YKL-40调控子宫内膜癌顺铂化疗耐药性的实验研究

目的探讨沉默甲壳质酶蛋白40(YKL-40)表达对子宫内膜癌顺铂(DDP)耐药细胞株Ishikawa/DDP的影响。方法采用DDP长期浓度梯度递增法体外建立Ishikawa/DDP耐药细胞株,并检测多药耐药相关基因(MDR1)和Bcl-2、Bax和caspase-3的表达,采用MTT法检测Ishikawa细胞和Ishikawa/DDP细胞的增殖活性,计算半数抑制浓度(IC50)。Ishikawa/DDP分别转染NC阴性序列(NC组)和siRNA YKL-40(si-YKL-40组),另设未转染细胞作为对照组,采用MTT法、划痕实验和Annexin V/PE双染法检测DDP对si-YKL-40组Ishikawa/DDP细胞增殖、迁移能力和凋亡的影响。结果体外成功建立Ishikawa/DDP耐药细胞株,3. 125、6. 25、12. 5、25、50、100μmol/L DDP对Ishikawa/DDP细胞的增殖抑制率分别为(6. 93±2. 45)%、(8. 14±4. 50)%、(11. 37±4. 62)%、(15. 18±3. 97)%、(26. 29±5. 08)%、(41. 32±7. 64)%,明显低于Ishikawa细胞(P<0. 05)。DDP对Ishikawa和Ishikawa/DDP的IC50分别为14. 58μmol/L和116. 70μmol/L,Ishikawa/DDP的耐药指数为8. 004。QPCR检测结果显示,Ishikawa细胞YKL-40、MDR1、Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA表达量分别为0. 82±0. 15、0. 43±0. 11、1. 05±0. 23、1. 17±0. 20、0. 96±0. 18,而Ishikawa/DDP细胞分别为1. 87±0. 40、2. 34±0. 46、1. 52±0. 28、0. 72±0. 21、0. 49±0. 17,差异有统计学意义(P <0. 05)。3. 125、6. 25、12. 5、25、50、100μmol/L DDP对si-YKL-40组细胞的增殖抑制率分别为(10. 95±2. 74)%、(18. 73±5. 30)%、(32. 79±5. 47)%、(52. 28±6. 58)%、(61. 73±5. 26)%、(65. 45±7. 33)%,明显高于对照组和NC组,差异有统计学意义(P<0. 05)。DDP对si-YKL-40组细胞的IC50为22. 19μmol/L。与对照组和NC组比较,si-YKL-40组细胞凋亡率升高、愈合率下降; YKL-40、MDR1、Bcl-2蛋白表达量下调,Bax和caspase-3蛋白表达量上调,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论沉默YKL-40可显著提高Ishikawa/DDP细胞株对DDP的敏感性,并促进细胞凋亡,其具体机制可能与下调MDR1、Bcl-2表达,及上调Bax和caspase-3表达有关。

川芎嗪联合mTOR抑制剂调控卵巢癌SKOV-3细胞增殖、侵袭迁移的实验研究

目的研究川芎嗪联合mTOR抑制剂对卵巢癌SKOV-3细胞增殖、侵袭迁移的作用。方法分别设置对照组、40μmol/L川芎嗪组、5μmol/L雷帕霉素组、40μmol/L川芎嗪联合5μmol/L雷帕霉素组,各组SKOV-3细胞给药后继续培养48 h后,MTT法考察各组SKOV-3细胞的增殖抑制率,Transwell实验检测各组SKOV-3细胞的侵袭能力,划痕实验检测各组SKOV-3细胞的迁移能力,实时定量PCR检测各组SKOV-3细胞中Bax、Bcl-2 mRNA水平,Western blot检测各组SKOV-3细胞中PI3K、Akt、mTOR水平,利用流式细胞仪对各组SKOV-3细胞周期进行检测。结果与对照组、川芎嗪组及雷帕霉素组相比,川芎嗪联合雷帕霉素组SKOV-3细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),SKOV-3细胞侵袭能力及迁移能力显著降低(P<0.05),SKOV-3细胞Bax mRNA水平显著升高(P<0.05),Bcl-2 mRNA水平显著降低(P<0.05),PI3K、Akt、mTOR水平均显著降低(P<0.05),G1期SKOV-3细胞显著增加(P<0.05)。结论川芎嗪联合mTOR抑制剂能够显著抑制卵巢癌SKOV-3细胞增殖、侵袭和迁移,其机制可能与调节PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

多西他赛联合氟尿嘧啶应用于晚期胃癌治疗的临床研究

目的探讨多西他赛联合氟尿嘧啶应用于晚期胃癌治疗的临床疗效,并分析其安全性。方法选取2013年2月至2015年3月该院收治的晚期胃癌患者100例,采用随机数字表法随机分为观察组与对照组,每组50例。观察组给予多西他赛联合氟尿嘧啶治疗,对照组给予多西他赛联合替吉奥治疗,对两组患者的近期疗效、毒副反应及体能状态的改善情况进行对比。结果观察组疾病控制率为92.00%,有效率为72.00%,对照组疾病控制率为64.00%,有效率为52.00%,观察组的疾病控制率及有效率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,观察组患者白细胞减少(38.00%),血红蛋白减少(14.00%),血小板减少(14.00%),恶心呕吐(20.00%),肾功能损害(16.00%),肝功能损害(2.00%)及发热毒副反应(4.00%)的发生率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者体能改善率为40.00%,对照组体能改善率为20.00%,观察组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论多西他赛联合氟尿嘧啶应用于晚期胃癌治疗具有显著疗效,稳定患者病情的同时,又能改善患者的体能状态。

推拿治疗急性腰痛在康复临床中的应用

急性腰痛是临床常见病，多发病，康复门诊非常多见，我们对1280例急性腰痛病人进行了推拿治疗，疗效满意。报告如下。

帕米膦酸二钠抑制人肝癌细胞增殖及诱导凋亡机制研究

目的肝癌是常见的恶性肿瘤之一,寻找其低毒有效的化疗药物具有重要的临床价值。本研究旨在探讨一种临床常用的骨吸收抑制剂帕米膦酸二钠对人肝癌HepG2及Bel-7402细胞体外增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用MTS法检测不同浓度的帕米膦酸二钠对HepG2和Bel-7402细胞体外增殖的影响;以TUNEL末端标记法和Annexin-Ⅴ-FITC双标记流式法检测帕米膦酸二钠对细胞凋亡的影响采用蛋白质印迹法检测帕米膦酸二钠对凋亡相关蛋白:聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、Caspase-9、Caspase-3、active-Caspase-3、Bax及Bcl-2表达的影响。结果 MTS检测显示,帕米膦酸二钠对HepG2及Bel-7402细胞均具有明显抑制作用,并呈剂量依赖性,药物的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC_(50))分别为46.12和51.35μmol/L。流式细胞术检测发现,帕米膦酸二钠可诱导肝癌细胞剂量依赖性凋亡,20、40和60μmol/L作用HepG2细胞24h凋亡率分别为(25.70±6.00)%、(43.53±4.06)%和(74.73±2.90)%,与对照组的(3.43±1.07)%相比差异有统计学意义,F=175.5,P<0.001;20、40和60μmol/L作用Bel-7402细胞24h凋亡率分别为(25.50±3.00)%、(48.30±1.02)%和(68.97±4.90)%,与对照组(3.33±0.05)%相比差异有统计学意义,F=81.97,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,帕米膦酸二钠可诱导细胞内凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-3及PARP的活化,促凋亡蛋白Bax的上调,抑凋亡蛋白Bcl-2的下调。结论帕米膦酸二钠可以明显抑制人肝癌HepG2及Bel-7402细胞的体外增殖,其机制可能与线粒体凋亡途径的激活而诱导癌细胞发生凋亡相关,帕米膦酸二钠可能成为潜在的肝癌治疗药物。

康莱特注射液灌注治疗晚期肺癌患者胸水的效果

目的探讨康莱特注射液胸腔灌注治疗晚期肺癌胸水患者的效果。方法 2010年3月至2014年7月收治的58例肺癌晚期患者,采用掷硬币法随机分为康莱特组(32例)和对照组(26例),康莱特组患者采用康莱特注射液胸腔灌注进行治疗,对照组患者采用顺铂治疗,比较两组患者的治疗效果和不良反应。结果康莱特组患者完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、疾病稳定(SD)+疾病进展(PD)分别为7例(21.9%)、17例(53.1%)和8例(25.0%),总有效率75.0%。顺铂组患者的CR、PR、SD+PD分别为4例(15.4%)、11例(42.3%)和11例(42.3%),总有效率为57.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。B超定量评估胸水治疗前组间差异无统计学意义(P>0.05),治疗后康莱特组患者胸水[(968±383.1)ml]低于对照组[(1157±425.5)ml],差异有统计学意义(P<0.05)。康莱特组不良反应率为34.4%,低于对照组的88.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论康莱特注射液灌注治疗晚期肺癌胸水患者的效果优于顺铂治疗效果,且不良反应轻。