膜联蛋白5对人精子膜及DNA完整性的影响

目的:研究膜联蛋白5(Annexin5)对人精子细胞膜及DNA完整性的影响。方法:①精子膜完整性测定:按精子浓度>20×106/ml;活率>60%选取标准收集精液标本53份,分为3组,实验组为47.5μl精液中加入2.5μl10-6mol/L的Annexin5;阴性对照组为47.5μl精液标本中加入2.5μl1mol/L的Tris-HCl(pH8.0,25℃);空白对照组为47.5μl精液标本中加入2.5μl0.01mol/L的PBS(pH7.4),作用20min后,通过精子低渗肿胀试验(HOS)检测精子膜的完整性。②DNA完整性测定:同方法①,3组实验标本作用20min后,每份标本加入2.5μl0.02mol/L的H2O2,作用60min,通过吖啶橙(AO)荧光染色检测精子核DNA的完整性。结果:An-nexin5处理20min后低渗肿胀精子百分率与空白对照组及阴性对照组比较均具有极显著差异[(66.17±12.02)%vs(58.13±13.08)%,P<0.01;(66.17±12.02)%vs(59.94±11.91)%,P<0.01];空白对照组与阴性对照组比较无显著性差异。加入H2O2后,Annexin5组的DNA碎片指数与空白对照组及阴性对照组比较均具有极显著差异[(6.39±1.07)%vs(11.16±1.16)%,P<0.01;(6.39±1.07)%vs(10.86±1.05)%,P<0.01],空白对照组与阴性对照组比较无显著性差异。结论:Annexin5蛋白能在体外提高低渗肿胀精子百分率,对精子膜的完整性具有保护作用,同时对HO作用引起的精子核DNA破坏起保护作用。

膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞中类固醇急性调节蛋白和睾酮合成相关酶表达的影响

目的:研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞24 h后,用10-9mol/L的annexin 5处理间质细胞12 h和24 h,分别提取细胞总RNA和总蛋白;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测类固醇急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)、17α-羟化酶(17α-hydroxylase,CYP17A)、17β-羟基类固醇脱氢酶Ⅹ型(17β-HSD10)mRNA表达的改变,并用蛋白免疫印迹方法(Western blotting)检测蛋白表达水平的变化。结果:与对照组相比,在mRNA水平上,annexin 5处理细胞12 h后,只有17β-HSD10的表达升高了26%(P<0.05),其他差异均无统计学意义,而处理24 h后,StAR、P450scc和3β-HSD的表达分别升高55%、69%和59%(P<0.05),17β-HSD10升高了104%(P<0.01),17α-hydroxylase表达则无显著差异;在蛋白水平上,annexin 5处理细胞12 h后,17β-HSD的表达升高了39%(P<0.05),而处理24 h后发现,除StAR表达无显著变化外,P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达分别升高了35%、88%(P<0.05)和47%(P<0.01)。结论:Annexin 5对睾酮合成具有调节作用,这种作用是通过在基因水平和蛋白水平上影响P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达而实现的。

膜联蛋白5对雄性SD大鼠睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响

目的研究注射膜联蛋白5后雄性SD大鼠睾丸类固醇急性调节蛋白(Steroidogenic acute regulatory protein,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450 cholesterol side-chain cleavage enzyme,P450scc)和3β-羟类固醇脱氢酶(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)表达的改变,初步探讨膜联蛋白5影响睾酮分泌的机制。方法将20只SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组又分为7.5μg/kg组、15μg/kg组和30μg/kg组,每组5只。对照组大鼠腹腔注射等量的pH8.0 Tris-HCl,实验组腹腔注射不同剂量的膜联蛋白5,1次/d,连续20 d。用RT-PCR方法分别检测对照组和各实验组SD大鼠睾丸组织中睾酮合成相关的StAR、P450scc和3β-HSD mRNA的表达变化,并用Western blot方法检测以上3种物质蛋白质水平的变化。结果与对照组相比,在mRNA水平上,7.5μg/kg组和15μg/kg组大鼠睾丸组织P450 scc mRNA表达分别增加了25.9%[(0.68±0.04)vs(0.54±0.03),P<0.01]和27.8%[(0.69±0.04)vs(0.54±0.03),P<0.01];3β-HSD mRNA表达分别升高了32.9%[(1.05±0.07)vs(0.79±0.10),P<0.01]和53.2%[(1.21±0.07)vs(0.79±0.10),P<0.01];而30μg/kg组表达差异无统计学意义;在蛋白水平上,15μg/kg组大鼠睾丸组织P450 scc蛋白表达提高了34.2%[(0.37±0.04)vs(0.28±0.02),P<0.01],7.5μg/kg组和15μg/kg组的3β-HSD表达也分别增加了14.7%[(1.53±0.10)vs(1.34±0.05),P<0.01]和24.4%[(1.67±0.14)vs(1.34±0.05),P<0.01];而StAR的表达无论在转录水平还是在蛋白水平上,较对照组差异均无统计学意义。结论膜联蛋白5可通过调节P450scc与3β-HSD的表达来调节睾酮合成。

喀斯特的绿色畅想——贵州草地生态畜牧业发展走笔

贵州“八山一水一分田”，是个农业欠发达的省分，生态保护与经济发展的矛盾尖锐，突出的人地矛盾、脆弱的生态环境、恶劣的气候及落后的生产习惯严重制约着全省的可持续发展。

对话李命志

9月20日至21日，第三届贵州盛世经济论坛暨全省人大财经工作联系会第三次会议在铜仁地区召开，会议就贵州省“十二五”规划编制的有关情况进行了深入交流和探讨，省人大常委会副主任傅传耀出席会议并讲话。

天峰厂的生与死

2007年底到2008年初，“贵州环境公益诉讼第一案”成为了全省媒体瞩目的焦点。案件中，贵州天峰磷化工有限责任公司因在生产磷胺过程中，产生大量磷石膏废渣。这些废渣，被雨水冲刷后产生的废液未经任何处理，经地表、地下排人羊昌河并流向红枫湖，直接导致了红枫湖严重的污染，总磷超标。

人大常委会机关召开离退休老干部座谈会

2009年12月15日，贵州省人大常委会机关召开了离退休老干部座谈会，省人大常委会副主任肖永安表示，人大工作的开展要多听取老领导、老同志的建议与意见。

避免政府推卸责任 是人大立法职责所在

7月13日，贵阳市人大常委会组织《贵阳市住宅小区人口和计划生育管理服务规定（草案）》立法听证会（以下简称《规定》（草案））。笔者参加此次听证会，会上有关法律专家、机关职能部门、基层工作者、物业公司工作人员各抒己见，亮明观点，无疑是一次开门立法的良好实践。

省人大常委机关召开青年干部职工参与“绿丝带”志愿者活动动员会

5月31日上午，贵州省人大常委会机关组织召开了青年干部职工参与合力推进“三创一办”“绿丝带”志愿者活动动员会，省人大机关党委书记、秘书长、周忠良参加了会议并发言。

全国人大《非物质文化遗产法（草案）》调研组来黔调研

11月24日，全国人大常委、法律委员会主任委员胡康生，全国人大常委、法工委副主任信春鹰率调研组来黔就非物质文化遗产相关保存、保护工作等情况展开专题调研，并征求对《非物质文化遗产法（草案）》的修改意见和建议。省人大常委会副主任陈华祥全程陪同调研。

回顾与展望——纵谈社会主义法律体系建设历程

2008年3月，全国人大常委会委员长吴邦国在全国人民代表大会常务委员会上强调了到2010年建成社会主义法律体系的目标。自此，新一轮法律清理活动迈开了步伐，全国人大及其常委会的主要任务被定位为：进一步完善社会主义法律体系，淘汰不适用于新时代的旧法，进一步加大了现有法律的修改力度。

沦陷与救赎屯堡保护迷思

不少人说，若想梦回六百年，品味大明时代汉人的遗风，一探故国旧事，那就要到贵州，到安顺，到屯堡看一看! 此话不假。 在今日的贵州安顺，生活着一支与众不同的汉族群体，他们居住在六百年前所建的石头房子中，身着明朝时期汉人的装束，具有的腔调以及生活习俗甚至娱乐方式，就如“明朝那些事儿”重现一般……

陈至立赴黔参加“送温暖、三下乡”活动启动仪式

2009年12月16日至17日，全国人大常委会副委员长、全国妇联主席陈至立赴黔参加全国妇联“送温暖、三下乡”活动启动仪式，在行程中陈至立指出要结合工作实际，深入贯彻落实中央经济工作会议精神，更好的履行职能，做好服务大局、服务妇女、服务基层的工作。

顺应时代发展 护航贵州崛起——贵州省综合应急救援总队正式成立

一支“忠诚可靠、服务人民、竭诚奉献”始终与贵州省委、省人民政府保持高度一致，始终保持同人民群众的血肉联系，时刻听从党委、政府的召唤，切实做到“招之即来，来之能战，战之能胜”的抢险救援“排头兵”正在贵州崛起。

夯实贵州“防火墙”

8月20日，贵州省召开构筑社会消防安全“防火墙”工程建设推进会，推出了贵阳市南国花锦商场、欢唱时尚KTV等消防安全“四个能力”建设试点单位，对贵阳、遵义、六盘水等地成功经验进行了交流。

省人大常委会副主任林明达慰问抗旱英雄成名尧遗孀

3月18日晚，贵州省人大常委会副主任、省总工会主席林明达前往长顺县长寨镇冗雷村看望了献身在抗旱救灾一线的长寨镇原人大主席成名尧的家人。慰问中，林明达代表省人大常委会、省总工会将慰问金送到了成名尧遗孀的手中。

省人大关机举办当前形势与学习五中全会精神专题讲座

10月26日，为进一步深入学习和贯彻党的十七届五中全会精神，省人大机关党组书记暨正初级干部培训班举办了“当前形势与五中全会精神”专题讲座，演讲由贵州省社科院副院长雷厚礼主讲，机关全体干部职工参加了本次讲座。