卵圆细胞在实验性肝癌发生过程中的演变特征

背景与目的:卵圆细胞在肝癌发生过程中的作用至今还不十分明了。本研究拟通过动态的方法观察卵圆细胞在肝癌发生过程中的演变规律,揭示卵圆细胞与肝癌发生之间的关系。方法:构建实验性肝癌的大鼠诱癌模型,运用常规HE染色、免疫组织化学和爱新蓝特殊染色等方法,动态观察卵圆细胞在肝癌发生过程中的演变规律。结果:HE和免疫组化结果显示,在诱癌的第4周即可见散在的卵圆细胞在门管区附近出现,卵圆细胞OV-6免疫染色呈阳性。在诱癌的第8周和第14周,OV-6阳性细胞逐渐增多,并向肝小叶实质内深入,将肝组织分割成假小叶状。到诱癌的第17周和第24周,多个癌灶出现,同时OV-6阳性细胞的总体数量下降,癌灶内可观察到OV-6阳性细胞。爱新蓝特殊染色显示,诱发的肿瘤属混合性肝癌,其中胆管上皮细胞癌爱新蓝染色呈阳性,肝细胞癌染色呈阴性。结论:卵圆细胞在肝癌的发生过程中可能扮演重要的角色。

同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型的建立及其对造血干细胞植入的影响

【目的】建立同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型，研究该技术对造血干细胞(HSC)归巢、植入率、移植后免疫造血重建、移植物抗宿主病(GVHD)等方面的影响。【方法】用C57BL／6胎鼠及新生鼠外周血(FNPB)作供体，以单侧胫骨骨髓腔内注射(IBMI)和尾静脉注射(IV)两种途径移植经亚致死量^(60)Coγ射线辐照预处理的BALB／c鼠。200只受鼠随机分为4组：骨髓腔内注射组(IBM组)；尾静脉注射组(IV组)；放疗对照组；正常对照组，每组50只。用组织冰冻切片和流式细胞术动态了解CFSE标记FNPB在受体内的分布变化，并观察移植后受鼠存活状况、植入水平、造血与免疫功能恢复及GVHD情况。【结果】①荧光际记FNPB体内动力学显示直至输注后72h，供体FNPB经IBMI后主要积聚于注射侧骨髓腔内，肺部滞留很少。而IV组及IBM组非注射侧骨髓中的FNPB细胞数显著少于IBM组注射侧，IV组非造血组织器官如肺部有明显供体细胞滞留。②同种异基因小鼠CBT模型中IBM组造血、免疫功能的恢复明显快于IV组，无GVHD，移植后90d存活率达到90％，注射侧胫骨植入水平(29.53±6.64)％，较IV组有显著改善。③IBM输注侧骨髓中供体HSCs植入水平及造血重建速度明显优于非注射侧骨髓。【结论】成功建立同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型，并证实IBMI途径对促进HSCs植入，造血免疫功能重建，提高UCBT效果方面优于IV途径，多部位IBMI可能更有利于HSC归巢骨髓。

Survivin在肝细胞癌中的表达特点及其与预后的关系

目的:研究原发性肝细胞癌组织中Survivin的表达及其与肝癌细胞的生物学行为及预后的关系。方法:应用免疫组织化学染色对83例肝癌及相应癌旁组织中Survivin蛋白的表达情况进行检测,应用半定量RT-PCR技术对11例肝癌及相应癌旁组织中Survivin mRNA的表达情况进行检测,结合临床病理资料分析。结果:肝癌及癌旁组织中Survivin蛋白的表达率分别为63.9%(53例)和39.6%(21例)。肝癌组织中,41.5%(22例)表达于肝癌细胞核,45.3%(24例)表达于肝癌细胞浆,13.2%(7例)在胞核、胞浆中均有表达。统计学分析表明,Sur-vivin蛋白阳性反应定位于胞核的病例,其肿瘤的包膜侵犯率和转移率更高(P<0.05);且术后生存期<2年的肝癌组中的核表达率显著高于术后生存期≥2年者(P<0.01)。RT-PCR结果显示,11例肝癌组织均表达Survivin mRNA,而癌旁组织只有45.5%(5例)表达。结论:Survivin在肝癌中呈现高表达,其核表达与肝癌的恶性生物学行为及预后密切相关。

NF-κB及IL-1ra在胃癌中的表达及其意义

【目的】探讨NF-κB及IL-1ra在胃癌中的表达及其意义。【方法】通过组织芯片,采用免疫组织化学方法(LSAB法)检测核因子-κB(NF-κB)和抗炎因子白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)在359例胃癌组织中的表达情况。【结果】NF-κB在伴发淋巴结转移、处于TNMⅢ+Ⅳ期、组织学分化较低的胃癌患者中的表达水平分别为80.2%、80.0%、79.2%;IL-1ra在原发灶癌直径≤3cm、早期癌、无淋巴结转移和处于TNMⅠ+Ⅱ期的胃癌患者中表达水平分别为61.7%、75.0%、66.4%、61.9%;NF-κB表达阴性的胃癌患者5年生存率高于阳性患者(P=0.036);伴IL-1ra阳性表达的NF-κB阴性表达患者生存率高于其它组别患者(P=0.021)。【结论】NF-κB的表达水平可以作为胃癌预后不良的指标;IL-1ra可能是延缓胃癌恶性发展的保护因素,但尚需进一步的研究证实。

大小肝癌中相关因子的表达差异及其意义

目的:比较影响大、小肝癌生物学行为差异的相关因素,并探讨其可能的机制。方法:采用免疫组化方法检测nm23-H1、c-Met、MT1-MMP(membrane-type1matrixmetalloproteinase)、Ki-67蛋白在53例大肝癌(瘤体直径>3cm)及40例小肝癌(单肿瘤结节,瘤体直径≤3cm)中的表达,并分析其与肝癌临床病理因子的关系。结果:nm23-H1、c-Met、MT1-MMP蛋白在大、小肝癌组织中的表达差异显著(分别为P=0.005、P=0.008和P=0.007);nm23-H1蛋白表达与肿瘤远处转移之间呈负相关关系(P=0.041);c-Met、MT1-MMP蛋白表达与肿瘤包膜浸润、远处转移之间均呈正相关关系(P<0.05)。结论:大肝癌组织表达nm23-H1、c-Met、MT1-MMP蛋白发生改变,是促使其生物学行为较小肝癌更为恶性的重要因素。

影响肝细胞癌生物学行为及预后的相关因子分析

目的探讨影响肝癌生物学行为及预后的重要因素和寻求肝癌基因治疗的有效靶点。方法运用免疫组化方法检测Ki67、nm23H1、cMet及MT1MMP蛋白在93例肝细胞癌组织中的表达水平,并判断其与肝癌细胞恶性生物学行为及患者预后的关系。结果Ki67、nm23H1、cMet及MT1MMP蛋白表达水平与肝癌患者预后均具有显著相关性(P均<0.01);nm23H1的表达与肿瘤远处转移之间呈负相关关系(P=0.041);cMet、MT1MMP的表达与肝癌瘤旁浸润及远处转移之间均呈正相关关系(P<0.05)。结论nm23H1基因的失活或突变,伴随cMet以及MT1MMP蛋白的异常表达可能是导致肝癌浸润、转移的关键因素。

影响肝癌生物学行为及预后的相关因子研究

[目的]研究原发性肝细胞癌组织中Ki67、Fas及survivin蛋白的表达及其与肝癌的生物学行为及预后的关系。[方法]应用免疫组织化学方法对83例肝癌组织中Ki67、Fas及survivin蛋白的表达情况进行检测,结合临床病理资料分析。[结果]Ki67、Fas及survivin蛋白表达水平与肝癌患者术后生存率关系密切;survivin与Ki67的表达呈显著正相关(P<0.01);survivin与Ki67的表达均与Fas表达呈显著负相关(P<0.05),与癌栓形成及肿瘤转移呈显著正相关(P<0.01);Fas的表达与癌栓形成及肿瘤转移呈显著负相关(P<0.01)。[结论]Ki67、Fas与survivin的表达可能与肝癌的生物学行为及预后密切相关,有可能作为预测肝癌患者预后的指标。

癌基因对大鼠肝卵圆细胞分化和转化的影响

目的:通过对体外培养的大鼠卵圆细胞进行AFP和c-ras、c-myc基因的动态测定,观察二者在卵圆细胞转化过程中的变化特点,探讨癌基因对细胞分化和转化的影响.方法:用化学致癌剂3’-Me-DAB诱发出SD大鼠肝卵圆细胞增生,采用Percoll密度梯度离心法分离之,并进行长期体外培养.在培养过程中,通过免疫荧光流式细胞仪租RNA-DNAslotblot杂交分别测定细胞AFP及癌基因的表达隋况.结果:AFP及c-ras、c-myc在卵圆细胞体外培养的不同时期呈现同步升高或降低:培养初期,卵圆细胞AFP及癌基因均呈高表达,而后下降;第20代时再次升高,之后维持在较低的表达水平.至第65代时,卵圆细胞不仅呈现出生长速度加快、群体倍增时间缩短、多倍体核型及软琼脂生长,而且癌基因及AFP的表达亦第3次升高.结论:癌基因及其产物不仅参与细胞的转化过程,亦可调节细胞的分化.

卵圆细胞的生物学特征及其与肝癌发生的关系

目的通过动态的方法观察卵圆细胞的主要生物学特征及其在肝癌发生过程中的演变规律,揭示卵圆细胞与肝癌发生之间的关系。方法构建实验性肝癌的大鼠诱癌模型,运用常规HE染色、免疫组织化学和爱新蓝染色等方法,动态观察卵圆细胞在肝癌发生过程中的演变规律和分子表达特征。结果随着诱癌时间延长,逐渐出现卵圆细胞的增生、癌前病变、胆管细胞癌和(或)肝细胞癌,各阶段卵圆细胞均表达OV-6、AFP和c-kit。结论原发性肝癌可能与卵圆细胞异常分化有关,卵圆细胞特征性表达为OV-6、AFP和c-kit。

大鼠肝癌形成过程中癌基因表达变化的意义

目的:探讨癌基因在实验性大鼠肝癌形成过程中的表达变化特点及其生物学意义.方法:应用化学致癌剂3'-Me-DAB建立大鼠肝癌模型,取其肝脏用核酸原位杂交和RNA Slot blot杂交方法,动态检测c-myc、Ha-ras和Ki-ras在实验性大鼠肝癌形成过程中的表达变化.结果:在诱癌全过程中,c-myc和Ha-ras均为同步表达;在诱癌的早期可检测到较多c-myc和Ha-fas的阳性表达细胞,而Ki-ras阳性的细胞数则很少,且反应强度弱;而诱癌后期,各癌基因mRNA阳性表达细胞均减少;至17 wk,所有癌组织内均显示3种癌基因表达阴性,或仅见个别小癌巢内少数癌细胞呈弱阳性.而癌旁肝组织内却可见三种癌基因的大量表达.结论:c-myc与Ha-fas被激活是肝癌发生过程中的早期事件,且二者之间具有协同作用,而这种协同作用在肝癌的启动上可能具有重要意义;Ki-ras的激活则发生较晚,可能与促进细胞恶性转化有关.

IgA肾病的病理特点及类型

【目的】探讨 IgA 肾病的病理特点及类型。【方法】肾穿活检病例分别作免疫萤光、常规光镜和电镜观察。统计临床及病理特点。【结果】本组 IgA 肾病共634例,占同期肾穿病例的17.6%。平均年龄29.1岁。88.4%的病例发生在10～49岁。临床上以血尿为主诉的仅占40.3%。IgA 肾病病理分类为:①正常肾小球55例,占8.7%;②系膜增生型333例,占52.5%;③进行性硬化型92例,占14.5%;④局灶性病变146例,占23.1%;⑤其他类型8例,占1.3%。【结论】①IgA 肾病诊断标准:临床上以无诱因血尿,血液免疫学 IgA 升高为主,部分病例亦可或/和合并蛋白尿。病理学上以系膜区大量 IgA 沉积为主要特征,有时亦可合并基底膜上沉积。②IgA 肾病的病理学类型是多样性的。

高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的远期影响

【目的】探讨早期和延迟高压氧(HBO)治疗对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的远期影响。【方法】7日龄大鼠37只随机分为对照组(n=10，假手术处理)、HIBD组(n=9)、EHBO组(n=9，HIBD模型后0.5～1h开始2个绝对大气压HBO治疗，稳压30min／次，间隔24h，连续2次)和LHBO组(n=9，HIBD模型后48～72h开始2个绝对大气压HBO治疗，稳压30min／次，间隔24h，连续5次)，以大鼠远期的学习记忆功能(Morris水迷宫实验)和海马形态组织学(海马锥体细胞层结构和CA1区存活神经元数)来判断干预效果。【结果】HIBD组大鼠的学习记忆功能严重不良伴海马结构严重受损，与对照组相比，水迷宫实验中平均逃逸潜伏期延长(56.35s与23.07s，P＜0.05)、搜索时间和搜索路程缩短(分别为29.29s与51.21s，548cm与989cm，均P＜0.05)、海马存活神经元减少(100个／mm与183个／mm，P＜0.05)；早期HBO治疗明显减轻HIBD大鼠的学习记忆功能障碍(潜伏期：39.17s与56.35s；搜索时间：36.84s与29.29s；搜索路程：686cm与548cm，P＜0.05)，并使海马存活神经元增多(131个／mm与100个／mm，P＜0.05)，延迟HBO治疗不能减轻HIBD大鼠的学习记忆功能障碍(潜伏期：56.25s与56.35s；搜索时间：30.11s与29.29s；搜索路程：572cm与548cm，P＞0.05)，海马存活神经元无增多(95个／mm与100个／mm，P＞0.05)；大鼠在水迷宫实验中的逃逸潜伏期与海马锥体细胞层存活神经元数呈直线负相关(r=-0.819，P＜0.01)。【结论】早期HBO治疗可减轻HIBD程度，并可改善HIBD所引起的远期学习记忆功能缺陷，延迟HBO治疗对HIBD无效。

细胞增殖与凋亡相关因子在大 小肝癌中的表达差异及其意义探讨

目的:检测Ki67、Fas、Bax及Survivin蛋白在人体大、小肝癌组织中的表达及其与肝癌生物学行为的关系。方法:应用免疫组化方法检测40例小肝癌和43例大肝癌中Ki67、Fas、Bax及Survivin蛋白的表达,结合临床病理资料分析。结果:Fas及Bax在小肝癌中的表达显著高于大肝癌(P<0.05);Survivin与Ki67的表达均与Fas表达呈显著负相关(P<0.05),与包膜侵犯、癌栓形成及肿瘤转移呈显著正相关(P<0.01);Fas的表达与癌栓形成及肿瘤转移呈显著负相关(P<0.01)。结论:伴随Fas及Bax的表达减少或缺失,肝癌细胞凋亡的趋势逐渐减弱,从而导致肿瘤迅速生长、增大。Ki67、Fas与Survivin的表达与肝癌的生物学行为密切相关。

在石蜡切片中检测ER、PR的体会

检测组织切片上某些肿瘤细胞的雌激素受体（ＥＲ）、孕激素受体（ＰＲ），对指导临床内分泌治疗及推测肿瘤预后有重要意义。如何成功地检测肿瘤细胞内的ＥＲ、ＰＲ受体，是广大病理工作者最为关心的问题。一些医院由于种种原因，致使在染色过程中达不到理想的结果。针对存...

骨肉瘤组织中MICA基因mRNA和蛋白的表达

【目的】检测骨肉瘤组织中MHCI类链相关蛋白A(MHC class I chain-related A,MICA)基因mRNA和蛋白的表达情况,为探讨骨肉瘤的肿瘤免疫机制提供信息。【方法】应用RT-PCR方法检测MICA mRNA在11例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中的表达情况;分别应用免疫组织化学方法、Western blot和流式细胞术检测66例石蜡包埋骨肉瘤组织、6例石蜡包埋正常人骨组织、9例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中MICA蛋白的表达情况。【结果】骨肉瘤组织中MICA mRNA表达率为81.8%(9/11),5个骨肉瘤细胞株均表达MICA mRNA;MICA蛋白在骨肉瘤组织和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)和0%(0/6);骨肉瘤细胞株Saos-2、MG63和HOS阳性表达膜表面MICA蛋白,而细胞株U2OS和OS732只有少量细胞呈阳性表达。【结论】MICA mRNA和蛋白广泛表达于骨肉瘤组织和细胞株。

乳腺大汗腺癌临床病理分析及鉴别诊断

目的:探讨乳腺大汗腺癌的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法:对相关病例进行病理组织学和免疫组织化学观察并复习文献。结果:乳腺大汗腺癌具有特征性的病理改变。几乎所有肿瘤细胞具有大汗腺分化。表现为肿瘤细胞胞质丰富,部分细胞胞质强嗜酸性,部分细胞胞质内有数量不等的细小空泡,或呈泡沫状。结论:乳腺大汗腺癌是一种罕见的乳腺癌,诊断主要依赖于形态学,需要与伴有大汗腺化生的其他乳腺病变相鉴别。