耐碳青霉烯酶铜绿假单胞菌的耐药性分析及碳青霉烯酶初筛试验的应用

目的了解耐碳青霉烯酶铜绿假单胞菌(CRPA)的临床分布、对抗菌药物的耐药性及携带的碳青霉烯酶基因型。方法回顾性分析北京大学深圳医院住院患者临床样本分离的61株CRPA的科室分布、标本来源及耐药情况。随机挑取36株CRPA,采用乙二胺四乙酸(EDTA)双纸片增效法和免疫层析法进行碳青霉烯酶初筛试验。结果61株CRPA主要分布ICU 24株(39.34%)、呼吸内科9株(14.75%),脑外科7株(11.48%)。其标本来源以痰液为主,共49株(80.33%)。药敏试验结果显示,亚胺培南和美罗培南的耐药率分别达100.00%和78.69%,而氨基糖苷类药物阿米卡星耐药率最低,为8.20%。61株CRPA碳青霉烯酶初筛试验检测出金属β-内酰胺酶型阳性菌株3株(1株既产丝氨酸酶又产金属酶),丝氨酸酶型阴性菌株29株;CRPA耐药基因测序结果显示,有3株CRPA携带金属β-内酰胺酶blaIMP-45基因,32株CRPA携带丝氨酸酶OXA-50基因,未检出KPC、GES丝氨酸酶型及NDM、VIM金属酶型基因。结论CRPA主要分布于ICU,以痰液标本为主,其菌株多携带丝氨酸酶OXA-50基因;应针对不同科室加强医院防控措施,临床则应根据药敏试验选择抗菌药物预防CRPA传播。

高温对川硬皮肿腿蜂发育及Wolbachia携带的影响

温度是影响昆虫生长发育最重要的因子,也是影响昆虫共生微生物活性的重要因素。为了明确高温对川硬皮肿腿蜂Sclerodermus sichuanensis的生殖和发育特征及对其体内Wolbachia携带率的影响,本研究在27℃、30℃和33℃温度条件下连续繁育川硬皮肿腿蜂4代,测定不同温度下肿腿蜂的寄生能力、产卵前期、子代历期、子代数量和雄性比的差异;同时以Wolbachia特异的外膜蛋白基因(wsp)进行PCR扩增,检测是否携带该菌。结果显示,3个温度对川硬皮肿腿蜂的寄生率和子代羽化率均无显著影响,但对其产卵前期和子代发育有显著影响。随温度升高,雌蜂产卵前期延长,但子代的卵历期、幼虫历期和蛹历期显著缩短。在27℃、30℃和33℃下,子代卵历期分别为4.33 d、3.27 d和3.36 d;幼虫历期分别为6.77 d、5.85 d和5.07 d;蛹历期分别为13.85 d、12.35 d和10.96 d。在33℃下,幼期发育耗时较27℃时缩短了约5 d。川硬皮肿腿蜂单雌子代数随温度的变化无显著差异,但产雄数和子代雄性比例随温度升高显著增加,33℃下的单雌产雄数和雄性比例较27℃时提升了近3倍。连续繁育4代后川硬皮肿腿蜂Wolbachia携带率存在显著差异,27℃下肿腿蜂Wolbachia携带率为100%,但在33℃下其携带率下降至6.67%,温度与携带率存在显著的负相关关系。以上结果表明,在27~33℃,温度升高可显著缩短川硬皮肿腿蜂的繁育周期,增加子代雄性比例,证实了高温具有显著抑制该虫体内的Wolbachia活性从而增加子代雄性比的功能。繁育温度过高对川硬皮肿腿蜂生殖适合度是不利的,规模化繁育温度不宜超过30℃。