长链非编码RNA-H19通过促进肺腺癌细胞的上皮-间充质转化促进其增殖和侵袭能力

目的探讨长链非编码RNA-H19(long non-coding RNA-H19,LncRNA-H19)对肺腺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法qRT-PCR检测LncRNA-H19在伴或不伴淋巴结转移的肺腺癌组织中,肺腺癌细胞系A549,NCI-H1299以及人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B中的表达;构建LncRNA-H19的siRNA干扰载体及过表达载体进行细胞转染;CCK-8增殖实验及Transwell细胞侵袭实验检测转染前后肺腺癌细胞的增殖、侵袭能力;Western blot检测转染前后肺腺癌细胞中上皮标志物上皮钙黏着蛋白(E-cadherin),间质标志物波形蛋白(Vimentin)的表达。结果LncRNA-H19在伴有淋巴结转移的肺腺癌组织中的表达明显高于不伴淋巴结转移的肺腺癌组织(P<0.05),在A549、NCI-H1299细胞中的表达均明显高于BEAS-2B(P<0.05);过表达LncRNA-H19后肺腺癌细胞增殖及侵袭能力明显上升,E-cadherin的表达明显下调而Vimentin的表达明显上调,而敲减LncRNA-H19后结果与之相反。结论LncRNA-H19可促进肺腺癌细胞A549,NCI-H1299的上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT),进而促进其增殖与侵袭能力。

急性氯化汞中毒后mmu-miR-429-5p靶向调控Aqp1致肾损伤的研究

目的本研究通过小鼠急性氯化汞(Mercury dichloride,HgCl_(2))中毒模型,研究肾水通道蛋白-1(Aquaporin-1,Aqp1)及mmu-miR-429-5p的表达变化,从而探究其可能发挥作用的分子机制,为急性HgCl_(2)中毒后的临床治疗提供更多的靶点以及为司法鉴定提供更多思路。方法全自动生化分析仪测定肾功能指标水平,苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织结构病理改变。免疫组织化学实验及Western blot检测Aqp1蛋白定量及定位。生物信息学网站预测能与Aqp1靶向结合的微小RNA(MicroRNAS,miRNAS)。结合双荧光素酶报告基因实验检测mmu-miR-429-5p与Aqp1之间是否存在结合靶点,实时荧光定量PCR(quantitative Real-Time PCR,qRT-PCR)检测Aqp1及mmu-miR-429-5p在肾组织中的表达水平。结果急性HgCl_(2)中毒后肾小管上皮细胞水肿及变性坏死,Aqp1在肾小管上皮细胞膜、肾小球毛细血管内皮细胞膜上表达降低。双荧光素酶报告基因实验结果显示mmu-miR-429-5p与Aqp1之间存在靶点结合。QRT-PCR结果显示Aqp1基因表达降低而mmu-miR-429-5p表达升高,两者之间存在负相关关系。结论急性HgCl_(2)中毒后mmu-miR-429-5p表达升高并可能通过靶向结合Aqp1致Aqp1蛋白表达降低,从而引起肾损伤。