药基因进行检测。结果:试验分离细菌37株,经生长特性、生化鉴定及16S rRNA测序对比序列确定分离菌均为大肠杆菌。致病性检测大肠杆菌中有21株为产志贺毒素大肠杆菌,其中S tx-1毒力基因和Stx-Ⅱ毒力基因分别占比8.10%和48.65%,肠毒性大肠埃希杆菌在本次试验中未检出。对分离的大肠杆菌进行耐药基因检测,6组耐药基因中tetA(97.30%)和qnr(83.78%)检出率较高。药敏结果显示分离的大肠杆菌对复方新诺明和林可霉素的耐药率分别达到89.19%和94.59%。结论:皖北地区部分大肠杆菌存在致泻性、携带多种耐药基因、存在多重耐药情况。

鸽Ⅰ型副粘病毒的分离鉴定

用SPF鸡胚 ,从病死鸽的脑组织中分离到一株病毒。该病毒能使鸡红细胞发生凝集 ,而且这种凝集能被鸡新城疫标准阳性血清所抑制。通过进一步对该病毒进行回归试验、MDT、ICPI、IVPI及其他生物学特性试验 ,证实该分离株为鸽Ⅰ型副粘病毒 (PMV_Ⅰ )

不同季节的沼液中细菌分离培养与含量分析

采用TPY琼脂分别对不同季节的好氧、厌氧沼液中的细菌进行需氧和厌氧培养,对培养出的细菌进行计数和形态观察。结果表明:(1)夏季厌氧沼液中厌氧菌及兼性细菌数量均极显著高于春季;夏季好氧沼液中好氧菌数量显著高于春季。(2)冬季厌氧沼液的厌氧培养和需氧培养的细菌数量,均极显著低于秋季;冬季好氧沼液中的需氧培养出的细菌数,显著低于秋季。(3)夏、秋季的厌氧沼液,厌氧培养出的细菌数极显著高于好氧沼液厌氧培养出的细菌;冬季厌氧沼液厌氧培养出的细菌数,显著高于好氧沼液厌氧培养出的细菌。(4)沼液中的细菌种类繁多,表型特征复杂。(5)沼液中的杆菌最多,其夏季各种形状菌都较其它季节多。(6)四季沼液中,革兰氏阴性菌均占多数,革兰氏阳性菌均占少数。

复方杜仲对AA肉仔鸡新城疫HI抗体效价的影响

目的：通过检测AA肉仔鸡新城疫HI抗体效价的变化，以观察复方杜仲对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响。方法：将224只1d龄AA肉鸡随机分成4组，每组56只，即复方杜仲低剂量组、复方杜仲中剂量组、复方杜仲高剂量组和对照组，试验期为42d。每周在各组鸡群中随机抽6只鸡采血，分离血清，测定NDVHI抗体水平。结果：试验组鸡群血清NDVHI抗体水平在试验期内（1—42）d均高于对照组，与对照组比，在注射后2—3周内差异有显著意义，大剂量组P〈0．01，中、低剂量组P〈0．05。结论：在AA肉鸡饮水中添加复方杜仲煎煮液对鸡新城疫疫苗免疫具有明显的免疫增强效果。

鸡鸭鹅新城疫病毒毒力及生物学特性的研究

为了测定鸡、鸭、鹅新城疫病毒的毒力强弱。测定其血凝价、血凝素热稳定性试验、血凝解脱试验、氯仿敏感性试验、耐酸性试验,并对3株病毒进行理化特性测定;测定其1日龄雏鸭脑内接种致病指数、6周龄鸭静脉接种致病指数和对13日龄非免疫鸭胚的半数感染量(EID_(50))。结果鸡、鸭、鹅新城疫病毒的血凝价依次为2~9、2~8、2~8;血凝素热稳定性指数分别为5、15、15 min;血凝均为快速解脱型;对氯仿敏感;对p H值3.0、p H值5.0均敏感;1日龄雏鸭脑内致病指数分别为0.59、0.84、1.04;6周龄静脉接种致病指数均为0;对13日龄鸭胚的半数感染量(EID_(50))分别为:10^(-5.31)/0.1 m L、10^(-6.5)/0.1 m L,10^(-7.79)/0.1 m L。表明鸡新城疫为中等偏弱毒力毒株,而鸭、鹅新城疫病毒均为中等毒力毒株。

鹅源福氏志贺氏菌分离鉴定及耐药性分析

对某养殖户送检的腹泻病死鹅进行病原分离鉴定、耐药性和致病性分析。结果分离到1株革兰氏阴性细小杆菌,该菌16S rRNA的序列与GenBank上登录号为NR-026331.1福氏志贺氏菌的同源性为99.38%,确定该菌为福氏志贺氏菌。该菌对头孢西丁、头孢曲松、头孢噻呋钠等敏感。该菌含有卡那霉素类耐药基因aadA1、β-内酰胺酶类耐药基因blatem-1以及磺胺类耐药基因Sul1,并含有编码调控蛋白的基因vira、编码黏附与侵入肠黏膜细胞肠毒性因子基因Ia1以及编码志贺氏菌肠毒素1基因set1B。

13株仔猪黄痢病原菌的分离鉴定及致病基因的PCR检测

[目的]对从仔猪黄痢病死仔猪肝脏中分离的13株病原菌进行分离鉴定及其致病基因的PCR扩增,为该病的微生物学诊断及其病原的致病机理探讨提供参考资料。[方法]分别采集死于仔猪黄痢病仔猪肝组织,在麦康凯琼脂上进行病原菌的分离培养、革兰染色镜检、生化试验、DNA模板的制备、致病基因PCR扩增。[结果]从几个猪场采集的仔猪黄痢病死仔猪肝脏中分离到13株病原菌,其中一株为革兰阳性球菌,其余均为革兰阴性短杆菌,经PCR检测结果表明均为产肠毒素大肠杆菌并且均含有HPI^+。[结论]从上述结果可知,从发生仔猪黄痢猪场采集的病死仔猪肝脏中分离的13株病原菌一些为产肠毒素大肠杆菌并且均含有HPI^+,少数肠球菌也可引起仔猪黄痢。

20份中草药提取液抗禽流感病毒作用的实验研究

目的探讨中草药做为添加剂预防禽流感的可行性。方法选用20份单味和复方中草药制剂,在9日龄非免疫鸡胚中进行抗禽流感病毒试验。结果羌活煎煮液,霍香煎煮液,麻杏射防煎煮液,银射煎煮液,荆芥煎煮液,银花挥发油,板蓝根煎煮液等6种中草药提取液对禽流感病毒(AIV)均有明显的抑制作用。结论中草药用于禽流感以预防为主。

鸽Ⅰ型副粘病毒F基因序列的扩增、序列测定及同源性分析

目的根据NDV的F基因保守区设计1对引物,用RT-PCR方法扩增出鸽型副粘病毒JS株融合蛋白基因(F基因)的部分片段,并测序。结果表明,JS株与现今国际上已发表的NDV的LaSota株F基因的同源性为96.6%,与F48E9株F基因的同源性为94.0%。

壳聚糖对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验

将2g壳聚糖加入一定量的蒸溜水和乙酸配成2%(20g/L)的壳聚糖原液,再用蒸馏水稀释至10g/L、5g/L、2.5g/L、1.25g/L和0.625g/L,同时以相应浓度醋酸溶液作为对照,然后用圆纸片扩散试验对奶牛无乳链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌进行体外抑菌试验。结果表明:壳聚糖对上述4种细菌的生长均有不同程度的抑制作用,且随着壳聚糖浓度的降低,对细菌生长繁殖的抑制作用相应减弱。

绿脓杆菌致死鹅胚的初步研究

安徽某孵房在鹅胚孵化至25日龄时,鹅胚出现死亡;至28日龄,该批鹅胚全部死亡。对送诊的死亡鹅胚进行病原分离与鉴定,结果表明本次鹅胚死亡的原因是由绿脓杆菌感染引起。

中草药对大肠杆菌体外抑菌试验

选用 2 7种不同的中草药制剂 (煎剂、挥发油、蒸馏液 ) ,以平板稀释法和纸片法对同一株肉鸡源的大肠杆菌进行体外抑菌试验。结果表明 ,有 14种中药对此株大肠杆菌有不同程度的抑制作用。试验还表明中药制剂的配方工艺不同 。